Kim, Na-Kyeong;Lee, Hyo-Jeong;Kim, Sang-Min;Jeong, Rae-Dong
Research in Plant Disease
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v.28
no.1
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pp.32-38
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2022
A survey of Barley yellow dwarf virus (BYDV) was conducted in major oat-growing areas of Korea in 2020. BYDV is an economically important pathogen of cereal crops that can be transmitted by aphids. The present study evaluated the genetic composition of BYDV in oat from eight geographical areas in Korea. Multiplex reverse transcription-polymerase chain reaction was used to screen 322 oat leaf samples for six BYDV strains (PAV, MAV, SGV, PAS, RPV, and RMV). The 125 samples (~39%) tested positive for BYDV. BYDV-PAV, BYDV-SGV, BYDV-PAS, and BYDV-RPV were detected from oat in different areas. Most of the BYDV-infected samples were assigned to subgroup I (n=112). The results indicate that BYDV-PAV could be dominant throughout Korea. Also, the phylogenetic analysis of coat protein sequences indicated that 23 BYDV isolates from Korea could be separated into two clades, which exhibited high nucleotide sequence similarity. In conclusion, the present survey provides a BYDV infection assessment for domestic oat varieties in Korea and basic information for the development of BYDV control measures in Korea's oat industry.
Barley Yellow Dwarf Virus (BYDV) has been a major disease causing a severe loss of yield in winter cereals worldwide. It has been recently reported that BYDV occurs frequently in wheat field and also causes serious yield reduction in Korea. This study was performed to investigate the regional distributions of BYDV strains in Korea and to identify the resistant cultivars or lines of wheat to the predominant BYDV strains, providing basic information for the breeding of BYDV-resistant wheat varieties. Using RT-PCR and EcoRI digestion methods, the regional distribution of BYDV strains in Korea from 1999 to 2000 showed that PAV strain was mainly detected about 65% (Vic-PAV 52.6% ; CN-PAV 47.4%) and MAV strain about 3%. Using ELISA test for the examination of BYDV resistance with 17 cultivars and 4 lines among Korean wheat, three cultivars, Gurumil, Topdongmil, and Olgurumil, were susceptible to BYDV and the others were resistant. In plant growth and yield component responses to BYDV infection, Gurumil showed significant difference between the uninfected and the infected, suggesting the most susceptible to BYDV among Korean wheat, but Eun-pamil and Seohae118 did no difference, an indication that they have the highest resistance.
Barley Yellow Dwarf Virus (BYDV), an aphid-borne luteovirus, is a major plant pathogenic disease causing a huge economic loss in the grain production of a wide range of Gramineae species throughout the world. It has been recently reported that BYDV also occurred frequently in wheat field of Korea. Here, we performed to develop the detection and classification methods of BYDV strains that were accomplished by reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR). Since there are high variations among BYDV strains, three pairs of primers were designed to detect BYDV strains such as PAV (Vic-PAV and CN-PAV) and MAV (primer A) simultaneously, specifically Vic-PAV(primer B), and MAV (primer C) based on the genomic RNA sequences of BYDV strains previously published. The validity of the primers was confirmed using several BYDV strains obtained from CIMMYT. Though three BYDV strains were able to be detected using primer A, PCR products were not distinguished between two PAV strains. It was possible to separate them with a restriction enzyme, EcoRI, whose restriction site was present in the amplified DNA fragment from Vic-PAV, but not from CN-PAV.
Barley yellow dwarf virus PAV (BYDV-PAV) has a 5.7-kb positive-sense single-stranded RNA genome that contains six open reading frames (ORFs). BYDV-PAV produces three subgenomic RNAs (sgRNAs). The largest of which encodes the coat, 17-kDa, and readthrough proteins from two initiation codons. To investigate the role of intergenic and 3'-proximal noncoding regions (NCRs) in coat protein (CP) expression and BYDV-PAV replication, a full-length infectious cDNA of the RNA genome of an Illinois isolate of BYDV-PAV was constructed downstream of the Cauliflower mosaic virus-35S promoter. Linear DNA molecules of these cDNAs were infectious, expressed the 22-kDa CP, and produced both genomic RNA sgRNAs in ratios similar to those observed in protoplasts inoculated with viral RNA. The portion of 5'NCR of sgRNA1 between ORFs 2 and 3 was not required for, but enhanced translation of CP from ORF3. Mutants containing deletions in the NCR downstream of ORF5 failed to replicate in oat protoplasts. These results indicate that an intact 3$^1$NCR is required for BYDV-PAV replication.
Kim, Na-Kyeong;Lee, Hyo-Jeong;Kim, Sang-Min;Jeong, Rae-Dong
The Plant Pathology Journal
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v.38
no.2
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pp.159-166
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2022
Barley yellow dwarf virus (BYDV) has been a major viral pathogen causing significant losses of cereal crops including oats worldwide. It spreads naturally through aphids, and a rapid, specific, and reliable diagnostic method is imperative for disease monitoring and management. Here, we established a rapid and reliable method for isothermal reverse transcription recombinase polymerase amplification (RT-RPA) combined with a lateral flow strips (LFS) assay for the detection of BYDV-infected oat samples based on the conserved sequences of the BYDV coat protein gene. Specific primers and a probe for RT-RPA reacted and optimally incubated at 42℃ for 10 min, and the end-labeled amplification products were visualized on LFS within 10 min. The RT-RPA-LFS assay showed no cross-reactivity with other major cereal viruses, including barley mild mosaic virus, barley yellow mosaic virus, and rice black streaked dwarf virus, indicating high specificity of the assay. The sensitivity of the RT-RPA-LFS assay was similar to that of reverse transcription polymerase chain reaction, and it was successfully validated to detect BYDV in oat samples from six different regions and in individual aphids. These results confirm the outstanding potential of the RT-RPA-LFS assay for rapid detection of BYDV.
