A gene encoding a putative alanine racemase in Xanthomonas. oryzae pv. oryzae was cloned, expressed and characterized. Expression of the cloned gene was performed in Escherichia coli BL21(DE3)pLys using a pET-21(a) vector harbouring $6{\times}histidine$ tag. Purification of the recombinant alanine racemase by affinity chromatography resulted in major one band by sodium dodecyl sulfate polyacryl amide gel electrophoresis analysis, showing about 45 kDa of molecular weight. The alanine racemase gene, cloned in this experiment, appears to be constitutively expressed in X. oryzae, as analyzed by reverse transcriptase polymerase chain reaction. The enzyme was the most active toward L-alanine and secondly D-alanine, showing a racemic reaction, thus the enzyme is considered as an alanine racemase. The enzyme was considerably activated by addition of pyridoxal-5-phosphate (PLP), showing that 75% increase in activity was observed at 0.3 mM, compared with control. D-Cysteine as well as L-cysteine significantly inhibited the enzyme activity. The inhibitions by cysteines were more prominent in the absence of PLP, showing 9 and 5% of control activity at 2 mM of addition, respectively. The enzyme was the most active at pH 8.0 and more stable at alkaline pHs than acidic pH condition.
Kang, Ki-Rim;Hwang, Sang-Moon;Park, So-Jung;Chae, Han
Korean Journal of Oriental Medicine
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v.15
no.3
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pp.35-43
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2009
Introduction : Interests in personalized medicine or tailored medicine is growing in recent years, but traditional medicine with properties of tailored medicine have already been developing from many parts of the world. In this review paper, we tried to investigate the current research status and characteristics of traditional constitutional medicine by a comparative study. Methods and Material : We compared Sasang medicine from Korea, Ikkando medicine from Japan, Chinese constitutional medicine, Ayurveda from India. We investigated the current research status by searching academic DBs such as Medline, Riss4u, Kiss, CNKI, CINII. Then we examined characteristics of each medicine from various aspects of physiology-pathology-diagnosis-treatment-prevention. Results : We found out that each constitutional medicine is being studied the most in their native land. In addition, after analysing characteristics of these constitutional medicine, we learned that Sasang medicine and Ayurveda were putting emphasis on psychological factors in physiology-pathology-diagnosis-treatment-prevention, while Chinese constitutional medicine and Ikkando medicine were focusing on pathological factors. Discussion : We studied theories of constitutional medicine in various traditional medicine, and verified that Sasang medicine shares similarities and differences with these medicine. We suggest that deeper understandings of other constitutional medicine and attempts at clinical application can lead to advance of Sasang medicine.
Lateral facial cleft is a rare congenital craniofacial anomaly. Their incidence is about 1 in 60,000 births and early treatment with closure in layers is important. Surgical treatment must reconstruct an anatomic and functional situation which give a good esthetic result. This study reports two cases of male at 31 months and 9 months suffered from esthetic problems due to lateral displacement of the oral commisure on the right side. Surgical treatment; the mucosa is closed in with a Z-plasty to avoid intraoral band contracture, the orbicularis oris muscle is closed after interfiber reorientation, and the skin is closed with multiple Z-plasty. So we report two cases of unilateral lateral facial cleft and review of etiopathogenesis in children with lateral facial cleft.
Commercial Bio- Green(B.G.) functional water was manufactured through a series of processes : water - ultra-purification - adding catalysts - energy imprinting fermenting with energized water + zeolite and others + photosynthetic bacteria in fermenter longrightarrow filtering. Control(0), 5 or 10 liters per plant of B.G. functional water were supplied to the orchard soil under canopy of 10 year- old ‘Tsugaru’/M26 apple trees on March 20, May 20 and June 20, 1995, respectively. pH and content of Ca and Mg of orchard soil were increased by supply with B.G. functional water. However, P$_2$$O_{5}$, K, and B contents were not influenced by the treatment. At harvest time soluble solid content of flesh tissue and anthocyanin of fruit skin were increased by the treatment. B.G functional water treatment showed higher root activities, and photosynthesis of leaves than that of control. Also B.G. functional water treatment enhanced Ca content in fruit skin and flesh tissues, whereas not affected N, K, and Mg contents. During storage at 4$^{\circ}C$ cold room, the more volume of B.G. functional water supply showed lower bitter pit symptom. Respiration and ethylene evolution in fruit decreased, while fruit firmness increased by the treatment during storage.
Objectives : This study was to investigate the visual bio-feedback training for 5 weeks on balance and postural control for patients with stroke. Methods : The 26 subjects were randomly selected from the patients of the E hospital in the S city who met the study conditions. They were divided into a visual bio-feedback training group of 13 patients and a self-resistance exercise group of 13 patients. The visual bio-feedback training group received visual bio-feedback and general physiotherapy for five weeks and the self-resistance exercise group received cycling and general physiotherapy for the same period. The subjects were measured and compared for stability index, weight distribution index, fall down index, functional reach test and timed up and go test before and after the program. Results : The visual bio-feedback training group showed significant changes after the experiment in stability index, weight distribution index, functional reach test and timed up and go test(p<0.05), and the self-resistance exercise group also showed significant differences(p<0.05). The changes between prior to and after the experiment show that the visual bio-feedback training group had more significant effects than the self-resistance exercise group(p<0.05). Conclusions : The visual bio-feedback training for five weeks had effects in the improvement of the balance and posture control of stroke patients. Based on these results, more effective training programs should be developed and propagated.
