Although much research has focused on various bioactive substances in starfish, research on microorganisms isolated from starfish is lacking as compared with other natural products. In this study, we investigated bacterial communities in the gut of red starfish (Certonardoa semiregularis) in Jeju Island. In total, 103 bacterial strains were isolated using marine agar and R2A medium. The isolated strains were analyzed and identified using the 16S rRNA gene sequence. Based on an analysis of this gene sequence, the 103 isolated bacteria were classified into four major groups: Proteobacteria (93%: Alpha-proteobacteria, 24.8%; Beta-proteobacteria, 4%; Gammaproteobacteria, 65%) Bacteroidetes (4%), Actinobacteria (2%), and Firmicutes (1%). In addition, the isolates were divided into seven classes (Actinobacteria, Flavobacteria, Bacilli, Sphingobacteria, Alphaproteobacteria, Betaproteobacteria, and Gammaproteobacteria), 15 orders, 19 families, and 24 genera. A phylogenetic analysis revealed two strains, Lysobacter sp. and Pedobacter sp., with similarity of 97.55% and 97.58%, respectively. As the similarity in the 16S rRNA gene sequence was 98% or less compared to previously identified bacteria, the two strains may possibly be classified as a new genus or species. We suggest that additional studies, including biochemical and morphological tests, should be performed to identify the new candidate strains.
Kim, Ji-Hye;Lee, Jong-Hwan;Kim, Young-Ho;Kim, Kwang-Hyeon
Journal of Life Science
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v.19
no.2
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pp.163-168
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2009
To understand cytotoxic activity of Rubia cordifolia L. (Rubiaceae), which has been used as a traditional oriental medicine, the mechanism underlying cytotoxic effect of its extract on human acute Jurkat T cells was investigated. The methanol extract of roots (3 kg) of R. codifolia was evaporated, dissolved in water, and then extracted by dichloromethane. The substances in the chloroform extract showing the most cytotoxic activity were further purified by a series of preparative HPLC. The extracted active substance (65 mg) was designated as CCH1. When Jurkat T cells were treated with CCH1 at concentration ranging from 0.5 to 2.0 ${\mu}g$/ml, apoptotic phenomena of cells companying several subsequent biochemical reactions such as mitochondria cytochrome c release, activation of casapase-8, -9, and caspase- 3, degradation of PARP and DNA fragmentation occurred via mitochondria-dependent pathway. However, abrogation of apoptosis was observed in an ectopic expression of Bcl-xL, which is a suppressor for mitochondrial cytochrome c release. These results demonstrate that the cytotoxicity of CCH1 against Jurkat T cells is attributable to apoptosis mediated by mitochodria-dependent death-signaling regulated by Bcl-xL. In addition, the CCH1 is more potent to leukemia Jurkat T cell than to human peripheral blood monocyte cells (PBMC).
Kim, Hong-Hun;Mok, Ji-Ye;Park, Kwang-Hyun;Jeong, Seung-Il;Hwang, Byung-Soon;Hwang, Sung-Yeoun;Cho, Jung-Keun;Jang, Seon-Il
The Korea Journal of Herbology
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v.25
no.3
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pp.149-157
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2010
Objective:Gagam-Gongjin-dan (GGD) is an oriental medicinal prescription composited with Cervi parvum Cornu, Corni Fructus, Angelica Gigantis Radix, Lycii Fructus, Dioscoreae Rhizoma, Citri Pericarpium, Gastrodiae Rihzoma, Agastachis Herba, Cassiae cortex, Scutellariae Radix and Schisandrae Fructus. The purpose of this study was to investigate the effects of GGD extract against acetaminophen (APAP)-induced liver injury in mice. Methods:GGD extract was prepared by extracting with methanol for 7 days. The extract was freeze-dried following filtration through vacuum distillation system. The first, we investigated the antioxidant effects of GGD extract on electronic donating ability (DPPH), nitrite (NO) scavenging and superoxide dismutase (SOD)-like activity. The next, we investigated the possible hepatoprotective effect of GGD extract administration against acetaminophen-induced liver injury in mice. Mice were orally administrated with or without GGD extract of different doses (25-100 mg/kg/day) one times per day for 6 days. After 3 days, APAP was orally applied with a single dose (400 mg/kg). Results:GGD extract increased DPPH, NO and SOD-like activities in dose dependant. APAP treatment significantly increased aspartate aminotransferase (AST) and alanine aminotransferase (ALT) activities in plasma. Also, APAP treatment significantly evaluated lipid peroxidation product thiobarbituric reacting substances (TBARS) and depleted some antioxidant enzymes (superoxide dismutase, catalase, d-aminolevulinate dehydratase and gluthathione peroxidase activities) in liver homogenates compared to the control group. However, the orally administration of GGD extract was able to counteract these effects. Histological studies provided supportive evidence for biochemical analysis Conclusions:These results suggest that GGD extract has a potential antioxidant and hepatoprotective effect against APAP-induced liver injury, these properties may contribute to liver disease care.