Ju, Jiwon;Kim, Kangmin;Lee, Kui-Jae;Lee, Wang Hu;Ju, Ho-Jong
The Plant Pathology Journal
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v.33
no.1
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pp.53-65
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2017
Barley yellow dwarf virus (BYDV) belongs to Luteovirus and is limited only at phloem related tissues. An open reading frame (ORF) 4 of BYDV codes for the movement protein (MP) of BYDV gating plasmodesmata (PD) to facilitate virus movement. Like other Luteoviruses, ORF 4 of BYDV is embedded in the ORF3 but expressed from the different reading frame in leaky scanning manner. Although MP is a very important protein for systemic infection of BYDV, there was a little information. In this study, MP was characterized in terms of subcellular localization and programmed cell death (PCD). Gene of MP or its mutant (ΔMP) was expressed by Agroinfiltration method. MP was clearly localized at the nucleus and the PD, but ΔMP which was deleted distal N-terminus of MP showed no localization to PD exhibited the different target with original MP. In addition to PD localization, MP appeared associated with small granules in cytoplasm whereas ΔMP did not. MP associated with PD and small granules induced PCD, but ΔMP showed no association with PD and small granules did not exhibit PCD. Based on this study, the distal N-terminal region within MP is seemingly responsible for the localization of PD and the induction small granules and PCD induction. These results suggest that subcellular localization of BYDV MP may modulate the PCD in Nicotiana benthamiana.
Barley yellow dwarf virus (BYDV) is an economically important plant pathogen that causes stunted growth, delayed heading, leaf yellowing, and purple leaf tip, thereby reducing the yields of cereal crops worldwide. In the present study, a reverse transcription recombinase polymerase amplification (RT-RPA) assay was developed for the detection of BYDV in oat leaf samples. The RT-RPA assay involved incubation at an isothermal temperature (42℃) and could be performed rapidly in 5 min. In addition, no cross-reactivity was observed to occur with other cereal-infecting viruses, and the method was 100 times more sensitive than conventional reverse transcription polymerase chain reaction. Furthermore, the assay was validated for the detection of BYDV in both field-collected oat leaves and viruliferous aphids. Thus, the RT-RPA assay developed in the present study represents a simple, rapid, sensitive, and reliable method for detecting BYDV in oats.
Lee, Bong-Choon;Bae, Ju-Young;Kim, Sang-Min;Ra, Ji-Eun;Choi, Nak Jung;Choi, Man Young;Park, Ki Do
Research in Plant Disease
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v.23
no.4
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pp.363-366
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2017
Barley mild mosaic virus (BaMMV), Barley yellow mosaic virus (BaYMV) and Barley yellow dwarf virus (BYDV) have been identified as an important causative agents for an economically important disease of winter barley in Korea. In this study, a multiplex reverse transcription polymerase chain reaction (mRT-PCR) method was used for the simultaneous detection. Three sets of virus-specific primers targeted to the capsid protein coding genes of BaMMV, BaYMV and BYDV were used to amplify fragments that were 594 bp, 461 bp, and 290 bp, respectively. Several sets of primers for each target virus were evaluated for their sensitivity and specificity by multiplex RT-PCR. The optimum primer concentrations and RT-PCR conditions were determined for the multiplex RT-PCR. The mRT-PCR assay was found to be a better and rapid virus diagnostic tool of specific barley diseases and potential for investigating the epidemiology of these viral diseases.
Park, Jong-Chul;Seo, Jae-Hwan;Choi, Min-Kyung;Lee, Kui-Jae;Kim, Hyung-Moo
Research in Plant Disease
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v.10
no.3
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pp.188-193
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2004
The symptom expressions such as yellowish and mosaic spots in overwintering barley have been considered to be a damage by cold or water. However, it had revealed that the symptom expressions were caused by viruses throughout three year nationwide surveys. Barley yellow mosaic virus (BaYMV), Barley mild mosaic virus (BaMMV), and Soil-borne wheat mosaic virus (SBWMV) was detected in 2001-2003 and Barley yellow dwarf virus-MA V (BYDV -MA V) from field samples collected on March in 2003. The results of investigation showed that the incidence of BaYMV was more than 70% and that of BaMMV and SBWMV was 15.7-37.4% and 0.7-10.1 % in three year surveys, respectively. The incidence of BYDV-MAV was approximately 1 % in 2003 only. The distribution of BaYMV was relatively uniform throughout barley fields in Korea, but the incidence of the virus in Gyunggi Province was as low as 19% compared to 65-85% in the rest of regions. On the other hand, 70% of BaMMV was found to be in the west south regions of Korea, Jeonbuk and Jeonnam Provinces. Taken together, both BaYMV and BaMMV were thought to be dominant casual agents in overwintering barley by either single or mixed infections. Previous survey data for BaYMV from 1994 to 1996 indicated that the incidence of the virus was approximately 40% in Jeonbuk, Jeonnam, and Gyungnam Provinces. Thus, comparing with the results from the recent nationwide survey, the incidence of BaYMV had been rapidly increasing in overwintering barley fields in the southern part of Korea.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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