Metabolic syndrome (METS) is a disorder of energy utilization and storage and increases the risk of developing cardiovascular disease and diabetes. To identify the genetic risk factors of METS, we carried out a genome-wide association study (GWAS) for 2,657 cases and 5,917 controls in Korean populations. As a result, we could identify 2 single nucleotide polymorphisms (SNPs) with genome-wide significance level p-values (< $5{\times}10^{-8}$), 8 SNPs with genome-wide suggestive p-values ($5{\times}10^{-8}{\leq}$ p < $1{\times}10^{-5}$), and 2 SNPs of more functional variants with borderline p-values ($5{\times}10^{-5}{\leq}$ p < $1{\times}10^{-4}$). On the other hand, the multiple correction criteria of conventional GWASs exclude false-positive loci, but simultaneously, they discard many true-positive loci. To reconsider the discarded true-positive loci, we attempted to include the functional variants (nonsynonymous SNPs [nsSNPs] and expression quantitative trait loci [eQTL]) among the top 5,000 SNPs based on the proportion of phenotypic variance explained by genotypic variance. In total, 159 eQTLs and 18 nsSNPs were presented in the top 5,000 SNPs. Although they should be replicated in other independent populations, 6 eQTLs and 2 nsSNP loci were located in the molecular pathways of LPL, APOA5, and CHRM2, which were the significant or suggestive loci in the METS GWAS. Conclusively, our approach using the conventional GWAS, reconsidering functional variants and pathway-based interpretation, suggests a useful method to understand the GWAS results of complex traits and can be expanded in other genomewide association studies.
Kim, Hyun-Kyoung;Choi, Kang-Ju;Ahn, Jong-Ho;Jo, Han-Hyung;Lee, Chang-Soon;Noh, Ji-Ae
International journal of advanced smart convergence
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v.10
no.1
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pp.197-208
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2021
The deer antler has been used as a major drug in oriental medicine for a long time. Recently, the demand for easy-to-take health functional foods is increasing due to economic development and changes in diet. As part of research on the development of functional materials for antlers, lactic acid fermentation of antler extract was performed. It was intended to develop a functional material with enhanced total polyphenol and flavonoid content and enhanced antioxidant activity. Lactic acid bacteria fermentation was performed by adding 4 types of lactic acid bacteria starter products, B. longum, Lb. Plantarum, Lb. acidophilus and mixture of 8 types of lactic acid bacteria to the antler water extract substrate, respectively. During the fermentation of lactic acid bacteria, the number of proliferation, total polyphenol and total flavonoid content, DPPH radical scavenging and antioxidant activity were quantified and evaluated. As a result of adding these four types of lactic acid bacteria to the antler water extract substrate, the number of lactic acid bacteria measured was 2.04~5.00×107. Meanwhile, a protease (Baciullus amyloliquefaciens culture: Maxazyme NNP DS) was added to the antler extract to decompose the peptide bonds of the contained proteins. Then, these four types of lactic acid bacteria were added and the number of lactic acid bacteria increased to 2.84×107 ~ 2.21×108 as the result of culture. The total polyphenol contents were 4.82~6.26 ㎍/mL in the lactic acid bacteria fermentation extracts, and after the reaction of protease enzyme and lactic fermentation, increased to 14.27~20.58 ㎍/mL. The total flavonoid contents were 1.52~2.21 ㎍/ml in the lactic acid bacteria fermentation extracts, and after the protease reaction and fermentation, increased to 5.59 ~ 8.11 mg/mL. DPPH radical scavenging activities of lactic acid bacteria fermentation extracts was 17.03~22.75%, but after the protease reaction and fermentation, remarkably increased to 32.82~42.90%.
A trap identification system for isolating functional sequences to allow the constitutive expression of foreign protein from Edwardsiella tarda was developed. Using the green fluorescent protein (GFP) reporter-based trap system, various functional sequences to drive heterologous expression of the GFP were selectable in Escherichia coli host. However from the bioinformatic sequence analysis, all the segments predicted as regulatory regions were not native promoters actually existing upstream of endogenous E. tarda genes. Instead, a number of non-authentic sequences, possibly resulted from the random shuffling and/or intermolecular ligation were also proven to be able to display a potent GFP expression in the recombinant E. coli. Further analysis with selected clones showed that both authentic and non-authentic sequences could function in as a constitutive promoter, leading quite a consistent and stable GFP expression after repetitive subcultures. Microscopic examination also confirmed the uniform pattern of GFP expression in every host bacterium. Semi-quantitative assay of GFP showed that there was no clear relationship between expression levels and organizational features of the promoters trapped. Functional promoter-like elements achieved in the present study could be a good starting material for multivalent genetic engineering of E. tarda in order to produce recombinant vaccines in a cost-effective fashion.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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