Ham, Hyeonheui;Oh, Ga-Ram;Park, Dong Suk;Lee, Yong Hoon
The Plant Pathology Journal
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제38권5호
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pp.482-489
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2022
Fire blight caused by Erwinia amylovora (Ea) is a devastating disease in apple and pear trees. Oxolinic acid (OA), a quinolone family antibiotic that inhibits DNA gyrase, has been employed to control fire blight in South Korea since 2015. The continuous use of this bactericide has resulted in the emergence of OA-resistant strains in bacterial pathogens in other countries. To investigate the occurrence of OA-resistant Ea strains in South Korea, we collected a total of 516 Ea isolates from diseased apple and pear trees in 2020-2021 and assessed their sensitivities to OA. We found that all isolates were susceptible to OA. To explore the possibility of emerging OA-resistant Ea by continuous application of OA, we exposed Ea stains to a range of OA concentrations and constructed OA-resistant mutant strains. Resistance was associated with mutations in the GyrA at codons 81 and 83, which result in glycine to cysteine and serine to arginine amino acid substitutions, respectively. The in vitro growth of the mutants in nutrient media and their virulence in immature apple fruits were lower than those of wild-type. Our results suggest that OA-resistance decreases the fitness of Ea. Future work should clarify the mechanisms by which OA-resistance decreases virulence of this plant pathogen. Continuous monitoring of OA-resistance in Ea is required to maintain the efficacy of this potent bactericide.
Implementation of disease-warning systems often results in substantial reduction of spray frequency (Lorente et al., 2000; Madden et al., 2000). This change reduces the burden of pesticide sprays on the environment and can also delay the development of fungicide and bactericide resistance. To assess the risk of outbreaks of many foliar diseases, it is important to quantify leaf wetness duration(LWD) since activities of foliar pathogen depend on the presence of free water on host crop surface for sufficient periods of time to allow infection to occur.(omitted)
감자 생산에 치명적인 흑각병을 유발하는 흑각병원균 (Erwinia carotovora subsp. atroseptica) 을 방제할 수 있는 화학적 방제제를 선발하기 위하여 7 종의 항생제와 oxolinic acid, 그리고 4 종의 구리제를 대상으로 병원균에 대한 억제효과와 저항성을 in vitro에서 조사하였다. Streptomycin, streptomycin sulfate, oxolinic acid는 0.02 mM 처리 24 시간 후, 그리고 구리제인 copper hydroxide, copper oxide, copper sulfate 는 3 mM 처리 24 시간 후 완전히 억제되었다. 약제들에 대한 병원균의 저항성을 조사하고자 최소 억제농도의 1.3 배를 처리하고 72 시간 후에 생존율을 조사한 결과, 항생제 및 oxolinic acid 처리구에서는 저항성균이 관찰되었으나, 구리제 처리구에서는 관찰되지 않았다. 저농도 처리로 병원균을 방제할 수 있는 2 종의 항생제 및 oxolinic acid 와 저항성균 유발 가능성이 낮은 구리제 3 종을 혼합처리였을 경우, streptomycin + copper oxide(0.016 + 1.2 mM, 9.3 + 171.6 ppm), streptomycin + copper hydroxide(0.016 + 1.5 mM, 9.3 + 146.3 ppm), streptomycin sulfate+copper oxide(0.005 + 1.2 mM, 7.0 + 171.6 ppm), streptomycin sulfate+copper hydroxide(0.005 + 1.5 mM, 7.0+146.3 ppm) 처리 24 시간 후 병원균의 생장은 완전 억제되었고, 72 시간 후 저항성균이 전혀 관찰되지 않았다. 그러나 oxolinic acid+구리제 혼합처리의 경우와 2 종의 항생제 및 oxolinic acid + copper sulfate 혼합처리의 경우 공히 균생장 억제효과가 나타나지 않았다. 본 실험의 결과는 효과적인 감자흑각병의 방제를 위하여 약제의 단일 사용보다는 혼합 사용하는 경우 더 높은 방제효과와 낮은 저항성균 유발효과가 있다는 것 을 보여주고 있다.
충북지역 토마토 시설재배지 토양의 풋마름병 병원균(Ralstonia solanaceaum)의 오염도 및 분리균의 특성을 조사하였다. 총 133개 조사 토양 중 27개 토양에서 선택배지로부터 R. solanacearum이 분리되어, 전체 시설재배지 토양의 20.3%가 풋마름병균에 오염되어 있음을 나타냈다. 오염 토양에서 병원균의 밀도는 토양 g당 $10^{2.4}$ cfu로 조사되었다. 병든 토마토로부터 분리한 12균주를 포함한 총 71개의 분리균주는 모두 레이스 1이었고, 35개 균주가 생리형 3으로, 36개 균주가 생리형 4로 구분되었다. 전체 분리균의 88% 이상이 각각 oxolinic acid 0.5$\mu\textrm{g}$/ml, streptomycin 25 $\mu\textrm{g}$/ml, tetracycline 5 $\mu\textrm{g}$/ml and cupric sulfate 375 $\mu\textrm{g}$ml(1.5 mM)을 함유한 nutrient agar에서 생장이 억제되었고, 전체균주의 11.3%, 4.2% and 5.6%가 각각 감수성균주의 최소억제농도보다 10배 이상의 oxolinic acid, streptomycin, tetracycline가 함유된 배지에서 생장하였다. 5개 균주는 2개의 살세균제에 동시에 그리고 1개 균주는 3개의 살세균제 모두에 저항성을 보였다.
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