목 적 : 최근 진단이 증가하고 있는 급성 국소성 세균성 신장염은 신장염의 범주 중에서도 진행된 형태의 것으로 일반적인 요로 감염과는 진단 및 치료에 있어서 차이를 보인다. 본 연구에서는 급성 국소성 세균성 신장염이 가지는 임상적 양상을 방사선학적으로 이상을 동반하지 않는 일반적인 요로 감염과 비교하고, 방사선학적 특징을 알아보고자 하였다. 방 법 : 2000년 1월부터 2002년 5월까지 본원에 요 배양 검사상 양성 소견을 보인 요로 감염 환아들 중 초음파와 DMSA상 급성 국소성 세균성 신장염의 진단 기준에 맞는 생후 1개월에서 12개월 이하의 환아 22명을 대상으로 하였고, 대조군으로는 환아들과 동일한 시기에 요로 감염으로 입원하여 실시한 요 배양검사가 양성이며 방사선학적으로는 이상이 없는 환아 중 연령의 분포와 성별이 같은 22명으로 하여, 이들의 증상 및 임상적 검사소견, 방사선학적 특징을 분류하였다. 결 과 : 1) 급성 국소성 세균성 신장염은 주로 1개월에서 12개월 사이의 연령 대에서 호발하였으며 환자군에서 남아의 비율이 63.7%로 여아보다 높았다. 2) 급성 국소성 세균성 신장염과 일반적인 요로 감염 환자군간의 임상적 증상은 차이가 없었으나 입원 치료 기간은 환자군에서 더 기간이 긴 것으로 나타났다. 3) 급성 국소성 세균성 신장염 환자군의 경우 대조군보다 적혈구 침강 속도 및 CRP가 모두 높은 것으로 나타났다. 4) 요 배양 검사상 원인균의 비율은 양군에서 모두 대장균이 가장 많은 것으로 나타났다. 5) 방사선학적 검사상 급성 국소성 세균성 신장염은 초음파상 주로 증가된 반향을 보이고 병변 부위의 혈류량은 감소되어 있었고 쐐기 모양 또는 구형 모양의 종괴 양상을 보이며, 병변의 위치는 주로 신장의 상엽, 좌측 신장, 편측성 발생을 보였다. 6) DMSA상 보인 신 피질 섭취의 결손상은 초음파상에 보였던 병변과 일치하였으며 초음파보다 초기 병변의 발견에 더 민감한 것으로 나타났다. 7) 환자군에서 재발은 3례에서 보였으며, 16례의 추적 검사상 13례에서 방사선학적 호전을 보였고, 신 농양이나 염증의 파급 소견은 없어 항생제의 치료만으로 좋은 예후를 보였다. 결 론 : 급성 국소성 세균성 신장염은 일반적인 요로 감염과 임상적 양상만으로는 구분이 어려워 방사선학적 진단이 꼭 필요한 반면, 염증의 정도가 다르고 임상적 검사소견과 필요한 치료기간에 있어서 차이를 보이므로 일반적인 요로 감염으로 입원한 경우에도 반드시 비뇨 방사선학적 검사를 통하여 이를 가려내고 적절한 치료를 시행하여야 한다.
콩 불마름병을 일으키는 Xanthomonas axonopodis pv. glycines를 종자에서 DNA 추출없이 바로 검출하는 방법에 대하여 연구하였다. 콩 종자에서 X. axonopodis pv. glycines를 특이적으로 검출하기 위해 특이적인 유전자로 알려져 있는 glycinecin A로부터 증폭 size가 401 bp인 primer Xag F1 & Xag R1을 고안하였다. Xag Fl과 Xag R1 primer는 콩 종자와 잎에서 분리한 균주와 KACC에서 분양받은 X. axonopoids pv. glycines 균주를 증폭시켰으나 근연종인 X. axonopodis pv. citri, X. axonopodis pv. vesicatoria 등은 증폭되지 않았다. 콩 종자에 존재하는 것으로 알려진 다른 세균들 역시 증폭되지 않았다. 고안된 Xag F1 & Xag R1 primer를 이용한 X. axonopodis pv. glycines의 검출 한계 농도 측정은 genomic DNA와 세포 현탁액을 이용하였다. X. axonopodis pv. glycines의 genomic DNA는 200 fg까지 증폭이 되었으며, 세포현탁액은 $OD_{600nm}$ 0.1로 농도를 조정한 뒤, $10^{-8}$까지 희석하여 측정한 결과 $10^{-6}$인 $1.8{\times}10^3$ cfu/ml까지 증폭이 확인되었다. 자연 감염된 종자에서 병원균을 검출하기 위해 종자를 육안상 건전종자와 불건전한 종자(변색립, 피해립)로 구분하여 direct PCR 방법으로 실험 한 결과 육안상 건전종자에서는 병원균이 검출되지 않았으나 불건전한 종자에서는 병원균의 검출이 확인되었다. 또한 진탕 배양 시간에 따른 병원균의 검출여부를 조사한 결과 진탕 배양 2시간부터 병원균의 검출이 확인되었으며 시간이 지날수록 증폭 밴드가 더욱 선명해 지는 것을 확인할 수 있었다. 그러므로 고안된 Xag Fl & Xag R1 primer를 이용한 direct PCR 방법은 다른 많은 미생물들로 오염되어진 콩종자에 있는 X. axonopodis pv. glycines를 신속하고 민감하게 검정할 수 있는 효과적인 방법으로 활용될 수 있을 것이다.
