• 제목/요약/키워드: Baculovirus expression

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pcDNA3.1 벡터에서 재구성된 재조합 Baculovirus 벡터의 효능 (Efficacy of Recombinant Baculovirus Vector Reconstructed in pcDNA3.1 Vector)

  • 사영희;최창식;이기환;홍성갑
    • 한국정보통신학회:학술대회논문집
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    • 한국정보통신학회 2018년도 추계학술대회
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    • pp.444-447
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    • 2018
  • Baculovirus 발현 시스템은 박테리아 발현 시스템, 특히 복잡한 번역 후 변형을 필요로 하는 것과 비교하여 다량의 재조합 단백질을 생성하는 빠르고 비용 효율적인 방법을 포함하는 많은 알려진 장점을 갖는다. 특히 재조합 baculovirus는 광범위한 포유류 세포 유형에서 벡터를 전달하고 재조합 단백질을 발현 할 수 있다. 본 연구에서는 pcDNA3.1로부터 재구성된 baculovirus 벡터를 사용하였는데 이 벡터는 cytomegalovirus (CMV) 프로모터, uroplakin II promoter, polyhedron promoter, 수포 구내염 바이러스 G (VSVG), 녹색 형광 단백질 (EGFP), 단백질 전달 도메인 (PTD) 유전자 등 다양한 유전자들로 재조합 되어 개발되었다. 이러한 재구성 된 벡터를 다양한 세포 및 세포주에 감염시켰다. 이렇게 개발된 baculovirus 벡터는 재조합된 유전자들의 전이성 및 발현성을 기존의 일반적인 벡터와 비교하여 분석하였다. 본 연구결과로 이렇게 개발된 baculovirus 벡터는 기존의 대조군 벡터보다 전이성 및 발현성면에서 더 높은 효율을 갖는다는 것을 확인하였다.

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재조합 베큘로바이러스벡터의 효과적 발현 (Effective Expression of Recombinant Baculovirus Vector Systems)

  • 김지영;홍성갑
    • 한국정보통신학회:학술대회논문집
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    • 한국정보통신학회 2014년도 추계학술대회
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    • pp.977-980
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    • 2014
  • polyhedron promoter, vesicular stomatitis virus G (VSVG), polyA, cytomegalovirus (CMV) promoter, enhanced green fluorescent protein (EGFP), protein transduction domain (PTD) 유전자가 포함된 재조합 베큘로바이러스를 구축하였다. 본 재조합 베큘로바이러스 시스템은 인간 섬유아세포와 여러 가지 조직에 감염하여 시험하였고 재조합된 유전자의 전달과 유전자 발현을 대조 벡터시스템과 비교하였다. 본 연구의 결과로 제작된 재조합 베큘로바이러스 시스템은 유전자의 전달과 발현에 있어서 대조 벡터시스템 보다 더욱 효과적이고 안전적이었다.

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Generation of Baculovirus Expression Vector Using Detective Autographa California Nuclear Polyhedrosis Virus Genome Maintained in Escherichia coli for $Occ^{+}$ Virus Production

  • Je, Yeon-Ho;Chang, Jin-Hee;Roh, Jong-Yul;Jin, Byung-Rae
    • International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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    • 제2권2호
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    • pp.155-160
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    • 2001
  • We have generated a novel baculovirus genome which can be maintained in Escherichia coli that facilitates the rapid and efficient generation of recombinant baculovirus expression vectors. To make $Occ^{+}$ recombinant expression vectors, polyhedrin gene under the control of p10 promoter was inserted to bAcGOZA and this genome was designated bApGOZA. As in bAcGOZA, bApGOZA lacks a portion of the essential ORF1629 gene, but includes a mini-F replicon and selectable kanamycin-resistance marker, This occasion-producing activity of bApGOZA can be used very conveniently for its oral infectivity to insect larvae in mass production of foreign protein and insecticides.

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새로운 재조합 베큘로바이러스벡터의 유전자전이와 유전자발현 (Gene Transfer and Gene Expression of Novel Recombinant Baculovirus Vector System)

  • 사영희;홍성갑
    • 한국정보통신학회:학술대회논문집
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    • 한국정보통신학회 2013년도 추계학술대회
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    • pp.946-948
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    • 2013
  • 베큘로바이러스 시스템이 제조되었는데 이것은 polyhedron promoter, vesicular stomatitis virus G (VSVG), polyA, cytomegalovirus (CMV) promoter, enhanced green fluorescent protein (EGFP), protein transduction domain (PTD) 유전자를 재조합한 것이다. 본 재조합벡터 시스템은 인간 섬유아세포에 적용하여 시험하였고 재조합된 유전자의 전이와 유전자 발현을 대조 벡터시스템과 비교하였다. 본 연구로부터 새롭게 제작된 본 베큘로바이러스 시스템이 유전자의 전이와 유전자 발현 면에서 대조 벡터시스템 보다 고효율을 나타내었다.

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새로운 재조합 베큘로바이러스 벡터의 유전자 전달과 유전자 발현의 효과 (Efficacy of Gene Transfer and Expression of Novel Recombinant Baculovirus Vector)

  • 권태동;홍성갑
    • 한국정보통신학회논문지
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    • 제18권8호
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    • pp.2017-2022
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    • 2014
  • 폴리히드론 프로모터, 수포성구내염 바이러스G, 폴리A, 사이토메가바이러스 프로모터, 강화녹색형광단백질, 단백질전달부위 유전자 등을 포함한 새로운 베큘로바이러스 시스템이 제조되었다. 본 재조합벡터 시스템은 인간 섬유아세포에 적용하여 시험하였고 재조합된 유전자의 전달과 유전자 발현을 대조 벡터시스템과 비교하였다. 본 연구로부터 새롭게 제작된 본 베큘로바이러스 시스템이 유전자의 전이와 유전자 발현 면에서 대조 벡터시스템 보다 고효율을 나타내었다.

