Background: Microglial cells, major immune effector cells in the central nervous system, become activated in neurodegenerative disorders. Activated microglial cells produce proinflammatory mediators such as nitric oxide (NO), tumor necrosis factor-$\alpha$ and interleukin-$1{\beta}$(IL-$1{\beta}$). These proinflammatory mediators have been shown to be significantly increased in the neurodegenerative disorders such as Alzhimer's disease and Pakinson's disease. It was known that one of the neurodegeneration source is stress and it is important to elucidate mechanisms of the stress response for understanding the stress-related disorders and developing improved treatments. Because one of the neuropeptide which plays a main role in regulating the stress response is corticotropin-releasing hormone (CRH), we analyzed the regulation of NO release by CRH in BV2 murine microglial cell as macrophage in the brain. Methods: First, we tested the CRH receptor expression in the mRNA levels by RT-PCR. To test the regulation of NO release by CRH, cells were treated with CRH and then NO release was measured by Griess reagent assay. Results: Our study demonstrated that CRH receptor 1 was expressed in BV2 murine microglial cells and CRH treatment enhanced NO production. Furthermore, additive effects of lipopolysaccaride (LPS) and CRH were confirmed in NO production time dependantly. Conclusion: Taken together, these data indicated that CRH is an important mediator to regulate NO release on microglial cells in the brain during stress.
Objectives : In this study, the effects of different fractions isolated from modified Boyanghwanotang(mBHT) extract on LPS-induced inflammation in BV2 microglial cells were investigated. Methods : mBHT was extracted with water, and then fractionated with n-hexane, methylene chloride, ethylacetate and n-butanol. BV2 cells, a mouse microglia line were incubated with different concentrations of each fraction of mBHT for 30 min, and then stimulated with LPS for 24 h. Cell toxicity was determined by MTT assay. The concentration of nitric oxide (NO) was measured in culture medium by Griess reagent assay. The expression of inducible nitric oxide synthease (iNOS) protein was determined by Western blot. Results : Four fractions of mBHT were significantly inhibited LPS-induced NO productions in BV2 cells in a dose-dependent manner. The methylene chloride fraction of mBHT was most strongly inhibited the NO production compared with those of the others. The methylene chloride fraction of mBHT was also suppressed LPS-induced iNOS expression comparison of other fractions at same concentration ($50\;{\mu}g/ml$) in BV2 cells. Conclusions : The results showed that the methylene chloride fraction of mBHT may have an strong anti-inflammatory property through the inhibition of NO production and iNOS expression in activated microglia, and could a therapeutic potential for the treatment of various brain inflammatory diseases.
Park, Hye-Ji;Kim, Su-Jin;Kim, Tae-Myung;Hong, Jin-Tae;Ha, Seang-Jong;Song, Jong-Yeol;Kim, Kee-Hyun
