Bacillus sp. $\beta$-mannanase was purified by DEAE-sephadex ion exchange column chromatography. The specific activity of the purified enzyme was 21.57 units/$m\ell$ protein, representing an 95.33-folds purification of the original crude extract. The final preparation thus obtained showed a single band on SDS-polyacrylamide gel electrophoresis. The molecular weight was determined to be 38.9 kDa. Guar gum galactomannan was hydrolyzed by the purified $\beta$-mannanase, and then the hydrolysates was separated by activated carbon column chromatography and Sephadex G-25 gel filtration. The main hydrolysates were composed of D.P. (Degree of Polymerization) 5 and 7 galactomannooligosaccharides. To investigate the effects of guar gum galactomannooligosaccharides on in vitro growth of Bifidobacterium longum, B. bifidum, B. infantis, B. adolescentis, B. animalis, and B. breve, Bifidobacterium spp. were cultivated individually on the modified-MRS medium containing carbon source such as D.P. 5 and D.P. 7 galactomannooligosaccharides, respectively B. longum and B. bifidum grew up l0-fold and 9.8-fold more effectively by the treatment of D.P. 5 galactomannooligosaccharides, compared to those of standard MRS medium. Especially, D.P. 5 was more effective than D.P. 7 galactomannooligosaccharide on the growth of Bifidobacterium spp.
Biological activities (${\alpha},{\alpha}'$-diphenyl-${\beta}$-picrylhydrazyl (DPPH) free radical scavenging activity, fibrinolytic activity and reducing power) and biochemical properties (protein content and electrophoretical protein patterns) were examined in solid state fermentation with Bacillus subtilis and Aspergillus kawachii using silkworm powder (SP) as substrate. The highest protein contents and free radical scavenging activities were seen in the SP fermented for 12 days with B. subtilis and A. kawachii, and these were in a time-dependent manner. The highest reducing power was seen in the SP fermented for 6 days with B. subtilis and for 12 days with A. kawachii, respectively. The highest fibrinolytic activities were seen in silkworm fermented for 6 days with B. subtilis and A. kawachii, but this activity was higher in the A. kawachii fermented SP than that of B. subtilis. When total protein patterns were analyzed by SDS-polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE), the proteins of the SP fermented with B. subtilis for 3 days were completely degraded, while the protein degradation in the SP fermented with A. kawachii occurred after 12 days and this degradation increased proportionally to culture time. As a result, the SP fermented with both B. subtilis and A. kawachii showed higher fibrinolytic activities after 6 days of fermentation and antioxidative activity after 12 days, indicating that physiological activities of the fermented SP using these strains were highly improved compared to the unfermented SP, and that this compound could be a candidate material as a dietary supplement of healthy functional foods.
The evaluation of organic matters and nutrients removal was investigated for the synthetic wastewater and the high strength of dairy wastewater. Two different systems were performed for this research. System A composing of a single RBC with tapered aeration was fed with the synthetic wastewater for 74 days with 173L/day of influent, 200% of internal return and 100% of sludge return for the period 1 and 2. The feed conditions were maintained 346L/day of influent, 50% of internal return and sludge return for the period 3. The dairy wastewater was introduced to evaluate treatment efficiency for system B composing of dual RBCs and tapered aeration tanks for 50 days of experimental run time, in which hydraulic rates were maintained at the constant ratios of 346L/day, 50% of internal return and 50% of sludge return. The spiral string media made of nylon fibre was attached by Bacillus sp. in RBC for both systems. The specific area of string media was $1.4m^2$/m and biomass was maintained at the concentrations of 23g/m. The synthetic wastewater was supplied by 1,800mg/L of glucose, 500mg/L of $NH_4Cl$, and 500mg/L of $KH_2PO_4$ to system A. The dairy wastewater was supplied to system B from dairy production plant. The average influent concentrations were 1,334mg/L of BOD, 2,014mg/L of CODcr, 160mg/L of T-N, and 12mg/L of T-P in system A. The average influent concentrations of parameters were 1,006 mg/L for BOD, 1,875mg/L for $COD_{cr}$, 51.6mg/L for T-N and 8.9mg/L for T-P in system B. Results indicated that removal efficiencies of BOD and $COD_{cr}$ were more than 90% however, the removal efficiency of T-N was 87%, and that of T-P was 82% for system A. Removal efficiencies were 98.5% of BOD, 91.3% of nitrogen and 89% of phosphorus for system B. The removal efficiencies of organic matters, T-N and T-P were higher in system B than in system A. The effluent quality issued by the stringent national legislations for the discharge of the high strength of dairy products wastewater can be improved using sequential RBCsand tapered aeration reactors rather than a single RBC and tapered aeration reactors with Bacillus sp.
