The physico-chemical properties of viscous substances extracted from chungkook-jang were investigated. The crude protein content of the viscous substance was approximately 61% and 32% of the crude protein content was amino type nitrogen. The contents of glutamic acid in amino acids and potassium in minerals of viscous substances were more higher than those of raw soybean and chungkook-jang. The viscosity of 5% viscous substance solution was higher than that of 15% sucrose solution. The transmittance of viscous substance solutions from Bacillus natto and Bacillus subtilis was lowest at pH 5.0, the absorbances were lowest at pH 5.5 and pH 4.0, respectively. The fibrinolytic activity of viscous substances by B. natto and B. subtilis was 0.438 and 0.163 unit/mg protein, respectively. Though viscous substances were heated for 5 min and 30 min at $100^{\circ}C$, 90% of and 45% the fibrinolytic activity was remained, respectively.
Whole soybean meju was fermented with four Bacillus strains for 45 hr in its model system. The pH range of the product was $7.98{\sim}8.68$, the contents of amino nitrogen and ammoniacal nitrogen were $286{\sim}439\;mg%,\;0.11{\sim}0.23%$, respectively and that of reducing sugar ranged $0.65{\sim}2.24%$. During fermentation, the enzyme activities increased up to $30{\sim}40\;hr$ of fermentation and slightly decreased after 45 hr. Stachyose was special sugar components for B. licheniformis and raffinose was for B. natto. The components of the organic acid showed distinctive patterns among four products and the patterns of amino acids and fatty acids were almost similar to those of other reports. The main and common odor concentrates of meju were pyrazine components, 3-methyl-1-butanol, acetic acid and ethanol. Chunggukjang, mixed with B. natto and B. licheniformis showed more acceptabilities than other combinations. Soybean paste, mixed with B. megaterium and B. subtilis, soysauce, mixed with B. megaterium and A. oryzae showed excellent acceptability, respectively.
The growth process of the Chungkook-jang that occured by utilizing such traditional methods as Bacillus natto and Bacillus subtilis method has been examined. The results of the experiment in which the changing process of elements during the storage period had been measured are as follows: 1. During the growth period, concerning any change in pH, the storage period had been declined and after 18 days pH rose above 7.0. Salt content was between $5.28{\sim}6.40%$ and Bacillus subtilis fungus showed the highest titrable acidity. 2. Moisture content was between $50.94{\sim}56.74%$ and crude protein content range was $14.44{\sim}18.60%$ indicating irregularity in pattern resulting from the testing equipment groups, whereas crude fat and crude fiber tend to decrease in general. 3. During the storage, total sugar and ethyl alcohol content in all of groups tended to decrease and after 18 days Bacillus subtilis total sugar content was the lowest. 4. Amino nitrogen and water soluble nitrogen content increased with days, but no difference was found between groups. 5. Amylase and protease activity showed irregular pattern with time, but no significant difference between groups was found.
The liquifying $\alpha-amylase$ production from B. subtilis, A. oryzae and B. natto using wheat and rice bran as low cost culture medium was investigated. Among 3 strains, B. natto showed heights productivity of $\alpha-amylase$ in the outer wheat bran medium. And the optimum culture condition is pH 6.8 and $37^{\circ}C$ for the production of $\alpha-amylase$. The $\alpha-amylase$ activity of the crude enzyme and the purified enzyme are 256 unit/ml and 10,700 unit/ml, respectivitly. The $\alpha-amylase$ from B. natto cultrtured in outer wheat bran medium was purified into nearly a pure state(98.7%). And the molecular weight of the purified $\alpha-amylase$ was 34,000.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.45
no.5
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pp.736-745
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2016
Cheonggukjang, a traditional Korean fermented soy food, was prepared by inoculation of Bacillus subtilis EMD4 or Bacillus amyloliquefaciens EMD17 with anti-bacterial or anti-fungal activities into soybeans. Cheonggukjang was also prepared by co-inoculation of EMD4 and EMD17 (1:1, v/v). Control cheonggukjang was prepared by using B. subtilis KACC16450 (Natto strain). Growth of B. cereus cells spiked with starter organisms was completely inhibited by B. amyloliquefaciens EMD17 after 12 h of fermentation at $37^{\circ}C$. Growth of B. cereus was also inhibited by B. subtilis EMD4, but the degree of inhibition was weaker. After 48 h of fermentation, cheonggukjang samples were stored for 10 days at $4^{\circ}C$. B. cereus cells were not detected from cheonggukjang inoculated with EMD4, whereas significant numbers still present in control. The pH values of cheonggukjang samples were not significantly different. During fermentation, cheonggukjang fermented with EMD17 showed the highest fibrinolytic activity and during storage, cheonggukjang fermented with a Natto strain was the highest. Cheonggukjang fermented with a Natto strain also showed the highest amount of total phenolic compounds. The results show that control of B. cereus in cheonggukjang is possible by using starters such as B. amyloliquefaciens EMD17.