대한약학회:학술대회논문집
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대한약학회 2003년도 Proceedings of the Convention of the Pharmaceutical Society of Korea Vol.1
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pp.151.2-152
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2003
Bee venom (BV) has been utilized to relieve pain and to treat inflammatory diseases such as rheumatoid arthritis (RA). BV contains a variety of different peptides including melittin, apamin, adolapin and mast cell degranulating (MCD) peptide. In addition, it also contains enzyme (i.e. phospholipase A2), biologically active amines and non-peptide components. (omitted)
오디는 옛부터 보혈자음(補血滋陰), 생진윤조(生津閏操), 현훈이명(眩最耳鳴), 심계실면(心悸失眠), 수발조백(鬚髮早白) 등을 치료하는 효능을 가진다고 알려져 있다. 상심자(桑 子)라 하여 뽕나무 열매로서 한방에서 상심(桑 ), 상실(桑實), 오심(烏 ), 흑심(黑 ) 등으로 지칭되며, 뽕나무과(Moraceae)에 속하는 뽕나무(Morus alba L)의 성숙한 과실로 취화과(聚花果)에 속하며 작은 수과(瘦果)가 많이 모여 이루어진 장원형으로 길이 1 내지 2 cm, 지름 0.5 내지 0.8 cm이며 황갈색, 갈홍색 또는 암자색을 띠고 짧은 줄기가 있다. 작은 수과(瘦果)는 난원형으로 조금 납작한 편이며, 길이는 약 2 mm, 너비는 약 1 mm 이고 육질의 화편(花片) 4개가 둘러싸고 있다. 그러나 아직까지는 오디에 대하여 자연과학적인 연구방법을 이용하여 구체적으로 연구된 바가 많지 않다. 또한 이의 생리활성 성분에 대해서도 그 작용과 연관지어 보고된 바가 많지 않다. 뇌졸중 가운데 뇌조직으로 가는 혈액 공급의 감소 혹은 차단으로 발생되는 허혈성 뇌졸중(ischemic stroke)은 전체 뇌졸중 환자의 약 80%정도를 차지하고 있으나 아직까지 뇌신경세포 손상기전의 복잡성 등으로 뇌졸중으로 발생하는 뇌신경세포의 손상을 보호해 줄 수 있는 물질이 개발되어 있지 못한 실정이다. 한편, 천연물로부터 뇌허혈 보호작용을 가지는 물질의 도출은 주로 한방에서 처방을 중심으로 이루어지고 있으며, 따라서 처방으로부터 신경보호작용을 가지는 물질의 도출은 그 처방에 함유되어 있는 각종 생약이 갖는 다양한 활성으로 인해 어려운 점이 있으며, 비록 효과가 있다고 하더라도 과학적인 입증자료가 매우 미비한 실정이다. 이에 본 연구에서는 위에 언급된 자료를 토대로 오디추출물이 뇌허혈에 효과가 있을 것이라는 가정하에 in vitro system을 이용하여 오디추출물의 신경보호작용기전을 검색하고자 DPPH radical 의 생성억제효과, PC12 cell line을 이용한 산화적 스트레스에 의한 오디추출물의 방어효과, LSP에 의하여 활성화된 BV-2 cell에 미치는 영향 등을 검색하였다. 오디의 DPPH 소거활성은 단일화랍물인 bacicalein과 유사한 효과를 나타냈으며 PC12 cell line을 이용한 산화적 스트레스에 의한 오디의 방어 효과는 LDH activity를 행한 결과 농도 의존적으로 LDH 유리 량을 감소시켰다. 뇌손상시에 오디추출물의 염증방어 효과를 관찰하기 위하여 microglial cell line인 BV2 세포주를 선택하여 배양한 후 LPS로 자극을 준 후 일차적인 염증지표인 NO양을 측정한 결과 BV2 cell에 LPS 100 ng/ml을 처리하는 경우 nitrite량이 유의적으로 증가하였는데 이때 오디추출물을 1, 5, 10 ug/ml의 용량으로 처리하는 경우 역시 저농도에서 NO생성량을 감소시켰다. 정리해보면 뽕나무과 식물인 오디는 신경보호효과가 있는 것으로 사료되는데 이러한 효과는 아마도 오디의 항산화효과에 기인한 것으로 추정된다.
Objective : This research aims to investigates the effects of CMT and HCMT on Dementia. and we also want to know the different effect of CMT, HCMT by drug types. Methods : The research is progressed by two types of experiment. one experiment is BV2 microglial cell line treated by LPS in vitro and another experiment is memory deficit mice induced by scopolamine in vivo. Results : The CMT and HCMT is effective in BV2 microglial cell line treated by LPS in vitro and in the serum of the memory deficit mice induced by scopolamine in vivo. But, there is no significant difference between CMT and HCMT extract&nano powder in experimental conclusion. Conclusions : These results suggest that the two drug types of CMT and HCMT may be effective for the prevention and treatment of Dementia. Investigation into the further study two drug types of the CMT and HCMT for Dementia is suggested for future research.