다양한 천연물의 합성대사에 관여하는 식물 cytochrome P450 (P450s)은 그 기능적 다양성에도 불구하고, 이들 효소의 광범위한 기질 특이성을 설명해 줄 수 있는 구조분석에 대해서는 충분한 연구가 이루어지지 못하고 있는 실정이다. 식물 p-coumarate 3-hydroxylase (C3H)에 의해 매개되는 효소 반응은 lignin 과 다양한 phenylpropanoid 부산물들의 생합성에 매우 중요한 것으로 여겨지지만, 막 단백질인 C3H의 발현 및 정제가 효과적으로 이루어지지 못하여, 활성을 측정하기 위한 분석방법이 체계화 되지 못하고 있다. C3H의 작용기작과 기질특이성에 대해 폭넓은 이해를 위한 구조분석의 선행단계는 활성을 갖는 C3H를 밀리그램 단위로 분리, 정제하는 실험적 방법을 확립하는 것이라 할 수 있다. 이를 위해, 본 연구에서는 다양한 돌연변이 방법을 도입하여 식물 막단백질 C3H를 대장균 시스템에서 효과적으로 발현 및 정제할 수 있는 시스템을 사용하였다. 변형된 cytochrome P450 C3H ($C3H_{mod}$)을 세포막으로부터 고농도의 염완충용액을 이용하여 계면활성제 없이 추출하였으며, 2단계 chromatography를 통해 활성을 유지한 상태로 분리할 수 있었다. 이러한 실험적 기법은 NMR 및 X-ray crystallography와 같은 구조분석을 통한 C3H의 효과적인 분석에 적용될 수 있을 것이며, 또한 다른 식물 cytochrome P450 단백질의 효과적인 분석에도 적용 될 수 있을 것이다.
Strain IMCC26207 was isolated from the surface layer of Lake Soyang in Korea by the dilutionto-extinction culturing method, using a liquid medium prepared with filtered and autoclaved lake water. The strain could neither be maintained in a synthetic medium other than natural freshwater medium nor grown on solid agar plates. Phylogenetic analysis of 16S rRNA gene sequences indicated that strain IMCC26207 formed a distinct lineage in the order Acidimicrobiales of the phylum Actinobacteria. The closest relative among the previously identified bacterial taxa was "Candidatus Microthrix parvicella" with 16S rRNA gene sequence similarity of 91.7%. Here, the draft genome sequence of strain IMCC26207, a freshwater actinobacterium, is reported with the description of the genome properties and annotation summary. The draft genome consisted of 10 contigs with a total size of 3,316,799 bp and an average G+C content of 57.3%. The IMCC26207 genome was predicted to contain 2,975 protein-coding genes and 51 non-coding RNA genes, including 45 tRNA genes. Approximately 76.8% of the protein coding genes could be assigned with a specific function. Annotation of the IMCC26207 genome showed several traits of adaptation to living in oligotrophic freshwater environments, such as phosphorus-limited condition. Comparative genomic analysis revealed that the genome of strain IMCC26207 was distinct from that of "Candidatus Microthrix" strains; therefore, we propose the name "Candidatus Limnosphaera aquatica" for this bacterium.
