For the screening of new-functional and specific exopolysaccharide, a bacterium strain was isolated from soil through the two steps of screening. The isolated bacterium was identified as Bacillus polymyxa KS-1 according to the criteria of morphological, physiological, and chemical taxonomic analyses. The exopolysaccharide was composed of glucose:galactose: mannose and galactosamine in an approximate molar ratio of 1.00:0.36:1.02:1.10. The produced exopolysaccharide by Bacillus polymyxa KS-1 was found to be revealed new acidic polysaccharide which did not contain pentose, ketose, starch, and uronic acid.
The strain YL 38-3, which was capable of producing extracellular cytosine deaminase, was isolated and taxonomically examined. The isolated strain was identified to be Bacillus polymyxa YL 38-3. The optimal conditions for the enzyme production from Bacillus polymyxa YL 38-3 were investigated. The enzyme production was reached maximum level in the medium containing 0.5% glucose, 0.2% beef extract, 0.5% NaCl and 0.1% $KH_{2}PO_{4}$ (pH 6.0). And the enzyme showed the highest activity when the strain YL 38-3 was cultivated at $35^{\circ}C$ for 24 gours under the initial pH 6.0. By the additions of peptone the extracellular enzyme production was inhibited, meanwhile the intracellular enzyme production was highly stimulated. It was, therefore, deduced that peptone was related to the secretion mechanism of the enzyme from this bacterial cell.
The availability of Bacillus polimyxa 'HB 26-5' as a biological control agent was investigated. The antagonistic bacteria Bacillus polymyxa 'HB 26-5' grew well on the media at pH 7.0 and the optimum growth temperature was $25^{\circ}C$. The pH of the media changed to weak acid(pH 6.1~6.5) at the beginning of incubation, but to weak alkali(pH 7.8~8.2) at 7days after incubation. The best carrier to enhance colonization of the bacteria were the mixture of rice bran and peat, or rice bran and kaoline, in those formulation the density of the bacteria was changed slightly, though the density was beginning to decrease 3 weeks after application at field. In view of the physical characteristics of the formulation for the density maintenance during storage such as the hardness and the size, the best one was the formulation consisted of sodium alginate 2%, kaolin 15% and rice bran 3%.
To improve the quality of rice-cake(Cholpyon), raw starch saccharifying (${\beta}-amylase$ from Bacillus polymyxa No. 26 was used in process of raw rice-cake production. 30g of raw rice flour was incubated with $0{\sim}1,200$ RS units of the enzyme for 5 hr at $45^{\circ}C$, and then steamed and stored for 40 hr at $4^{\circ}C$. In instrumental analysis, control group, which was incubated without addition of (${\beta}-amylase$, was completely hardened after incubation for $12{\sim}24$ hr at $4^{\circ}C$. In contrast, enzyme-treated group was not retrograded, and showed a great differences in hardness, cohesiveness and chewiness. On the other hand, in sensory analysis, the effect of the enzyme treatment was higher values of hardness, moistness, and sweetness than these of control group. Therefore, these results clearly suggested that ${\beta}-amylase$ was fully active to degrade raw rice starch in process of rice-cake production, resulting in improvement of starch retrogradation, good digestibility, and taste.
Kim, Byoung-Woo;Park, Jung-Ha;Kim, Eun-Young;Kim, Kwang-Hyoun;Kwon, Hyoun-Ju
한국생물공학회:학술대회논문집
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2003.10a
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pp.586-589
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2003
Previously we reported the cloning and sequence analysis of a CFTase gene from Bacillus polymyxa. CFTase was divided into five distinct regions. In order to understand a role of the N-terminal repeat region on the function of CFTase from Bacillus polymyxa MGL21, deletion mutantCFTase ${\Delta}N$ was prepered. Recombinant protein was overproduced in E. coli as inclusion body, solubilized in bufer containing 8M urea, and refolded in the phosphate buffer. The molecular weight of the purified wild type CFTase and CFTase ${\Delta}N$ were 148kDa , 108kDa, respectively.