This study was conducted to evaluate the functional characteristics and safety properties of lactic acid bacteria isolated from salt-fermented anchovy, a putative probiotic candidate. The following isolates were identified by biochemical profiles, carbohydrate fermentation patterns, and 16S rRNA sequencing: Enterococcus faecium AJ06, Leuconostoc mesenteroides AJ13, Pediococcus halophilus AJ22, Lactobacillus sakei AJ29, and Pediococcus pentosaceus AJ35. The strains AJ06, AJ22, AJ29 exhibited high tolerance to simulated gastric and intestinal juices and were able to produce bile salt hydrolase on MRS agar plates supplemented with taurocholic acid and/or taurodeoxycholic acid. The strains AJ22 and AJ29, which demonstrated high adherence to Caco-2 cells and resistance to various antibiotics, effectively inhibited the growth of food-borne pathogens by the production of antimicrobial substances. These strains did not show ${\alpha}-$ or ${\beta}$-haemolysis on blood agar. Furthermore, biogenic amines in MRS broth containing the precursor amino acids were not mutagenic in Salmonella Typhimurium TA98 and TA100.
In the present study, lactic acid bacterium that has antibacterial activity against Helicobacter pylori was isolated from feces of newborn baby. The selection was based on the ability to inhibit the growth of H. pylori and to withstand harsh environmental conditions such as acidic pH and high bile concentration. By biochemical test and 16S rDNA sequencing, selected strain was turned out to be an Pediococcus acidilactici, therefore designated to P. acidilactici GMB7330. In order to investigate the inhibitory effects of P. acidilactici GMB7330 on the growth of H. pylori, we have tested in vitro studies such as cell viability and urease test. These results showed that antibacterial activity of P. acidilactici GMB7330 significantly decreased the viable cell count and urease activity of H. pylori. Antibacterial activity of P. acidilactici GMB7330 against H. pylori remained after pH adjustment to neutral, and the concentration of lactate produced from P. acidilactici GMB7330 was not enough to inhibit H. pylori. On the basis of the analysis by transmission electron microscope, it demonstrated that addition of P. acidilactici GMB7330 destroyed the cell structure of H. pylori. These results strongly suggested that P. acidilactici GMB7330 produce antibacterial substances to be able to inhibit the growth of H. pylori other than lactic acid.
To isolate alga-lytic bacteria, a number of samples were collected from Lake of Sukchon and Pal'tang reservoir where cyanobacteria blooming occurred. HY0210-AK1, which exhibited high alga-lytic activity, was isolated using Anabaena cylindrica lawn. The morphological and biochemical characteristics of the isolate HY0210-AK1 were very similar to that of the genus Rhizobium. Taxonomic identification including 16S rDNA base sequencing and phylogenetic analysis indicated that the isolate Hy0210-AK1 had a 99.1% homology in its 16S rDNA babe sequence with Sphingobium herbicidovorans. A. cylindrica NIES-19 was susceptible to the alga-lytic bacterial attack. The growth-inhibiting offset of the bacterium was not different on A. cylindrica NIES-19 when Sphingobium herbicidovorans HY0210-AK1 was in the lag, exponential, and stationary growth phase, although the alga-Iytic effect of S. herbici-dovorans HY0210-AK1 that in stationary growth phase was somewhat pronounced at the first time of inoculation. When S. herbicidovorans HY0210-AK1 was inoculated was inoculated with $1\times 10^{8}$ CFU $ml^{-1}$ together with A cylindrica NIES-19, the bacterium proliferated and caused algal lysis. A. cylindrica NIES-19 died when S. herbicidovorans HY0210 AKl was added to the algal culture but not when duly the filtrates from the bacterial culture was added. This suggests that extracellular substances are not responsible for inhibition of A. cylindrica NIES-19 and that algal Iysis largely attributed to direct interaction between S. herbicidovorans HY0210-AK1 and A. cylindrica NIES-19. The alga-lytic bacterium HY0210-AK1 caused cell lysis and death of three strain of Micro-cystis aeruginosa, but revealed no alga-Iytic effects on the Stephanodiscus hantzschii.
