Bifidobacteria are a prototype probiotic, which normally inhabit the intestinal tract of humans. In the present study, four species of Bifidobacterium isolated from the feces of infants were characterized. The tolerance for acid or bile salt, autoaggregation, and antibiotic resistance of the bacteria were examined. The four species were resistant to low pH, bile salts, and up to 3% bile acid. Autoaggregation rates were as high as 90%. The bacteria were consistently resistant to gentamicin, kanamycin, streptomycin, ciprofloxacin, and nalidixic acid. Due to their tolerance to environmental factors like acid and bile salts, B. longum MG723, B. breve MG729, B. bifidum MG731, and B. animalis subsp. lactis MG741 are potentially valuable as probiotics and may be useful for industrial application.
다시마 fucoidan의 식이섬유로서의 생리기능성 탐색연구의 일환으로, 다시마의 건조 분말로부터 fucoidan을 열수 추출하여 분리하고 부분정제하였으며, 이의 in-vitro 포도당 및 담즙산 흡수 지연 효과를 조사하였다. 다시마 fucoidan은 투석막을 이용한 2시간 동안의 in-vitro glucose 및 bile acid 흡수 지연 실험에서 각각 25.36$\sim$22.68% 및 27.03$\sim$33.50%의 흡수지연효과를 나타내었다. 이들 효과는 타 식이섬유와 비교하여 비교적 우수하거나 매우 우수한 효과로, 어느 정도 당뇨 및 동맥경화 억제에의 효과를 나타낼 것이 기대되어 추가 검토의 필요성이 높았다.
Chitosan has been known to have hypocholesterolemic and hypolipidemic effects in animal studies. Chitosan also absorbs bile acids in vitro and in vivo, which might result in the hypocholesterolemic action. Trialkyl chitosan derivatives were prepared and tested for bile acid absorption activity in vitro. The derivatives showed enhanced absorption capacities which were comparable to cholestyramine.
The acid and bile tolerance changes of 5 different lactic acid bacteria (LAB; Lactobacillus paracasei, Lactobacillus casei, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus plantarum, and Lactobacillus debruekii) with gamma irradiation were evaluated. The abilities of LAB to survive in the acidic conditions at the stomach and the bile acidic conditions at the beginning of the small intestine are the key functions for applying LAB to probiotics. In the results, all of LAB survived more than 50% after incubation in PBS (pH 2.5) for 2 hr, which indicated more than half of LAB are possible to pass through the stomach. However, gamma irradiation decreased the acid tolerances of LAB. The bile tolerances of all bacteria except Lactobacillus acidophilus were observed to survive at a 3% oxgall concentration in MRS, and 1 kGy of gamma irradiation to LAB did not affect any bile tolerances changes. But gamma irradiated Lactobacillus casei and Lactobacillus casei (3 kGy) showed decreasing survival rate with oxgall added MAS agar. In conclusion, gamma irradiation should be applied to yogurt or fermented foods with care because LAB could be changes their properties on acid and bile tolerances.
In order to anticipate the physiological function of dietary fibers, glucose and bile acid retarding effects were experimented by using in vitro methods based on dialysis for commercial fibers and dietary fiber residue of food samples. The glucose retarding effect in commercial fibers increased in the order of alginic acid, guar gum, CM-cellulose, citrus pectin > apple pectin > $\alpha$-cellulose and the effect in food fiber residues increased in the order of sea mustard > Korean cabbage, apple > rice bran, barley, soybean, and tangerine. The bile acid retarding effect in commercial fibers increased in the order of citrus pectin, guar gum > CM-cellulose, alginic acid > apple pectin > $\alpha$-cellulose and the effect in food fiber residues increased in the order of barley, rice bran > sea mustard > tangerine > Korean cabbage, soybean > apple. The higher the retarding effect of glucose movement through the dialysis membrane, the more effective the control of the human blood glucose level. As the retarding effect of bile acid movement across the dialysis membrane increased, the human serum cholesterol level correspondingly reduced. Consequently these in vitro methods can be used as a preceding test before undertaking animal and human experiments to predict the physioloical effects of fiber residues from diverse food samples as well as commercially refined fibers.
본 연구에서는 박절편과 동결할단복제법을 이용하여 흰쥐 간세포에서 dehydrocholic acid가 수송되는 경로를 전자현미경적으로 조사하고자 하였다. 정상군이나 dehydrocholic acid 투여군에서 대부분의 Golgi 장치는 형성면을 담세관으로 향하고 있었다. Dehydrocholic acid 투여 20분 후에 세포질내세망과 Golgi 장치 및 소포 등이 담세관 주위에 증가되어 있었는데 특히 Golgi 장치 형성면에서는 소포가 될 것으로 추정되는 싹이 돌출되어 있었으며 소포들은 담세관에 융합된 것들도 관찰되었다. 이러한 소견으로 미루어 담즙산의 분비는 Golgi 장치 형성면의 쌀이 유리되어 형성된 소포가 담세관막에 융합되므로서 이루어질 것으로 추정된다.