Using tetrameric ${\beta}$-galactosidase as a model protein, anchoring motives were screened in Bacillus subtilis spore display system. Eleven spore coat proteins were selected considering their expression levels and the location in the spore coat layer. After chromosomal single-copy homologous integration in the amyE site of Bacillus subtilis chromosome, cotE and cotG were chosen as possible spore surface anchoring motives with their higher whole cell ${\beta}$-galactosidase activity. PAGE and Wester blot of extracted fraction of outer layer of purified spore, which express CotE-LacZ or CotG-LacZ fusion verified the existence of exact size of fusion protein and its location in outer coat layer of purified spore. ${\beta}$-galactosidase activity of spore with CotE-LacZ or CotG-LacZ fusion reached its highest value around 16~20 h of culture time in terms of whole cell and purified spore. After intensive spore purification with lysozyme treatment and renografin treatment, spore of BJH135, which expresses CotE-LacZ, retained only 1~2% of its whole cell ${\beta}$-galactosidase activity. Whereas spore of BJH136, which has cotG-lacZ cassette in the chromosome, retained 10~15% of its whole cell ${\beta}$-galactosidase activity, proving minor perturbation of CotG-LacZ, when incorporated in the spore coat layer of Bacillus subtilis compared to CotE-LacZ. Usage of Bacillus subtilis WB700, of which 7 proteases are knocked-out and thereby resulting in 99.7% decrease in protease activity of the host, did not prevent the proteolytic degradation of spore surface expressed CotG-LacZ fusion protein.
Objectives : This study aimed at evaluation of the effects of Gastrodiae Rhizoma on brain edema and aquaporin water channel expressions in the brain. Methods : Brain edema following intracerebral hemorrhage (ICH) was induced by the stereotaxic intrastriatal injection of bacterial collagenase type VII in Sprague-Dawley rats. Then ethanol extract of Gastrodiae rhizoma was treated once a day for 3 days. Brain edema % and water contents, and cell size of neurons in the cerebral cortex were examined. Immuno-histochemistry was processed for AQP4, AQP1, and AQP9 expressions in the brain sections and area % of immuno-labeling was analyzed with image analysis. Results : 1. Ethanol extract of Gastrodiae Rhizoma reduced brain edema of ICH induced rats significantly. 2. Ethanol extract of Gastrodiae Rhizoma reduced excessive brain tissue water contents of ICH induced rats significantly. 3. Ethanol extract of Gastrodiae Rhizoma reduced cellular edema of neurons in cerebral cortex of ICH induced rats significantly. 4. Ethanol extract of Gastrodiae Rhizoma reduced AQP4 immuno-positive area % in cerebral cortex and external capsule of ICH induced rat brain significantly. 5. Ethanol extract of Gastrodiae Rhizoma reduced AQP9 immuno-positive area % in glia limitans externa of ICH induced rat brain significantly. Conclusions : These results suggest that Gastrodiae Rhizoma reveals protective effects against brain edema and cytotoxic edema of neurons by means of down-regulation of AQP4 expression in the brain.
Preceding infection or inflammation such as bacterial meningitis has been associated with poor outcomes after stroke. Previously, we reported that intracorpus callosum microinjection of lipopolysaccharides (LPS) strongly accelerated the ischemia/reperfusionevoked brain tissue damage via recruiting inflammatory cells into the ischemic lesion. Simvastatin, 3-hydroxy-3-methylgultaryl (HMG)-CoA reductase inhibitor, has been shown to reduce inflammatory responses in vascular diseases. Thus, we investigated whether simvastatin could reduce the LPS-accelerated ischemic injury. Simvastatin (20 mg/kg) was orally administered to rats prior to cerebral ischemic insults (4 times at 72, 48, 25, and 1-h pre-ischemia). LPS was microinjected into rat corpus callosum 1 day before the ischemic injury. Treatment of simvastatin reduced the LPS-accelerated infarct size by 73%, and decreased the ischemia/reperfusion-induced expressions of pro-inflammatory mediators such as iNOS, COX-2 and IL-$1{\beta}$ in LPS-injected rat brains. However, simvastatin did not reduce the infiltration of microglial/macrophageal cells into the LPS-pretreated brain lesion. In vitro migration assay also showed that simvastatin did not inhibit the monocyte chemoattractant protein-1-evoked migration of microglial/macrophageal cells. Instead, simvastatin inhibited the nuclear translocation of NF-${\kappa}B$, a key signaling event in expressions of various proinflammatory mediators, by decreasing the degradation of $I{\kappa}B$. The present results indicate that simvastatin may be beneficial particularly to the accelerated cerebral ischemic injury under inflammatory or infectious conditions.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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제31권2호
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pp.70-74
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2015
The current market size of insect industry in Korea is estimated at 300 million dollars and more than 500 local farms are related to many insect industry. One of the strong candidates for insect industry is Korean horn beetle, Allomyrina dichotoma. Early this year, we reported a viral disease extremely fatal to A. dichotoma larvae. While we were proceeding a nationwide investigation of this disease, it was informed that similar disease symptom has been occurred occasionally during past over 10 years. The symptom can be easily confused with early stage of bacterial infection or physiological damage such as low temperature and high humidity. A peroral infection with the purified virus to healthy larvae produced a result that only 21% of larvae survived and became pupae. Although some of the survived adult beetle was deformational, many of them had no abnormal appearance and even succeeded in mating. Later, these beetles were examined if they were carrying the virus, and all except one were confirmed as live virus carrier. This implies that these beetles may fly out and spread the disease to the nature. We found the evidence for this possibility by collecting a few wild A. dichotoma larvae which were virus infected, near two local farms rearing A. dichotoma larvae. So far, transovarial transmission of this virus to the eggs, or horizontal transmission to other commercially reared insects is not known yet.
