A real time optimization algorithm for fed-batch cultures of recombinant yeast to determine the optimal substrate feed rate profile has been developed. Its development involved four key steps: (1) development of reliable adaptive model. (2) development of optimization algorithm. (3) design of on-line model update algorithm to be incorporated into the optimization algorithm and (4) experimental validation. A recombinant Saccharomyces cerevisiae producing human parathyroid hormone (hPTH) was chosen as the model strain. It was found to be very successful in maintaining cell growth and galactose consumption at leigh levels, thus resulting in significant improvements in the productivity (up to 2.1 times) and intact hPTH concentration (up to 1.5 times) compared with the case of an intermittent glucose and galactose, or galactose feeding.
This studies were carried out to investigate optimal conditions for Lactic acid bacteria growth, which was grown in a batch fermenter. The optimal temperature was $30^{\circ}C$, optimal pH was 6.5 and agitation speed was 100rpm and didn't supply the air. Used media compositions were yeast extract 5g/L, peptone 10g/L, sugar 20g/L, beef extract 10g/L, tween 80 1ml/L, ammonium citrate 2g/L, sodium acetate 5g/L, magnesium sulfate 0.1g/L, manganese sulfate 0.05g/L, dipotassium phosphate 2g/L. These results would be useful for enhancing lactic acid bacteria concentration.
Carbon sources and nitrogen sources are known to be very important in protease production by microorganisms. The effects of carbon source and nitrogen source on protease biosynthesis by Bacillus licheniformis were investigated using batch cultures. As initial carbon and nitrogen concentrations of culture medium increased, the specific growth rate of Bacillus licheniformis was increased, while the specific protease production rate was decreased. From the results of batch cultures, a mathematical model which considers the effects of carbon source and cnitrogen source was proposed and the methods to increase the productivity of protease were discussed.
The decomposition of hydrogen peroxide was used for supplementing the oxygen during batch xanthan fermentations in a bubble column bioreactor in order to escape the oxygen transfer limitation that occurred at the high viscosity of culture broths. The xanthan production, however, was inhibited reversibly by dosing hydrogen peroxide. On the other hand, fluidized particles of glass beads with 8 mm diameter led to high gas-liquid oxygen transfer rates in three-phase fluidized beds, which resulted in higher space-time yields of the xanthan production compared to in the bubble column bioreactors.
Ferritin is an iron storage protein found in most living organisms. For expression and industrial use, human light chain ferritin (L-ferritin) was cloned from human liver cDNA library and expressed in Pichia pastoris strain GS115. The recombinant L-ferritin in Pichia pastoris was glycosylated. In a fed-batch culture, the cell mass reached about 57 g/l of dry cell weight, and the L-ferritin in the cell was increased to about 95 mg/l after 150 h. In an atomic absorption spectrometry analysis, the intracellular content of iron in the L-ferritin transformant was measured as $1,694{\pm}85\;\mu\textrm{g}g/g$, which is 5.4-fold more than that of the control strain. This L-ferritin transformant could serve as iron-fortified nutrients in animal feed stock.
The pullulan production and morphological change of Aureobasidium pullulans ATCC 9348 were investigated both in batch fermentation and in continuous fermentation. The best carbon source for pullulan production was sucrose among seven different carbon sources. The pullulan production of A. pullulans was increased with increasing the carbon to nitrogen ratio of the medium using sucrose as a carbon source. In batch fermentation, production of pullullan occurred following exhaustion of the nitrogen source from the medium. The continuous fermentation showed that the pullulan production was closely parallelled with cell growth and was most effective at a dilution rate of 0.06~0.07 hr$^{-1}$-. The ratio of yeast-like cells(blastospores) of A. pullulans increased with the increase of growth rate, and reached 100% over the growth rate of 0.07 hr$^{-1}$. The growth rate, within a certain range, affected not only on the cell morphology, but on the specific pullulan productivity of A. pullulans.
