The effect of Bacillus subtilis natto on hindgut fermentation and microbiota of early lactation Holstein dairy cows was investigated in this study. Thirty-six Holstein dairy cows in early lactation were randomly allocated to three groups: no B. subtilis natto as the control group, B. subtilis natto with $0.5{\times}10^{11}cfu$ as DMF1 group and B. subtilis natto with $1.0{\times}10^{11}cfu$ as DMF2 group. After 14 days of adaptation period, the formal experiment was started and lasted for 63 days. Fecal samples were collected directly from the rectum of each animal on the morning at the end of eighth week and placed into sterile plastic bags. The pH, $NH_3$-N and VFA concentration were determined and fecal bacteria DNA was extracted and analyzed by DGGE. The results showed that the addition of B. subtilus natto at either treatment level resulted in a decrease in fecal $NH_3$-N concentration but had no effect on fecal pH and VFA. The DGGE profile revealed that B. subtilis natto affected the population of fecal bacteria. The diversity index of Shannon-Wiener in DFM1 decreased significantly compared to the control. Fecal Alistipes sp., Clostridium sp., Roseospira sp., beta proteobacterium were decreased and Bifidobacterium was increased after supplementing with B. subtilis natto. This study demonstrated that B. subtilis natto had a tendency to change fecal microbiota balance.
${\beta}$-Xylosidase was purified from the recombinant Escherichia coli carrying the Bacillus sp. KK-1 ${\beta}$-xylosidase gene (xylB). The molecular mass of the purified enzyme was estimated to be 62 kDa by sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis. However, the apparent molecular mass of the ${\beta}$-xylosidase was 140 kDa, indicating that the native ${\beta}$-xylosidase has an oligomeric structure composed of two identical subunits. The isoelectric point was determined to be pH 5.5. The enzyme was highly active on p-nitrophenyl-$\beta$-D-xylopyranoside but it barely hydrolyzed xylan substrates, and did not exhibit activity towards carboxymethylcellulose and p-nitrophenyl-${\beta}$-D- glucopyranoside. The enzyme had a pH optimum for its activity at pH 6.5 and a temperature optimum at $40^{\circ}C$. The enzyme activity was completely inhibited by the presence of $Hg^{++}$, and also markedly inhibited by D-xylose and D-glucose.
Kim, Soeng-Hyuck;Choi, Jong-Soo;Chung, Kap-Taek;Yoo, Young-Soo;Jung, Dong-Sun;Park, Kwan-Hwa
Korean Journal of Food Science and Technology
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v.26
no.1
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pp.6-11
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1994
A cyclodextrin glucanotransferase(CGTase)-producing Bacillus sp. I-5 was isolated from soil and the enzyme exhibited the maximum reaction rate at pH 8.0 and $50^{\circ}C$. It was found that CGTase of I-5 produced ${\beta}-$ and ${\gamma}-CD$ mainly but the production ratio of cyclodextrins (CDs) was influenced by the buffer solution. Sodium acetate significantly stimulated the formation of ${\gamma}-CD$, increasing the content by 35%. The production of CDs was influenced by DE value of starch. The results indicated that DE value in the range of $3.5{\sim}6.0$ were most effective for the CD formation. CGTase was immobilized on the reversibly soluble-insoluble carrier, hydroxypropyl mothylcellulose acetate succinate. The immobilized CGTase was soluble at pH 7.5, and precipitated easily at pH 6.0. Enzyme reactor was designed to produce CD continuously. It was composed of three major stages-CD produttion by immobilized CGTase, conversion of the residual dextrin to glucose by amylase and glucoamylase and alcohol fermentation by yeasts to remove the glucose into alcohol. The yield of total CDs was 3.65g from 10g soluble starch.
To develop an effective biopesticide to control pepper anthracnose disease, an isolate which showed strong inhibitory effect on the mycelial growth and conidial germination of Colletotrichum acutatum was selected among the antagonistic bacterial isolates collected from pepper grown soil. The bacterial isolate was identified as Bacillus sp. KBC1004 using 16S rRNA sequence analysis. The liquid culture of KBC1004 was freeze-dried and formulated as a wettable powder(WP). The wettable powder form of KBC1004 required at least 24 hours to activate and to inhibit the conidial germination of C. acutatum. In vitro bioassay using the detached green pepper fruits, biocontrol activity of the WP was not recognizable in simultaneous inoculation, but significant disease suppression was observed pre-treatment (24 hr) of the WP before pathogen inoculation. In field experiment, 4 times foliar applications of the 1/500 diluted wettable powder from the end of June showed great control efficacy similar to that of the chemical fungicide application. These results suggest that the formulated WP product could be an alternative mean to control of pepper anthracnose disease in environmentally friendly farming practices.
Park, Sang-Ho;Lim, Jae-Dong;Park, Sung-Jeng;Kim, In-Soo
Proceedings of KOSOMES biannual meeting
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2007.05a
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pp.91-96
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2007
Lab scale experimental study was carried out for SBR process, to investigate the effects of influent ship sewage organic compound removal and Bacillus sp. state on design parameters. This process was able to remove nitrogen and phosphorus as well as organic matter efficiently. More than 95% of chemical oxygen demand(COD) were removed. In addition, about 97% of total nitrogen (T-N) was reduced. The total phosphorus(T-P) reduction averaged 93%. The performance load of SBR process was shown to be $0.095kg{\cdot}TOC/m^3{\cdot}day$. The pH was decreased from 8.1 to 7.0 within 30 min and increased to 7.3 at the end of anoxic stage, and these phenomena were explained. The sludge produced in the SBR process is characterized by low generation rate (about $0.36kg{\cdot}MLSS/kg{\cdot}TOC$) and excellent settleability. The number of Bacillus sp. in the SBR was 24.2%, indicating that Bacillus sp. was a predominant species in the reactor.