In order to study on the preparation of improved soysauce, Koji(soybean and wheat mash fermented by the strain Aspergillus sojae), Koji-Natto(mixed with the various proportion of Koji to Natto; 8 : 2, 6 : 4, 4 : 6, 2 : 8) and Natto (prepared using the strain: Bacillus subtilis) were prepared as soysauce materials. Sensory evaluation for the soysauces made from above-mentioned soysauce materials and the contents of total nitrogen, amino nitrogen, ammonia nitrogen, reducing sugar, total acid and enzyme activity were determined. The results were summarized as follows: 1. Protease activity of Natto was over twice higher than that of Koji and amylase activity of Koji was three times higher than that of Natto. Koji-Natto showed successive increase of amylase activity and successive decrease of protease activity as Koji proportion was increased to Natto. 2. The contents of total nitrogen and amino nitrogen in all the soysauce mashes displayed linear increases or no changes of these contents as aging. The contents of total nitrogen and amino nitrogen in the mahes were higher as Natto proportion increase to Koji during the aging period. 3. In Natto soysauce mash and Koji-Natto soysauce mashes the contents of ammonia nitrogen were gradually increased until $1{\sim}2$ months and rapidly reduced after that period, while Koji soysauce mashes were continuatively increased. 4. In all the soysauce mash the reducing sugar increased preeminently until the two months and after then there was a rapid decrease as aging the contents of reducing sugar in the mash were higher as Natto proportion increased to Koji during aging period. 5. The total acid of Koji and Koji-Natto (8 : 2) soysauce mash showed gradual increase as aging, while contents of total acid in Natto and other Koji-Natto soysauce mashes increased preeminently until 50${\sim}$70 days aging, after then decreased. 6. The results of sensory evaluation for three-month-fermented soysauces showed the most excellent in Koji-Natto (6 : 4) and successive order in the soysauces consisting of Koji and Natto proportion: 8 : 2, 10 : 0, 4 : 6, 2 : 8, 0 : 10.
Bacillus polyfermenticus SCD was transformed by the recombinant shuttle vector for Bacillus and Escherichia coli containing 3 antibiotic resistant genes and an ${\alpha}$-amylase gene from Bifidobacterium adolescentis Int57. The ${\alpha}$-amylase gene fused to a secretion sequences was expressed under the control of the promoter of amylase gene from B. subtilis var. natto. The recombinant plasmid was maintained stably in the transformants producing the ${\alpha}$-amylase. The enzyme was secreted to outside of the cell and showed the similar enzyme activity as that of Bacillus subtilis BD170 under the same conditions of pH and growth temperature. Because of the relatively easy transformation and the secretion of the enzyme, the transformants of B. polyfermenticus SCD may give a new strategy in the production of foreign genes.
The purpose of this study was to compare the effect of solid-state fermentation on soybean using three microbial strains under four different fermentation times. Soybean was fermented for 12, 24, 36 or 48 hours with highly proteolytic microbes, either Bacillus amyloliquefaciens (BA), B. subtilis (BS), or B. subtilis var. natto (BN), and levels of total protein concentration, protein distribution, and antioxidant activity were analyzed. Total protein was highest in the BS 12 h group (9.21 ㎍·µL-1) and lowest in BN 48 h (6.80 ㎍·µL-1), respectively (p < 0.001). Furthermore, three microbes decomposed large molecular weight proteins as well as major allergens of soybean such as β-conglycinin, Gly m Bd 30K, and glycinin. Each treatment group showed the highest degradation rate at 48 h fermentation and among the three microbes, BS showed a relatively higher degradation rate. The radical scavenging ability, known as an indicator of antioxidant activity, showed a significant increase in all treatment groups except BA 24 h. The results from this study suggest that protein concentration, and degradation and antioxidant activity were affected by different types of microbial trains and fermentation period and that B. subtilis fermentation might be the most effective way to increase nutritional and functional properties of soybean.
Lee Young-Hoon;Lee Sung-Ho;Park Ki-Hoon;Choi Young-Ju;Jeong Yong-Kee;Gal Sang-Wan
Journal of Life Science
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v.16
no.2
s.75
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pp.274-281
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2006
A fibrinolytic enzyme gene was isolated from Bacillus subtilis BB-1 by PCR method. Primers for PCR cloning were designed according to pre-identified gene for fibrinolytic enzymes from B. subtilis. The primer sequences were 5'-CGG ATC CGT GAG AGG CAA AAA GGT G-3' and 5'-TGA ATT CTT AAT GTG CTG CTG CTT GTC C-3' as concensus sequences of the fibrinolytic genes of Bacillus species. The PCR product was 1,145 bp and the sequence homology was 99% with nattokinase gene isolated from Japanese natto. The cloned fibrinolytic gene was reconstructed in Bacillus-E. coli shuttle vector, pEB for bulk-production. The fibrinolytic enzyme was purified by FPLC from the cloned B. subtilis 168. The optimum pH and temperature of the enzyme were 7.0 and $35^{\circ}C$, respectively. The fibrinolytic enzyme did not show any activity toward to skim milk, gelatin, casein and blood agar plate. The enzyme specific polyclonal antibody was prepared in rabbit for further assays such as detection of the gene expression in plant cells. This means that the enzyme may be used for health-care such as thrombosis without any hamful effects in the blood vessel.
Three lots of mejues were prepared with three different strains of Aspergillus oryzae, Bacillus natto, Bacillus subtilis and one was made by conventional method. The four different soy bean pastes were analyzed for compositions of free amino acids, sugars and organic acids during the period of fermentation. Amino nitrogen contents in the samples of A. oryzae were higher than others throughout the aging period. The amounts of each amino acids were varied markedly among the samples after 20-days, while glutamic acid, aspartic acid, lysine and phenylalanine were dominant in all samples after 90-days. Glucose contents were found to be in the range of $0.46{\sim}2.66%$ and other sugars of fructose, sucrose, rhamnose and maltose were less than 0.35%. The levels of total free sugar were relatively higher in the samples prepared with B. natto than others. Citric, lactic, malic, acetic and oxalic acids were identified, and the content of lactic acid was higher in the samples of A. oryzae, whereas citric acid was higher in conventional method.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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