SOHN, CHEON-BAE;MYUNG-HEE KIM;JUNG-SURL, BAE;CHEORL-HO KIM
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.2
no.3
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pp.183-188
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1992
A soil bacterium which produces raw starch-digesting $\beta$-amylase in culture medium, has been screened from soils. One strain, isolated and identified as Bacillus polymyxa No. 26, was selected as a $\beta$-amylase producing bacterium. Morphological and biological characteristics of the strain were found to be similar to those of a strain belonging to B. polymyxa. The electron microscopic observations of the bacterial vegetative cells and sporulated cells were extensively done to know the corelation between the enzyme synthesis and sporulation. When the bacterium was cultured on the appropriate media (3% dextrin, 0.3% beef extract, 0.5% polypeptone, 1% yeast extract and 0.3% NaCl at pH 7.0 for 4 days) raw starch-digestible $\beta$-amylase was produced extracellularly. This strain produced 130 units of $\beta$-amylase per ml in a culture medium containing 3% dextrin at $30^\circ{C}$. This value is compared to those of other $\beta$-amylase-producing strains. The optimum pH and temperature for crude enzymes were pH 6.5 to 7.0 and $50^\circ{C}$, respectively. The enzymes were stable between pH 5.5 and 9.0 for 30 min at $45^\circ{C}$.
This study was carried out to isolate soil bacteria with antimicrobial activity and evaluate antimicrobial substances produced by isolated bacteria. Among many isolates Bacillus subtilis DS660 and Paenibacillus polymyxa DS842 showed high antimicrobial activities against 6 species of microbial residents on human skin and 3 species of pathogenic bacteria. DS660 and DS842 showed 15.3~26.8 and 11.3~27.5 mm of inhibition zone diameter, respectively on nutrient agar medium against most target bacteria and fungi. DS660 and DS842 produced $57{\pm}8$ and $170{\pm}15{\mu}mol/ml$ of siderophore, respectively as an antimicrobial substance. Analysis of ethyl acetate extract of culture supernatants of DS660 and DS842 suggested production of glycolipid biosurfactant which reduced surface tension of culture supernatant of DS660 and DS842 from 60.0 to 40.3 and 30.3 mN/m, respectively. DS660 and DS842 also showed $169.2{\pm}9.9$ and $357.2{\pm}13.7nmol/min/mg$ protein of ${\beta}-1,3$-glucanase activity, respectively, and hydrolyzed cell wall components of 3 bacterial species. These results suggest that B. subtilis DS660 and P. polymyxa DS842 may be utilized as an environment-friendly biocontrol agent against some skin microbes and pathogenic bacteria.
Sequence analysis indicated that Bacillus polymyxa MGL21 CFTase was divided into five distinct regions. CFTase contained three regions of repeat sequences at the N-terminus and C-terminus. The endo-inulinase region of homology (ERH) of CFTase was similar to that of Pseudomonas mucidolens endo-inulinase. Furthemore, CFTase possessed a highly conserved core region. In order to understand the role of the core region on the function of CFTase from B. polymyxa MGL21 CFTase ${\Delta}NC$ was prepared. The molecular weight of the purified wild type CFTase and $CFTase{\Delta}NC$ were 148kDa, 90kDa, respectively.
Optimized fermentation medium and cultural conditions for the production or exopolysaccharide KS-1 with Bacillus polymyxa KS-1 was following as; 30g g1ucose, 2.59g yeast extract, $2.5g KH_2PO_4, 0.5g NaCl, 0.3g MgSO_4.7H_20, 0.1g CaC0_3 0.05g, FeSO_4.7H_2O, and 0.05g MnS0_4 . 4H_20in 1 liter distilled water. The exopolysaccharide production was influenced by the by the temperature and pH, the optimal conditions for the production of exopolysaccharide KS-1 seemed to be $30^{\circ}C$ and pH 7.0, respectively. About $10.3g/\ell$ of maximum exopolysaccharide was obtained al the initial pH 7.0, $30^{\circ}C$, 2vvm of aeration rate and 400 rpm of impeller speed in a jar fermentor.
Sixteen isolates showing relatively strong antagonicity against the ginger rhizome rot pathogen, Pythium zingiberum, were selected among the 155 isolates from ginger rhizome surfaces and rhizospheres of ginger cultivation fields in Wanju, Chonbuk. The isolate, 'HB 26-5'showing the strongest antagonicity was finally selected by testing duration of inhibition effect and pathogenicity to ginger. The isolated antagonistic microorganism, 'HB 26-5' was rod shape, gram positive and formed endospore. The isolate produced acids utilizing glucose, arabinose, xylose and mannitol, and acetoin at VP test, and grew anaerobically. Temperature range for growth was from 10 to 4$0^{\circ}C$ . Reaction to catalase and gelatin, hydrolysis were positive, and casein hydrolysis and indol production were negative. Based on the mycological characters and the fatty acid composition, it was identified as Bacillus polymyxa. The pathogenicity test of isolated Bacillus polymyxa 'HB 26-5'on 22 crop cultivars resulted that only the lettuce was influenced in germination, and the others were not affected.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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