Biopolymer from alkaline-tolerant Bacillus so. was purified, and its physico-chemical and structural properties were investigated. Crude biopolymer, precipitated by acetone from culture broth was fractionated into two fractions by gel chromatography on Sephadex G-200. Among two fractions, one fraction(PS I), which an acidic biopolymer precipitated by the CPC(cetylpyridinium chloride) treatment was studied further. PS I fraction had carboxyl groups and was positive at color reaction of sugar. PS I fraction also showed UV absorbance at 190-225nm. The purified acidic biopolymer was composed of 4% glucose, 8% glucosamine and 88% glutamic acid. Sugar components of the purified acidic biopolymer seemed to be linked to PGA(polyglutamic acid) which existed in the from of ${\gamma}$-peptide bond. By the results of Smith degradation of sugar components, glucose and glucosamine was bound by 1,3 glocosidic linkage. Therefore, this biopolymer was a glycopeptide, oligosaccaride ${\gamma}$-PGA. We concluded that the equivalent weight and the molecular weight of this biopolymer were estimated as about 171 and 5x105 dalton, respectively.
Some bacterial strains isolated from activated sludges and media and type cultures were cultivated in a pharmaceutical wastewater and a paperboard wastewater and added during batch treatment of those wastewaters in order for these strains to increase the treatment efficiency. Bacillus sp(PC-3) isolated from the charcoal media of the pharmaceutical wastewater plant grew remarkably over there strains in that wastewater and the viable cell count after 24hr cultivation was $1.1{\times}10^6m/L$. Bacillus subtills KCTC 1028 a type strain grew best in the paperboard wastewater and the viable cell count after 24hr cultivation was $1.1{\times}10^7m/L$. Addition of PC-3 in a batch treatment of the pharmaceutical wastewater increased COD removal by 18% after 8 day. And addition of Bacillus subtills KCTC 1028 in a batch treatment of the paperboard wastewater increased COD removal by 14% only after 24hy Bacillus subtills DCTC 1028 was though to be able to be produced economically using alcohol distillery wastewaters from starch material.
Seo, Sam-Yeol;Ahn, Haet-Nim;Eom, Seong-Hyeon;Im, Eun-Yeong;Park, Ji-Young;Kim, Yong-Gyun
Korean journal of applied entomology
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v.51
no.1
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pp.39-45
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2012
The entomopathogenic bacterium, $Xenorhabdus$ sp., was isolated from an entomopathogenic nematode, $Steinernema$$monticolum$. When these bacteria were injected into the hemocoel of the diamondback moth, $Plutella$$xylostella$, they caused significant mortality. However, the bacterium was not pathogenic when it was administered orally. This study showed that $Xenorhabdus$ sp. significantly enhanced oral pathogenicity of $Bacillus$$thuringiensis$ (Bt) against the last instar larvae of $P.$$xylostella$. Different ratios of culture broth of $Xenorhabdus$ sp. and Bt showed significantly different pathogenicities against $P.$$xylostella$. In field tests, the optimal bacterial mixture significantly enhanced control efficacy against $P.$$xylostella$ compared to Bt treatment alone. These results demonstrated that $Xenorhabdus$ sp. culture broth can be developed as a potent biopesticide by enhancing the insecticidal efficacy of Bt.
For the elucidation of substrate specificity to the brown copra meal by Bacillus sp. ${\beta}-mannanase.$, the enzymatic hydrolysate after 24 hr of reaction was heated in a boiling water bath for 10 min, and then centrifuged to remove the insoluble materials from hydrolysates. The major hydrolysates composed of D.P 5 and 7 galactosyl mannooligosaccharides. For the separate of galactosyl mannooligosaccharides, the supernatant solution of 150 ml was put on a first activated carbon column. The column was then washed with 5 l of water to remove mannose and salts. The oligosaccharides in the column were eluted by a liner gradient of $0{\sim}30%$ ethanol, at the flow rate of 250 ml per hour. The sugar composition in each fraction tubes was examined by TLC and FACE analysis. The combined fraction from F3 was concentrated to 30 ml by vacuum evaporator. Then put on a second activated carbon column. The oligosaccharides in the column were eluted by a liner gradient of $0{\sim}30%$ ethanol (total volume: 5 l), at the flow rate of 250 ml per hour. The eluent was collected in 8 ml fraction tubes, and the total sugar concentration was measured by method of phenol-sulfuric acid. The major component of F2 separated by 2nd activated carbon column chromatography were identified $Gal^3Man_4(6^3-mono-{\alpha}-D-galactopyranosyl-{\beta}-mannotetraose)$. To investigate the effects of brown copra meal galactomannooligosaccharides on growth of Bifidobacterium longum, B. bifidum were cultivated individually on the modified-MRS medium containing carbon source such as $Gal^3Man_4$, compared to those of standard MRS medium.
Streptococcus sp. TR-1 which has inducible resistance to MLS antibiotics was isolated from soil samples in Korea. Streptococcus sp. TR-1 was cultured in Lysis broth, then a plasmid was isolated by modified Elliker method. Bacillus subtilis UOTO277 was transformed with that plasmid. This result showed that the plasmid has the gene relating with inducible resistance to MLS antibiotics. It was named pMB4 and its size was determined about 2.4 Kb by results of digestion with various restriction enzymes. Restriction endonuclease cleavage site map of pMB4 plasmid was made by double digestion of the plasmid. pMB4 plasmid has different restriction endonuclease site map from the other plasmids that have been discovered in Streptococcus sp. so far. And it could be identified that pMB4 plasmid does not have homology with ermK of Bacillus licheniformis EMR but has homology with ermC of Staphylococcus aureus from the results of Southern hybridization.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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