The large-scale production of antibiotics by filamentous mycelial organism requires and adequate supply of dissolved oxygen. In terms of productivity, it means that oxygen transfer is the rate-limiting step. Therefore, the oxygen transfer coefficients(K$\_$L/A) were determined in a broth involving a filamentous mycelial organism such as Streptomyces avermitilis for use in fermentations. To determine (K$\_$L/A) inn a stirred vessel, a great deal of effort is required to provide all the cells with a sufficient oxygen supply. To overcome the oxygen limitation in a batch culture, a fed-batch culture was applied to control the growth rate by an intermittent supply of nutrients. Thus, it was possible to maintain a suitable dissolved oxygen concentration at a low agitation rate. The optimal agitation speed was 350 rpm at low cell concentrations (below 7 g/L) by considering the efficiency of agitation and shear stress. The (K$\_$L/A) was found to decrease from 64.26 to 29.21h.$\^$-1/ when the biomass concentration was increased from 9.82 to 12.06 g/L. In addition, and increase in viscosity was also observed during the growth phase. By comparing the (K$\_$L/A) values for the various agitation and aeration rates, it was found that the effect of an increase in (K$\_$L/A) by aeration was reduced dramatically at high biomass concentrations. However, this effect was not observed when altering the agitation rate. This suggests that controlling the dissolved oxygen concentration by altering the agitation rate was more efficient than increase the aeration rate.
Batch kinetics during the exo-polysaccharide (EPS) fermentation of Ganoderma lucidum was investigated as a function of different substrates (glucose and starch), substrate concentration $(1{\sim}7%,\;w/v)$ and subculture (3 times). Logistic model for mycelial growth fitted the experimental data better than Monod and two thirds power model. The Luedeking-Pirt equation was adequate to fit the kinetic data of product formation and substrate consumption. The EPS production was strongly non-growth associated, although it was mixed type. The product formation and sustrate consumption by growth associated mechanism decreased as the concentration of glucose increased, while those of the non-growth associated mechanism increased. However, starch medium increased the growth associated and non-growth associated substrate consumption indicating higher availability of substrate. Also, batch culture in starch medium showed the higher specific growth rate and stability during subculture than those in glucose medium. In conclusion, the enhanced EPS production and stability in the subculture was found to be remarkably improved by use of starch as sole carbon source in medium. The maximum mycelium dry weight and EPS production of 9.463 and 10.410 g/l, respectively, were obtained after shake culture of 7 days at $30^{\circ}C$ from the media containing 7% starch.
Kim Hyun Han;Na Jeong-Geol;Chang Yong Keun;Lee Sang Jong
KSBB Journal
/
v.19
no.6
s.89
/
pp.457-461
/
2004
DO-stat fed-batch cultures of Agaricus blazei were carried out using various feeding solutions, for the production of mycelial biomass and exopolysaccharides (EPS). It was observed to be more effective to use a feeding solution containing both carbon and nitrogen sources than that containing only carbon source. The best result was obtained when a feeding solution containing 450 g/l glucose, 60 g/l yeast extract, 30 g/l soytone peptone was used. The maxium mycelial biomass and EPS concentrations were 36.5 g/l and 10.9 g/l, respectively, at 100 hours of cultivation. The mycelial and EPS productivities were 0.37 g/l-h and 0.11 g/l-h, respectively. As compared with the batch culture, the mycelial biomass concentration and its productivity were 6.0- and 2.2-folds increased, respectively. The EPS concentration and its productivity were increased by 4.7 times and 1.8 times, respectively.
To develop a practical and cost-effective medium for bioethanol production from the hydrolysate of seaweed Sargassum sagamianum, we investigated the feasibility and performance of bioethanol production in CSL (corn-steep liquor)-containing medium, where yeast Pichia stipitis was used and the repeated batch was carried out in a surface-aerated fermentor. The optimal medium replacement time during the repeated operation was determined to be 36 h, and the surface aeration rates were 30 and 100 ml/min. Under these conditions, the repeated-batch operation was successfully carried out for 6 runs (216 h), in which the maximum bioethanol concentrations reached about 11-12 g/l at each batch operation. These results demonstrated that bioethanol production could be carried out repeatedly and steadily for 216 h. In these experiments, the total cumulative bioethanol production was 57.9 g and 58.0 g when the surface aeration rates were 30 ml/min and 100 ml/min, respectively. In addition, the bioethanol yields were 0.43 (about 84% of theoretical value) and 0.44 (about 86% of theoretical value) when the surface aeration rates were 30 ml/min and 100 ml/min, respectively. CSL was successfully used as a medium ingredient for the bioethanol production from the hydrolysate of seaweed Sargassum sagamianum, indicating that this medium may be practical and cost-effective for bioethanol production.
Pseudomanas fluorescens was selected from mushroom and studied in both batch and continuous culture in order to find out optimum conditions for cultivation. P. fluorescens is an aerobic bacterium and antagonistic to Pseudomonas tolaasii which causes blotch disease on the mushroom cap. Cells of P. fluorescens were grown well on medium containing 30g/L of glucose, whereas the growth was inhibited with the glucose concentration at higher than 30g/L. The highest value of specific growth rate and productivity were obtained when using 10g/L of yeast extract. Optimum concentrations of $NH_4Cl$ and $(NH_4)_2SO_4$ for culture were found to be 1.0g/L and 0.1g/L respectively. Optimum concentration of $MgSO_4{\cdot}7H_2O$ used as a sulfur source was 1.0g/L. It was also found that the cell concentrations were at the maximum level when grown on the medium containing 1.0g/L of $KH_2PO_4$ and 0.1g/L of $CaCl_2$. Also, the optimum culture conditions were $30^{\circ}C$ and pH 6.0. Cultivation of P.fluorescens at high initial dissolved oxygen (D.O) value led to a decrease of bacterial productivity in batch culture. Maximum productivity was achieved at 68 for the initial D.O value.
The present study was to investigate the continuous production of alcohol using immobilized carrier manufactured by polymeric materials. Fermentation runs with a crushed rice, with constituents recovered from batch culture and with ones from continuous culture were thus compared. The performances of immobilized carrier were governed by sandwitched synthetic polymers, the evolution of the continuous culture was steadily governed by the production of alcohol in the lag time of batch culture. The main focus was set on the enhancement of the alcohol production by an newly-developed polymeric forms. This polymeric form led to a drastic increase of the microorganism and the production cost in the continuous reactor was thereby reduced. The sandwitched polymeric-formed carrier, which was resistant to external environments, serves as an interesting alternative to maintain the stability of biological process. These whole results were discussed with the aim to better understand the continuous process implied in the microorganism's build-up during cultivation of fermentation broth.
The dissolved oxygen level of any cell culture environment has a critical effect on cellular metabolism. Specifically, hypoxia condition decreases cell viability and recombinant protein productivity. In this work, to develop CHO cells producing recombinant protein with high productivity, mammalian expression vectors containing a human tissue-type plasminogen activator (t-PA) gene with hypoxia response element (HRE) were constructed and stably transfected into CHO cells. CHO/2HRE-t-PA cells produced 2-folds higher recombinant t-PA production than CHO/t-PA cells in a $Ba^{2+}-alginate$ immobilized culture, and 16.8-folds in a repeated batch culture. In a non-aerated batch culture of suspension-adapted cells, t-PA productivity of CHO/2HRE/t-PA cells was 4.2-folds higher than that of CHO/t-PA cells. Our results indicate that HRE is a useful tool for the enhancement of protein productivity in mammalian cell cultures.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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