This study explores the interaction between the production of indole-3-acetic acid (IAA), a typical phytohormone auxin and the role of IAA biosynthetic pathways in each IAA producing rhizobacterial strain. The bacterial strains were isolated from rhizosphere of wild plants and identified as Acinetobacter guillouiae SW5, Bacillus thuringiensis SW17, Rhodococcus equi SW9, and Lysinibacillus fusiformis SW13. A. guillouiae SW5 exhibited the highest production of IAA using tryptophan-dependent pathways among the 4 strains. When indole-3-acetamide (IAM) was added, Rhodococcus equi SW9 showed the highest IAA production of $3824{\mu}g/mg$ protein using amidase activity. A. guillouiae SW5 also showed the highest production of IAA using two pathways with indole-3-acetonitrile (IAN), and its nitrile hydratase activity might be higher than nitrilase. B. thuringiensis SW17 showed the lowest IAA production, and most of IAA might be produced by the amidase activity, although the nitrilase activity was the highest among 4 strains. The roles of nitrile converting enzymes were relatively similar in IAA synthesis by Lysinibacillus fusiformis SW13. Tryptophan-independent pathway of IAA production was utilized by only A. guillouiae SW5.
Culture-dependent RFLP and culture-independent DGGE were employed to investigate the bacterial community associated with the marine sponge Asteropus simplex collected from Jeju Island. A total of 120 bacterial strains associated with the sponge were cultivated using modified Zobell and MA media. PCR amplicons of the 16S rDNA from the bacterial strains were digested with the restriction enzymes HaeIII and MspI, and then assigned into different groups according to their restriction patterns. The 16S rDNA sequences derived from RFLP patterns showed more than 94% similarities compared with known bacterial species, and the isolates belonged to five phyla, Alphaproteobacteria, Gammaproteobacteria Actinobacteria, Bacteroidetes, and Firmicutes, of which Gammaproteobacteria was dominant. DGGE fingerprinting of 16S rDNAs amplified from the sponge-derived total gDNA showed 12 DGGE bands, and their sequences showed more than 90% similarities compared with available sequences. The sequences derived from DGGE bands revealed high similarity with the uncultured bacterial clones. DGGE revealed that bacterial community consisted of seven phyla, including Alphaproteobacteria, Betaproteobacteria, Gammaproteobacteria, Deltaproteobacteria, Actinobacteira, Chloroflexi, and Nitrospira. Alphaproteobacteria, Gammaproteobacteria, and Actinobacteria were commonly found in bacteria associated with A. simplex by both RFLP and DGGE methods, however, overall bacterial community in the sponge differed depending on the analysis methods. Sponge showed more various bacterial community structures in culture-independent method than in culture-dependent method.
The yield of cellulase derived from Trichoderma $(O_2-1)$ was remarkably varied with various concentration of ethanol and acetone in purification of the enzyme. In the purification with ethanol of ${\beta}-glucosidase$, the best result was obtained in the concentration of 60% and, of CMCase and of filter paper disintegrating enzyme 80%. And in the purification with acetone of ${\beta}-glucosidase$, filter paper disintegrating enzyme, and CMCase, in the concentration of 60%, 80%, and 90% respectively, was shown the best yield. The activities of crude Cellulase preparation could be seperated into few of fractions by column chromatography with Silica gel, Cellulose powder, and gauze. Most of CMCase, avicelase, and ${\beta}-glucosidase$ were eluted, but most of filter paper disintegrating enzyme and the rest of enzymes mentioned the above were absorbed, and were eluted with water. Therefore, it was considered that CMCase is different from filter paper disintegrating enzyme in properties. The relative activity of CMCase was different from that of avicelase in the peak of elusion part. And it was considered that filter paper disintegrating enzyme and cellulose powder saccharifying enzyme was seperated respectively as absorption part and non absorption part. The auther came to the conclusion that at least there were more than three sorts of cellulase in Trichoderma $(O_2-1)$ cellulase preparation.