Expression of Human Stem Cell Factor with Recombinant Baculovirus in BmN Cell Line and Silkworm

  • Xijie, Guo;Yongfeng, Jin;Mingguan, Yang;Yaozhou, Zhang
    • International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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    • 제4권1호
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    • pp.51-56
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    • 2002
  • A recombinant transfer vector pBacSCF was constructed by inserting huamn stem cell factor (hSCF) cDNA into plasmid pBacPAK8. BmN cells were co-transfected with modified Bombyx mori, nuclear polyhedrosis virus (BmBacPAK) DNA and the recmbinant transfer vector to construct a recombinant baculovirus containing hSCE gene. DNA dot blotting and RNA dot blotting demonstrated that the hSCE gene was contained in the recombinant virus and transcribed. The recombinant baculovirus was infectious to BmN cells and to silkworm. SDS-PAGE analysis showed a specific band of expressed product in the extract of infected cells and in the heamolymph of infected larvae. Bioactivity of the recombinant hSCE was determined with W-1 cell line and MTT colorimetric method in synergy with interlukin-3 (IL-3). These results revealed that the hSCF gene was over-expressed in cultured cells and lavae of silkworm.

Efficacy of Gene Transfer of Recombinant Baculovirus Vector

  • Sa, Young-Hee;Hong, Seong-Karp
    • 한국정보통신학회:학술대회논문집
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    • 한국정보통신학회 2013년도 춘계학술대회
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    • pp.1006-1008
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    • 2013
  • A novel recombinant baculovirus vector system containing coding genes for polyhedron promoter, vesicular stomatitis virus G (VSVG), polyA, cytomegalovirus (CMV) promoter, enhanced green fluorescent protein (EGFP), and protein transduction domain (PTD) was constructed. We applied this recombinant baculovirus vector into cells and murine tissues and compared efficacy of gene transfer and expression of this recombinant baculovirus vector system with control vector system. From this result, we confirmed that this novel recombinant baculovirus vector system was very effective than control vector system.

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재조합 베큘로바이러스벡터의 유전자전달과 발현의 효과 (Efficacy of Gene Transfer and Expression of Recombinanat Baculovirus Vector System)

  • 사영희;홍성갑
    • 한국정보통신학회:학술대회논문집
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    • 한국정보통신학회 2014년도 춘계학술대회
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    • pp.813-815
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    • 2014
  • polyhedron promoter, vesicular stomatitis virus G (VSVG), polyA, cytomegalovirus (CMV) promoter, enhanced green fluorescent protein (EGFP), protein transduction domain (PTD) 유전자가 포함된 새로운 재조합 베큘로바이러스를 제조하였다. 본 재조합 베큘로바이러스 시스템은 293T, HepG2, HFF, Hur7 세포에 감염하여 시험하였고 재조합된 유전자의 전이와 유전자 발현을 대조 벡터시스템과 비교하였다. 본 연구로부터 새롭게 제작된 재조합 베큘로바이러스 시스템이 감염에 의한 유전자의 전달과 해당 유전자 발현에 있어서 대조 벡터시스템 보다 우수한 효과를 나타내었다.

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Expression of Immunologically Active Porcine Recombinant TGF-${\beta}1$ Precursor Protein in Baculovirus System

  • Lim, Hyun;Kim, Pyeung-Hyeun;Chun, Gie-Taek;Choi, Eui-Yul;Yie, Se-Won
    • Journal of Microbiology
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    • 제35권4호
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    • pp.341-346
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    • 1997
  • In order to express recombinant porcine TGF-${\beta}1$ protein in a baculovirus expression system the entire TGF-${\beta}1$gene containing extra amino acids at the N terminus was cloned into pFBa and pFBb of the Bac-To-$Bac^{TM}$ baculovirus expression system. One of the clones contained 106 extra amino acids and was designated pFBa-106 TGF-${\beta}1$, and the other had 28 extra amino acids and was designated pFBb-28 TGF-${\beta}1$. The orientation of the gene was identified with restriction enzyme mapping and PCR with internal TGF-${\beta}1$ primers. Sf-9 cells were infected at a m.o.i. of 10 by the recombinant viruses generated from the two expected sizes of 55 kD and 46.4kD. these precursor forms of TGF-${\beta}1$ with a polyclonal antibody against human TGF-${\beta}1$. No mature form of TGF-${\beta}1$ protein was detected on SDS gels and an immunoblot indicated that TGF-${\beta}1$ precursor is not properlu processed in insect cells.

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High-efficient Expression of Porcine IL-2 with Recombinant Baculovirus Infected Silkworm, Bombyx mori

  • Inumaru, Shigeki;KokuHo, Takehiro;Yada, Takashi;Kiuchi, Makoto;Miyazawa, Mitsusuhiro
    • Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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    • 제5권2호
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    • pp.146-149
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    • 2000
  • Biologically active porcine Interleukin-2(poIL-2) was produced from in vitro and in viva baculovirus expression system, namely the Autographa californica nuclear polyhedrosis virus (ACNPV)-cell culture system and the Hybrid nucler polthedrosis virus (HyNPV)-sillkworm larva system. The concentration of the recombinant poIL-2(rpoIL-2) in the larvae hemolymph was 1 to 3 mg/mL, which was about 7 to 20 times those of the cell culture systems. The level of this expression efficiency is equal to that with transgenic livestock, secretion products in milk.

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