• 제목/요약/키워드: Biodegradation of 4CBA

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4-Chlorobenzoic Acid 분해유전자의 클로닝과 유전학적 특성 (Cloning and Characterization of the Genes Responsible for Degradation of 4-Chlorobenzoic Acid)

  • 이익근;김종우;김치경
    • 미생물학회지
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    • 제28권1호
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    • pp.41-46
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    • 1990
  • 자연환경으로부터 분리한 DJ-12 균주는 4CBA 및 4CB를 비롯하여 그 대사산물인 4OHBA와 PCA를 분해하여 단일 탄소원으로 이용하였다. DJ-12 균주에서 4CBA 및 4CB분해유전자는 약 65kb 크기의 plasmid인 pDJ121에 존재하였으며, 이 pDJ121은 ExoRI, HindIII, SalI 그리고 PslI의 절단부위를 각각 9, 11, 10 그리고 19개씩 가지고 있었다. EcoRI으로 처리한 pDJ121 절편을 pKT230에 ligation 시켜 재조합 vector인 pDK450을 만들었으며, 이를 Pseudomonas putida KT2440에 transformation 시켜 얻은 cloned cell 에서는 4CBA 분해유전자가 잘 발현되었다.

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Toxic Effects of Catechol and 4-Chlorobenzoate Stresses on Bacterial Cells

  • Park, Sang-Ho;Ko, Yeon-Ja;Kim, Chi-Kyung
    • Journal of Microbiology
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    • 제39권3호
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    • pp.206-212
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    • 2001
  • Catechol and 4-chlorobenzoate (4CBA) which are produced from the biodegradation of a variety of aromatic and chloroaromatics have been recognized as toxic to living organisms. In this study, the toxic effects of catechol and 4-chlorobenzoate on gram-positive and -negative bacteria were examined in terms of survival, morphology, change in fatty acids and membrane protein composition. The survival rate of the organisms during treatment for 6 h was decreased, as the concentration of each aromatic was increased. Escherichia coli and Pseudomonas cells treated with catechol and 4CBA at concentrations causing a significant decrease in their viability, showed destructive openings in their cell envelopes. Bacills subtilis treated with the aromatics were reduced in cell size and Staphylococcus aureus cells displayed irregular rod shapes with wrinkled surfaces. The bacterial cells treated with 20 mM catechol showed increases in unsaturated fatty acids, but several saturated fatty acids were decreased. In the E. coli cells treated with 20 mM catechol, inner membrane proteins of 150 kDa and 105 kDa were decreased. But several kinds of the inner and outer membrane proteins were increased. In B. subtilis treated with 20 mM catechol, several kinds of proteins were increased or decreased in membrane proteins.

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4-Chlorobiphenyl 분해 세균에서 cbp 유전자군의 상이성 (Divergence of the cbp Genes in 4-Chlorobiphenyl Catabolizing Bacteria)

  • 윤덕중;한재진;김치경;김영수
    • 미생물학회지
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    • 제30권1호
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    • pp.53-59
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    • 1992
  • 자연계로부터 4-chlorobiphenyl (4CB) 을 분해하는 P08, P20, 027 그리고 P1242 균주를 불리하였다. 이들 분해 균주들의 4CB 분해 과정을 UV-spectrophotometry 방법으로 분석한 결과, 4-CB 로 부터 2-hydroxy-6-oxo-6-(4'-chlorophenyl)hexa-2, 4-dienoic acid 와 4-chlorobenzoate(4CBA) 가 생성되었다. 따라서 분해균주들은 공통적으로 meta-cleavage pathway에 의하여 4CB 를 분해하는 것으로 확인되었다. 그러나 DJ-12, P08 그리고 P27 균주는 4CBA 를 계속 분해하여 4-hydroxybenzoate 를 생성하였으나, P20 과 P1242 균주들은 4CBA 를 더이상 분해하지 못 하였다. 각 분해 균주에서 cbp 유전자군의 상동성을 분석하기 위하여 P. pseudoalcaligenes KF707 의 bphABC 유전자군을 DNA probe 로 이용하여 Southern hybridization 을 실시한 결과, DJ-12, P08 그리고 P27 균주들은 XhoI 에 의한 2.2kb 와 1.8 kb, 그리고 EcoRI 에 의한 11 kb 의 genomic DNA 의 절편에서 hybridization 이 일어났다. 따라서 본 연구에서 분리한 4CB 분해 균주들의 cbp 유전자군은 분해경로 및 bph 유전자군과의 상동성에 의거하여 부 group 으로 구분되었다.

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Pseudomonas sp. DJ-12 pcbAB 유전자의 Escherichia coli에서의 클로닝 및 발현 (Cloning and Expression of pcbAB Genes from Pseudomonas sp. DJ-12 in Escherichia coli)

  • 한재진;성태경;김치경
    • 미생물학회지
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    • 제31권2호
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    • pp.129-134
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    • 1993
  • 4-Chlorobiphenyl(4CB) 과 biphenyl 을 분해하는 Pseudomoas sp. DJ-12 의 pcbAB 는 분해초기 단계에 작용하는 4-chlorobiphenyl dioxygenase 와 dihydrodiol dehydrogenase 효소를 생산하는 유전자들이다. 이 유전자를 E. coli XL1-Blue 에 플로닝하여 CU101 형질전환체를 얻었다. CU101 의 pCU101 재조합 plasmid 에 클로닝된 pcbAB 유전자는 크기가 약 2.2 kb 이고 3 개의 Hind III 제한효소 위치가 있었으며, 독자적인 promoter 를 가지고 있었다. CU101 에 대하여 biphenyl 을 기질로 하여 생성된 대사산물을 resting cell assay 를 한 결과 2, 3-dihydroxybiphenyl 이 검출되어 pcbAB 유전자들이 E. coli 에서 잔 발현된다는 것을 의미하였다. 그러나 dechlorination 작용은 pcbAB 유전자와 관계없이 4AB 의 개환과정 후 생성된 4-chlorobenzoate 에서 일어나는 것으로 해석된다.

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