The characteristics of crude enzyme produced from Trichoderma viride($O_2-1$) which isolated from half spoiled Locust acacia wood (Robinia Pseudacacia Linne) were examined in this paper. The results obtained were summarized as follows: 1) As a results of enzymatic action on several cellulose substrate it was found that there were some sorts of cellulase in crude enzyme. 2) The activity of C.M.C. ase and ${\beta}-glucosidase$ were decreased in accordance with increasing concentration of substrate, and filter paper saccharifying enzyme relatively increased in accordance with increasing concentration of substrate and enzyme in couse of time. 3) The optimal pH of each enzyme was 5.0 and the range of stability on pH generally from 3 to 6. 4) In disintegrating activity on filter paper, in decomposing activity on C.M.C. and $p-nitrophenyl-{\beta}-D-glucoside$, and in saccharifying activity on filter paper, the optimal temperatures were $50^{\circ}C.,\;60^{\circ}C,\;and\;65^{\circ}C$. 5) The order of stability on temperature was as follow; saccharifying activity on filter paper decomposing activity on C.M.C. disintegrating activity on filter paper>decomposing activity on $p-nitrophenyl-{\beta}-D-glucoside$. 6) The activity of the enzymes was inhibited with mercuric and silver ion, and activated with potassium.
Kwanok, Fujisaka #5, Paldal, and Suwon #82 as japonica type and IR-262 and CP-slo as indica type of rice seeds were selected for this experiment among varieties grown in Korea. Activities of crude enzymes extracted from germinating seeds of these varieties on malathion and p-nitrophenyl acetate as substrates, esterase zymograms with 1-naphthyl acetate as substrate, and some observations are summarized as follows: 1. Activities per unit volume of crude enzyme preparations on malathion were in the order of Kwanok>IR-262>Fujisaka #5>CP-slo>Paldal>Suwon #82. 2. Esterase zymograms on agar-gel electrophoretograms exhibited three to four bands two electrodes with little difference among varieties, nevertheless showing a wide and strongly-colored band toward cathode. Suwon #82 has a somewhat different pattern from others. 3. Enzyme activities per milligram protein with p-nitrophenyl acetate as substrate were in the order of CP-slo>IR-262>Paldal>Kwanok>Suwon #82>Fujisaka #5, indicating that activities of indica type are much stronger than those of japonica type, but not in agreement with results with malathion. 4. Malathion did not much inhibit the esterase activity at the concentration of 0.2PPM on electrophoretograms. 5. It is supposed that there is a complex esterase system hydrolyzing malathion and p-nitrophenyl acetate in germinating rice seeds.
Methods of adding barley malt as source of carbohydrates and enzymes in the production of kanjang in order to improve it's tastes and qualities were investigated. Soybean meju, soybean-malt meju and soybean meju cummalt was mashed with 20% salt brine in the ratio of 1:3 respectively, matured and analyzed the chemical compositions of the soy sauce mash samples for 150 days of maturing. Organoleptic evaluations for the matured soy sauce samples were done. The higher total nitrogen, TCA soluble nitrogen, O.D. at 500 nm, pure extract and lactic acid content could be observed with the soy sauce mash made of soybean-malt meju than those of contrast one from the beginning of the mashing throughout to the whole maturing period of 150 days. The higher the content of malt in the soybean-malt meju, the higher those content in the mash. But the lower content of those compositions in the soy sauce mash made of soybean meju cum malt than those in the contrast was found. The highest scores in all the sensory characteristics including 7.56 points, which were significantly different from that of contrast soy sauce at 5% level, in overall palatability were obtained by the soy sauce made of soybean-malt meju added with 30% malt in the organoleptic evaluations.