삼첨 판막 심내막염은 감수성이 있는 항생제에 효과적으로 치료될 수 있다. 그러나 패혈증이 지속되거 나, 중증의 심부전, 다발성 폐 색전증 그리고 실 초음파상 증식증 (vegetation)이 있는 경우는 수술이 필요 하다. . 19세횝 남자환자가 감염성심내막염으로 입원하였다. 환자는 9년전에 perimembranous type의 VSD로 수술받은 병 력 이 있다. 심초음파상 삼첨판의 전엽부에 커다란 증식증의 소견이 보였고,과거에 VSD를 봉합했던 부위에 누 출 (leakage)을 통한 좌우단락이 관찰되었다. 항생제치료와 함께 인공판막치 환술을 시행하였다. St. Jude Medical 양엽판막 (size 33 mm으로 삼첨 판막 대 치술을 시 행하였고 잔여 VSD는 단순봉합으 로 폐쇄하였다. 술후 시행한 심초음파검사에서 치환된 삼첨 판막의 기능은 좋았고, 증식증과 좌우단락의 소견은 보이지 않았다. 환자는 합병증없이 술후 25일째에 퇴원하였다. 저자들이 경험한 본 증례는 잔여 VSD로 인해 생긴 감염성심내막염을 초기에 적극적인 수술을 시행 하여 좋은결과를 얻었음을 보여준다. 이 에 문헌고찰과 더불어 보고하는 바이다.
El-Rab, Sanaa M.F. Gad;Halawani, Eman M.;Hassan, Aziza M.
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제28권9호
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pp.1563-1572
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2018
Gold nanoparticles (AuNP) and their conjugates have been gaining a great deal of recognition in the medical field. Meanwhile, extended-spectrum ${\beta}$-lactamases (ESBL)-producing bacteria are also demonstrating a challenging problem for health care. The aim of this study was the biosynthesis of AuNP using Rosa damascenes petal extract and conjugation of ceftriaxone antibiotic (Cef-AuNP) in inhibiting ESBL-producing bacteria and study of in vitro anticancer activity. Characterization of the synthesized AuNP and Cef-AuNP was studied. ESBL-producing strains, Acinetobacter baumannii ACI1 and Pseudomonas aeruginosa PSE4 were used for testing the efficacy of Cef-AuNP. The cells of MCF-7 breast cancer were treated with previous AuNP and Cef-AuNP at different time intervals. Cytotoxicity effects of apoptosis and its molecular mechanism were evaluated. Ultraviolet-visible spectroscopy and Fourier transform infrared spectroscopy established the formation of AuNP and Cef-AuNP. Transmission electron microscope demonstrated that the formed nanoparticles were of different shapes with sizes of 15~35 nm and conjugation was established by a slight increase in size. Minimum inhibitory concentration (MIC) values of Cef-AuNP against tested strains were obtained as 3.6 and $4{\mu}g/ml$, respectively. Cef-AuNP demonstrated a decrease in the MIC of ceftriaxone down to more than 27 folds on the studied strains. The biosynthesized AuNP displayed apoptotic and time-dependent cytotoxic effects in the cells of MCF-7 at a concentration of $0.1{\mu}g/ml$ medium. The Cef-AuNP have low significant effects on MCF-7 cells. These results enhance the conjugating utility in old unresponsive ceftriaxone with AuNP to restore its efficiency against otherwise resistant bacterial pathogens. Additionally, AuNP may be used as an alternative chemotherapeutic treatment of MCF-7 cancer cells.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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