The present study was undertaken to investigate the nutritive value of various defatted oil-seed flours in the diet by studying the effect of alternative diets on growing rats, to attention growth, food intake, weight of organs and the levels of total cholesterol, phospholipid and triglyceride in serum and liver tissue. Sixty male Albino rats (Splague Dowley) weighing 47-55 g were divided into five experimental groups and one control group of ten each, and were fed for 24 weeks with the respective diets. Each of five different diets was supplemented with defatted flours as dietary protein sources. Four of other diets were composed of 7.5 sesame seed, rapeseed, sunflower seed and cottonseed flour respectively, with the same amount of defatted soybean flour, while the fifth diet tested was prepared with 15% soybean flour. The results of this study were as follows. 1) It was noteworthy that the five defatted oilseed flour diets demonstrated much improvement of nutritive value. Sesame seed flour and sunflower seed flour, especially appeared to be worthwhile as human foods. 2) From the results of biochemical tests of the serum and liver lipid content of Albino rats, after feeding with the respective diets, it can be concluded that, from a nutritional point of view, the toxic effects of oilseed flours like rapeseed and cottonseed flour, which contain toxic substances, are reduced when they are mixed with soybean flour.
The antioxidative activity of antioxidative substances produced from several bacterial strains isolated from fermented foods were tested by $DPPH\;({\alpha},{\alpha}'-diphenyl-{\beta}-picrylhydrazyl)$ free radical scavenging activity. One of the strains showing the highest antioxidative activity was identified as Bacillus sp. based on the morphological, biochemical, physiological characteristics, and 16S rRNA sequence, and named FF-7. The most optimal medium condition for the production of antioxidative substance from Bacillus sp. FF-7 was 2% galactose as carbon source and l% tryptone as nitrogen source. The antioxidative substance produced from FF-7 in these cultural medium was also tested by in vitro experimental models, the peruxidation of linoleic acid and the peroxidation of rat tissues microsomes by using thiobarbituric acid (TBA) for assay of free malondialdehyde production. The antioxidative activity against lipid peroxidation of rat tissues microsomes was shown in the following order; brain 97.50% > heart 79.95% > kidney 77.84% > spleen 77.47% > testis 69.96% > liver 62.45%. The antioxidative substance produced from FF-7 on linoleic acid peroxidation by IBA method was effectively inhibited during four days, and 0.05% BHT (butylated hydroxytoluene) used comparative control was also effectively inhibited. Results showed that the highest antioxidative activity by DPPH method of antioxidative substance produced from Bacillus sp. FF-7 was obtained by supplementing 2% galactose as carton source and l% tryptone as nitrogen source in cultured medium, this substance effectively inhibited the formation of TBARS in brain microsome in vit개 system and in linoleic acid peroxidation.
To know the effect of presowing seed soaking with some growth substances (kinetin, IAA, ethrel and salicylic acid) on vegetative growth and yield contributing parameters in soybean [Glycine max (L.) Merrill] the investigation was undertaken. The salient features from the study are;-All the treatments showed the enhancement effect on vegetative growth, viz. seediling emergence, germination percentage, plant height, number of leaves and branches per plant as compared with control, whereas salicylic acid delayed the seedling emergence process and lowered the germination percentage.-Nodule initiation, number of nodules and nodule weight were hastened and increased respectively under all the treatments whereas IAA showed an opposite effect on all the parameters at the early stages of nodule development.-Kinetin, IAA and ethrel showed the significant enhancement effect on the levels of biochemical parameters throughout the time of seed development whereas salicylic acid and water showed the tendency similar to that of control.-Yield and its components, viz. number of flowers, pods and seeds per plant were significant increased under all the treatments but they didn't show any significant enhancement effect on number of seeds per pod and pod setting rate. One hundred seed weight was lower under all the treatments, indicating the dilution effect resulting from incapability of increased number and size of source to provide the increased size of sink with assimilates.
Protaetia brevitarsis has been utilized as an ingredient of the description for the treatment of patients with chronic hepatic diseases in oriental medicine. This study was attempted to investigate whether Protaetia brevitarsis extract(PBE) protects or modulates the liver injuries induced by carbon tetrachloride or ethanol in Sprageue-Dawley rate. The liver injuries of rats induced by the treatment of carbon tetrachloride or ethanol were manifested by the observation of the significant changes in liver weight, serum aspartate aminotransferase (AST) and alanine aminotransferase (ALT) activities, serum thiobarbituric acid reactive substances (TBARS), and microsomal detocification enzymes(cytochrome P_450), cytochrome b$_{5}$, and cytochrome b$_{5}$ reductase).The effect of PBF on the liver damage induced by the chemicals was evaluated with the extent modulated in change of biochemical parameters above. Exposure to ethanol alone resulted a significant change in the ration of liver per body weight, ALT activity, and microsomal detoxification enzymes (cytochrome P_450, cytochrome b$_{5}$, and cytochrome b$_{5}$ reductase), but did not significantly changes in the levels of serum AST activity and TBARS. Pretreatment coith PBE did not modulate the alteration of the ratio of liver to body weigth, and the activities of serum aminotransferascs (AST. ALT), TBARS, and micro somal detoxification enzyme (cytochrome p_450, cytochrome b$_{5}$,and cytochrome b$_{5}$ reductase. These result suggested that PBE has not appreciable therapeutic effect on carbon tetrachloride or ethanol induced hepatotoxicity.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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