In this study, the siderophore-producing characteristics and conditions of Bacillus sp. PZ-1 were investigated and the enhancement of siderophores on Pb uptake and translocation in Brassica juncea were determined. Results of single factor experiment showed that glucose, pH, and $Pb(NO_3)_2$ could stimulate PZ-1 growth and siderophore production. The maximum siderophore production of 90.52% siderophore units was obtained by response surface methodology optimization at the glucose concentration of 21.84 g/l, pH 6.18, and $Pb(NO_3)_2$ concentration of $245.04{\mu}mol/l$. The type of siderophore was hydroxamate and its concentration in the fermentation broth amounted to $32.24{\mu}g/ml$. Results of pot experiments indicated that the siderophores enhanced B. juncea to assimilate more Pb from soil with the uptake ratio from 1.04 to 2.74, and to translocate more Pb from underground to overground with the TF values from 1.21 to 1.48. The results revealed that Bacillus sp. PZ-1 could produce abundant siderophores and might be potentially used to augment the phytoextraction of Pb from soil.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.35
no.1
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pp.115-120
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2006
To convert the soybean curd residue (SCR) to functional food ingredient, alkaline fermentation of SCR was performed by Bacillus firmus NA-1 and Bacillus subtilis GT-D for 22 hr at $42^{\circ}C$. The micronized full-fat soy flour (MFS) was fortified to reduce the moisture content as well as to supply protein source. The mucilage and flavor productions in the fermented SCR were enhanced by the fortification of $20\%$ MFS. The peptide production from the SCR fermented with B. subtilis GT-D substantially increased when judged by the detectable amount of tyrosine $(480\;mg\%)$. The production of fibrinolytic enzyme was increased by the fermentation for 22 hr, indicating the relative activity of $62\%$ (B. firmus NA-1) and $47\%$ (B. subtilis GT-D), respectively. The SCR fermented by B. firmus NA-1 and B. subtilis GT-D indicated the consistency of $1.95\;Pa{\cdot}s^n\;and\;0.21\;Pa{\cdot}s^n$, respectively. After freeze-drying, the protease activity (615 unit/g) and a-amylase activity (180 unit/g) were obtained from SCR fermented by Bacillus firmus NA-1 and Bacillus subtilis GT-D, respectively.
Kim, Young-Rim;Cho, Min-Su;Oh, Se-Mun;Kim, Sung-Woo;Youn, Young-Nam;Yu, Yong-Man
The Korean Journal of Pesticide Science
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v.14
no.2
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pp.123-132
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2010
Six populations of the diamondback moth, Plutella xylostella, were collected from the different national areas for resistance and reared in laboratory for two sensitive population. These populations of P. xylostella were examined the developed resistance against commercial products of Bacillus thuringiensis. There were 3 products with B. thuringiensis subsp. kurstaki including Tyuneup$^{(R)}$, Thuricide$^{(R)}$ and Geumulmang$^{(R)}$ and 2 products with B. thuringiensis subsp. aizawai including Tobagi$^{(R)}$ and Scorpion$^{(R)}$. The sensitive population of diamondback moths were provided from National Academy of Agricultural Science (NP) and Highland Agriculture Research Center (GR population) and field populations were caught from 6 different national areas. Resistance against Tyuneup$^{(R)}$ was developed 4.8 and 2.5 times in SP and HS compared with GR population of diamondback moth, respectively. In case of Geumulmang$^{(R)}$, it was developed 9.9 and 6.8 times in SP and NM population compared with NP population, respectively. Otherwise, Tobagi$^{(R)}$ was showed higher resistance in HS than any other population compared with GR population, however, Scorpion$^{(R)}$ that is a same strain with Tobagi$^{(R)}$, was showed only double resistance to SP population. It was supposed that the development of resistance to B. thuringiensis might be caused by the continuous application of the specific commercial product at the specific area. So, we need to use the commercial products of B. thuringiensis in rotation with different B. thuringiensis strains. In the other hand, when HS population with highest resistance were reared in laboratory, their resistance ratio was rapidly dropped to 1.1 times at second generation. We have to examined the resistance mechanism of the diamondback moth to B. thuringiensis strains.