간세포내 두가지 microsome효소인 HMG-CoA reductase와 cholesterol-$7{\alpha}$-hydroxylase는 콜레스테롤 합성과 담즙산으로의 분해의 조절효소임은 이미 알려진 사실이다. 본 실험에서는 콜레스테롤의 대사산물인 4종류 담즙산들이 간세포내의 콜레스테롤 합성 및 HMG-CoA reductase활성에 미치는 효과를 조사하였다. 간세포의 배양에서 간세포로의 담즙산 흡수는 배지내 농도(1mM~10mM)와 배양시간(1/2~3hr)의 차이에 따라 비례적으로 증가하였다. 콜레스테롤 합성저해에 대한 담즙산의 효과는 배지내 담즙산의 농도 및 배양시간에 따라 크게 감소하였다. 분리시킨 microsome내 HMG-CoA reductase의 활성에 대한 담즙산의 저해효과는 insulin 투여에 의하여 효소활성을 촉진시킨 경우에서도 뚜렷하였으며 콜레스테롤 합성 역시 저하되었다. 분리시킨 간세포막 내 $Na^+$,$K^+$-ATPase의 활성은 1.8~2.5mM정도의 배지내 담즙산 농도까지 증가함을 보였으나 cholic acid 흡수는 상기 효소의 활성에 거의 영향을 주지 않는 것으로 나타났다. 이러한 이유는 아직 불분명하나 1차 대사산물인 cholic acid의 흡수는 단순확산에 의한 것으로 사료되며 이에 대한 더 많은 연구가 요구된다.
Preset study was carried out to evaluate characteristics of lactic acid producing bacteria(LAB) in hen's cecum as probiotics value. Distribution of LAB in intestinal tracts was investigated using 5∼25 weeks - old hens. So, 12 strains to LAB with different morphology were isolated purely. Acid tolerance of LAB tested at pH 1, 2, 3, and 4, and bile resistant also tested at 0, 0.3% and 0.5% bile salt concentration. Growth pattern of LAB observed to 60h. All strains of cecal LAB couldn't survive at pH 1, and decreased linearly survival colony after incubation at pH 2 although some strains could survive for 2h. Most of LAB maintained constant number at pH 3 and 4. The bacterial action could increase linearly at 0% bile salt concentration in all of tested strains. However, only one strain could multiply at 0.3% bile salt, others were influenced by bile salt. That tendency was similar at 0.5% bile salt. Growth was peaked at 12 to 18 h after innoculation. After peak, the decreasing pattern of colony was different to strains which some strains decreased rapidly or maintained for long time. The LAB of hen's cecum was similar to intolerance acidity, but different to resistant to bile salt and growth pattern by strain. So, we choose three strains which have probiocs value, and identified as Lactobacillus amylovorus LLA7, Lactobacillus crispatus LLA9 and Lactobacillus vaginalis LLA11.
Pato, Usman;Surono, Ingrid S.;Koesnandar, Koesnandar;Hosono, Akiyoshi
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제17권12호
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pp.1741-1745
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2004
Administration of milk and fermented milks produced from indigenous dadih lactic acid bacteria on serum lipids and bile acids, fecal bile acids and microflora was estimated in hypercholesterolemic rats. Anaerobic lactic acid bacteria decreased and coliforms increased in the feces of the control group; however, the number of fecal lactic acid bacteria remained unchanged when rats were administered milk and fermented milks. Only fermented milk made from Lc. lactis subsp. lactis IS-10285 significantly reduced serum total cholesterol, LDL cholesterol and total bile acids. Milk and fermented milks did not influence the HDL cholesterol. Triglyceride and phospholipid levels were significantly lower in the rats fed fermented milk of Lc. lactis subsp. lactis IS-10285 than rats fed milk and fermented milk of Lc. lactis subsp. lactis IS-29862, but not significantly different from the control group. Hypocholesterolemic effect of Lc. lactis subsp. lactis IS-10285 was attributed to its ability to suppress the reabsorption of bile acids into the enterohepatic circulation and to enhance the excretion of bile acids in feces of hypercholesterolemic rats.
Under some pathological conditions as bile flow obstruction or liver diseases with the enterohepatic circulation being disrupted, regurgitation of bile acids into the systemic circulation occurs and the plasma level of bile acids increases. Bile acids in circulation may affect the nervous system. We examined this possibility by studying the effects of bile acids on gating of neuronal (N)-type $Ca^{2+}$ channel that is essential for neurotransmitter release at synapses of the peripheral and central nervous system. N-type $Ca^{2+}$ channel currents were recorded from bullfrog sympathetic neuron under a cell-attached mode using 100 mM $Ba^{2+}$ as a charge carrier. Cholic acid (CA, $10^{-6}M$) that is relatively hydrophilic thus less cytotoxic was included in the pipette solution. CA suppressed the open probability of N-type $Ca^{2+}$ channel, which appeared to be due to an increase in (no activity) sweeps. For example, the proportion of sweep in the presence of CA was ~40% at +40 mV as compared with ~8% in the control recorded without CA. Other single channel properties including slope conductance, single channel current amplitude, open and shut times were not significantly affected by CA being present. The results suggest that CA could modulate N-type $Ca^{2+}$ channel gating at a concentration as low as $10^{-6}M$. Bile acids have been shown to activate nonselective cation conductance and depolarize the cell membrane. Under pathological conditions with increased circulating bile acids, CA suppression of N-type $Ca^{2+}$ channel function may be beneficial against overexcitation of the synapses.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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