The uptake of $Mn^{+2}$, a metal cofactor Mn-SOD, by rice seedings resulted in not only a substantial increase in SOD activity in leaf tissues of the plants, but also a significant enhancement of their cold tolerance : the relative extent of the cold tolerance appeared to accord with relative level of the SOD activity. In contrast, $Fe^{+3},\;Cu^{+2}$ and $Zn^{+2}$, which are the cofactors of Fe-SOD and Cu/Zn-SOD, were found to be ineffective for increasing the SOD activity as well as for improving the chilling-resistant capacity of the plants. The results suggest that Mn-SOD, which is most likely induced by its substrate(superoxide) and activated by the presence of $Mn^{+2}$a at high level, is the enzyme acting as an active component of the defense system against low temperature stress in rice plants. In addition, the application of abscisic acid which has been know to protect to some extent certain plants from chilling injury brought about an increase in SOD activity in rice tissues, providing another affirmative information for the crucial role of SOD under the circumstance of cold stress in plants.
Biochemical consequence of the accumulation in cells of superoxide $(O^{-}_{2})$ which was proposed to be probably a common chemical factor in the secondary process of the mechanism of chilling injury as well as in the visible light photodamage in cells of higher plants, has been investigated in the present work. Especially focused was the destructive effect of $O^{-}_{2}$ on the biochemical activity of mitochondria, as informations which support the suggestion that mitochondrial inner membrane is the major site of $O^{-}_{2}$ production have been collected. Mitochondria and submitochondrial particles (SMP) were prepared from soybean hypocotyls for this case study. When SMP were treated with the electrolytically produced $O^{-}_{2}$ they suffered not only inhibition of the membrane-bound enzymes as demonstrated by cytochrome c oxidase, but also lipid peroxidation of membrane as proved by malondialdehyde production. Malate dehydrogenase present in the protein extract from mitochondrial matrix was also inhibited by the $O^{-}_{2}$ treatment. These results exhibited the chaotic effect of the overproduction and accumulation of $O^{-}_{2}$ in cells under a certain abnormal circumstance such as environmental stress on the physiological function of mitochondrial; disruption of the cellular metabolic pathways and the structural integrity of membrane.
This study was aimed to find out the influence of long-term fertilization for 21 years on soil enzyme activities in the silty clay loam textured normal paddy soil. Total urease activity (TUA) and the microbial urease activity (MUA) were shown to be changed significantly, but the accumulated urease activity (AUA) was similar within trial plots. Especially the MUA of the plots annually applied N.P.K. fertilizers with compost and N.P.K. fertilizers with silicate fertilizer were the highest among plots. The total L-glutaminase activity (TGA) and the accumulated L-glutaminase activity(AGA) were changed significantly among trial plots, but the microbial L-glutaminase activity (MGA) was not. By the simple correlation analysis, it was shown that the TGA and the AGA correlated highly significant to available phosphorus available $SiO_2$ content and pH. Addition of the toluene to the incubation mixture did not markedly affect the activity of phosphatase, but the difference of phosphatase activity among plots was significant. By the simple correlation analysis, it was shown that the phosphatase activity ; correlated highly significant to pH, available $SiO_2$, available phosphorus and exchangeable calcium in soils.
In order to determine the approptiate usage of insecticides to honeybee(Apis mellifera L.), median effective dose to seven insecticides were studied. $LC_(50)$ value of DDT was the highest as being 58 ppm, and that of EPN was the lowest as being 1.61ppm. Various detoxifying enzymes from the midget cf adult worker bee, including microsomal oxidases, glutathione Stransferases, esterases, and DDT-dehydrochlorinase were assayed. Effects of various insecticides on microsomal enzyme activities were as follows: Aldrin epoxidase activity was inhibited by malathione and permethrin treatment. N-demethylase activity was induced by diazinon and EPN treatment and O-demethlase activity was induced by diazinon treatment. Of the glutathione S-transferases, aryltransferase(DCNB conjugation) activity was significantly induced by diazinon, and moderately induced by permethrin. Of the esterases, ${\alpha}-NA$ esterase activity was moderately inhibited by malatjione and permethrin. Acetylcholinesterase activity was not affected by the sublethal exposure of honeybee to the insecticides. Sublethal exposure of honeybee to the insecticides had no effect on DDT-dehydrochlorinase activity, except carbaryl and permethrin were significantly induced.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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