In a simulated seawater aquaculture system, effects of different operating factors like the superficial air velocity (SAY), hydraulic residence time (HRT), protein concentration and foam overflow height on the removal of total suspended solids (TSS) by a foam fractionator, with 20 cm diameter and 120 cm height, were investigated. This experiment was performed on batch and consecutive modes for different combinations of the tested factors, using synthetic wastewater. In 5 consecutive trials, TSS concentration in culture tank water decreased faster, when the foam fractionator was operated at higher SAV and lower HRT. In batch trials, with increasing SAV, TSS removal rate increased, but decreased with increasing HRT. Higher protein concentration in the bulk solution resulted in higher TSS removal rate. TSS concentration in the collected foam condensates increased but the foam overflow rate decreased with increasing foam overflow height. Foam fractionation was effective for removing TSS in seawater aquaculture systems and its performance largely depended on the operating parameters, especially superficial air velocity.
This study was carried out to develope an alcoholic drink by fermentation of onion extract using Saccharomyces cerevisiae. The optimal conditions for ethanol production were obtained by standing culture at $25^{\circ}C$ for 5 days with 5% inoculum volume. At the results by flask culture, the growth curve of used S. cerevisiae reached to the stantionary phase at 48 hr and the death phase at 90 hr, whereas ethanol production reached maximum at 114 hr. Under the above conditions, a large scale production was carried out. A standing culture in 5 l fermenter showed the similar results to its flask culture, but progressed 24 hr rapidly more than that of the flask culture. A fed-batch culture was performed by addition of the onionic medium supplemented with 10% (v/v) sucrose after 72 hr from the fermenting start. The fed-batch culture could prevent S. cerevisiae from entering into the death phase and maintain constant level of alcohol production. A continuous culture was able to carry out by adding per every 24 hr the onionic medium supplemented with 10% (v/v) sucrose after 72 hr from the fermenting start. Although S. cerevisiae used showed a little decreased growth, alcohol production maintained roughly the constant level at the maximum yield. To enhance the quality of this alcoholic drink, $2-O-{\alpha}-D-glucopyranosyl$ L-ascorbic acid (AA-2G) was supplemented into the onion extract of the substrate for fermentation. As resulted at this study, this alcoholic drink containing AA-2G should be used as a functional fermented alcohol drink strengthened with vitamin C.
In order to establish the biological treatment system which can be used for treatment of waste aster from acetaldehyde plant, it was investigated optimum nutrient requirements and growth conditions by mixed culture of Micrococcus roseus AW-6, Micrococcus luteus AW-22, Microbacterium lacticum AW-38 and Microbacterium laevaniformans AW-41 as well as the effect of coagulants and neutralization reagents. Also, it was carried out the continuous culture as well as batch culture to treat the waste water by mixed culture of these strains. The COD removal rate was reached to maximum state for 96hrs culture at pH7.0 and $30^{\circ}C$ NaOH as the neutralization reagents was the most effective, but the coagulants had no effect on the COD remonal rate and the optimum dilution times for treatment were 10 fold. The COD removal rate was also increased by supplimenting 200 ppm $NH_{2}NO_{3}$, 50 ppm $KH_{2}PO_{4}$, 15 ppm $CaCl_{2}$ and 1 ppm $MgSO_{4} \cdot 7H_{2}O $ as additional nutrients. The removal rate coefficient $K_{1}$ on the batch culture was $4.5\times 10^{-6}$, and the detention time for BOD removal rate of 85% was approximately 45hrs. The COD of waste water was reduced to 15% of its initial value by the continuous culture. The COD and BOD of the effluents were to be about 60 ppm and 40 ppm, respectively, and final pH was 7.0.
As a result of broth substitutions when each culture-mediums were difference, whole culture-medium was found to be best feeding solution for production of PS-7 by B. indica. Maximal production of PS-7 was 1$10.0\;g/{\ell}$ and its conversion rate from 2% (w/v) glucose to PS-7 was 50%. After 48 hr, 50%(v/v) medium of working volume began to substitute in 7L jar fermenter. Production of PS-7 increased after 48hr, recovered productivity of PS-7. Following this preliminary culture, the resultant culture was subjected to continuous flow conditions controlled that the dilution rate were $0.01\;{\sim}\;0.04\;h^{-1}$. Production of PS-7 increased at dilution rate $0.0100\;h^{-1}$ whereas productivity of PS-7 decreased gradually in dilution rate $0.0200\;{\sim}\;0.0400\;h^{-1}$. Maximal production of PS-7 was $10.0\;g/{\ell}$ in continuous culture.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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