Cellulase genes from thermophilic alkalophilic Bacillus sp. F204 a potent cellulase complex-producing bacterium, were cloned in Escherichia coli with pUC 19. Plasmids pBC191 and pBC192, isolated from transformants forming yellow zone around colony on the LB agar plate containing 0.5% carboxymethyl cellulose and ampicillin, contained 4.6 Kb and 5.8 Kb HindIII fragments, respectively. The 4.6 Kb insert of pBC191 had single sites for BamHI EcoRI, KpnI and pvuII. DNA hybridization and immunodiffusion studies showed that pBC191-encoded cellulase gene was homologous with that of host strain. pKC231, constructed by inserting 4.6 Kb insert of pBC191 at the HindIII site of pKK223-3, E. coli expression vector, and pGC711, constructed by inserting 4.6 Kb insert of pBC191 at the HindIII site of pGR71, E. coli and B. subtilis shuttle vector, had 3.2 times and 2.8 times as much cellulase activity as pBC191, respectively. Substrate specificity analysis showed that cellulases cloned were CMCase.
Kim, Kyoung-Yun;Koo, Bong-Seong;Jo, Do-Hyun;Kim, Su-Il
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.14
no.2
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pp.344-349
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2004
A gene encoding inulin-degrading enzyme of Bacillus sp. snu-7 with ORF of 1536 nucleotides was cloned. And it was overexpressed as His-tagged protein in E. coli BL21(DE3) pLysS using pRSET B vector containing mature enzyme sequence. Maximum enzyme production was achieved by IPTG (0.1 mM) induction at $OD_{600}$ 1.2 and $30^{\circ}C$ followed by 6 h incubation. The expressed protein purified through immobilized metal affinity chromatography showed molecular mass of 60 kDa on SDS-PAGE. Results of thin-layer chromatography using inulin as a substrate showed the enzyme to be an exotype inulinase capable of producing only monomeric fructose as a product. $K_m$ and $k_{cat}$, for the hydrolyses of inulin and sucrose were $2.28\pm0.08$ mM and 358.05$\pm$20.38 $min^{-l}$, and 22.02$\pm$0.41 mM and 4619.11$\pm$215.12 $$min^{-1}, respectively. Optimal activity of the exoinulinase occurred at pH 7.0 and $50^{\circ}C$.
The bacteria were isolated from ordinary Korean soy sauce and soybean Paste. After isolation, we investigated the bacteria which produces the characteristic flavor of ordinary Korean soy sauce and soybean paste, nothing the aroma, presence of amino acids, and free sugars. The results were obtained as follows. The bacteria isolated from ordinary Korean soy sauce and soybean paste were various Bacillus species. The isolated bacteria produced characteristic orders: 'Meju' order, the characteristic saline odor of ordinary Korean soy sauce or ordinary Korean soybean paste order, and enzymes: protease and amylase. The good characteristic saline odor of ordinary Korean soy sauce was produced by Bacillus licheniformis$(SSB_3)$. The good odor of ordinary Korean soybean paste was produced by Bacillus polymyxa$(SSB_4)$, Bacillus species$(SPB_1)$, Bacillus brevis$(SPC_2)$, and Bacillus lichniformis$(SPC_{2-1})$.
A strain of alkalophilic Bacillus sp. YS-309 has been isolated from domestic soil. It belongs to genus Bacillus from its morphological and biochemical characteristics. The strain grows better in the alkaline media rather than in the neutral media. The optimum pH and temperature for growth were observed at 8.5 and 4$0^{\circ}C$, respectively. Glucose, lactose and maltose were appeared as good carbon source but soluble starch and fructose were utilized uneffectively for growth. Concentrations of lactose had affected both the cellular growth and the enzyme productions. The maximum growth and the highest enzyme productions were obtained at 0.5%(w/e) of lactose added in the media. B-Galactosidase from Bacillus sp. YS-309 was produced inducibly into the cell and total enzyme activities per ml were gradually decreased when the concentration of glucose increased.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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