Jong Hee Choi;Tae Woo Kwon;Hyo Sung Jo;Yujeong Ha;Ik-Hyun Cho
Journal of Ginseng Research
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제47권3호
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pp.390-399
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2023
Background: Gintonin (GT), a Panax ginseng-derived lysophosphatidic acid receptor (LPAR) ligand, has positive effects in cultured or animal models for Parkinson's disease, Huntington's disease, and so on. However, the potential therapeutic value of GT in treating epilepsy has not yet been reported. Methods: Effects of GT on epileptic seizure (seizure) in kainic acid [KA, 55mg/kg, intraperitoneal (i.p.)]-induced model of mice, excitotoxic (hippocampal) cell death in KA [0.2 ㎍, intracerebroventricular (i.c.v.)]-induced model of mice, and levels of proinflammatory mediators in lipopolysaccharide (LPS)-induced BV2 cells were investigated. Results: An i.p. injection of KA into mice produced typical seizure. However, it was significantly alleviated by oral administration of GT in a dose-dependent manner. An i.c.v. injection of KA produced typical hippocampal cell death, whereas it was significantly ameliorated by administration of GT, which was related to reduced levels of neuroglial (microglia and astrocyte) activation and proinflammatory cytokines/enzymes expression as well as increased level of the Nrf2-antioxidant response via the upregulation of LPAR 1/3 in the hippocampus. However, these positive effects of GT were neutralized by an i.p. injection of Ki16425, an antagonist of LPA1-3. GT also reduced protein expression level of inducible nitric-oxide synthase, a representative proinflammatory enzyme, in LPS-induced BV2 cells. Treatment with conditioned medium clearly reduced cultured HT-22 cell death. Conclusion: Taken together, these results suggest that GT may suppress KA-induced seizures and excitotoxic events in the hippocampus through its anti-inflammatory and antioxidant activities by activating LPA signaling. Thus, GT has a therapeutic potential to treat epilepsy.
This experiment was designed to investigate the effect of the SSJHT hot water extract & ultra-fine Powder on Alzheimer's Disease Model Induced by ${\beta}A$. The effects of the SSJHT hot water extract on expression of IL-1RA, $IL-1{\beta}$$, IL-6, IL-10, $TNF-{\alpha}$, NOS-II, COX-2 mRNA and production of $IL-1{\beta}$, IL-6, $TNF-{\alpha}$ in BV2 microglial cell line treated by lipopolysacchaide(LPS). The effects of the SSJHT hot water extract & ultra-fine powder on (1) the behavior (2) expression of $IL-1{\beta}$, $TNF-{\alpha}$, MDA, CD68, CD11b and AChE (3) and the infarction area of the hippocampus in Alzheimer's diseased mice induced with ${\beta}A$ were investigated. The SSJHT hot water extract suppressed the expression of $IL-1{\beta}$, IL-6 and $TNF-{\alpha}$, NOS-II, COX-2 mRNA and increased IL-1RA, IL-10 in BV2 microglia cell line treated with LPS. The SSJHT hot water extract suppressed the production of $IL-1{\beta}$, IL-6, $TNF-{\alpha}$ significantly in BV2 microglial cell line treated with LPS. The SSJHT hot water extract & ultra-fine powder a significant inhibitory effect on the memory deficit was shown for the mice with Alzheimer's disease induced by ${\beta}A$ in the Morris water maze experiment, which measured step-through latency. The SSJHT hot water extract & ultra-fine powder suppressed the expression of $TNF-{\alpha}$$, $L-1{\beta}$ protein significantly in the microglial cell of mice with Alzheimer's disease induced by ${\beta}A$. The SSJHT hot water extract & ultra-fine powder reduced the MDA and suppressed the over-expression of CD68, CD11b in the mice with Alzheimer's disease induced by ${\beta}A$. The SSJHT hot water extract & ultra-fine powder significantly decreased AChE activity in the serum of the mice with Alzheimer's disease induced by ${\beta}A$. The SSJHT hot water extract & ultra-fine powder reduced infarction area of hippocampus. and controlled the injury of brain tissue in the mice with Alzheimer's disease induced by ${\beta}A$. The results suggest that the SSJHT hot water extract & ultra-fine powder may be effective for treatment of Alzheimer's disease. Investigation into the clinical use of the SSJHT hot water extract & ultra-fine powder for Alzheimer's disease is suggested for future research.
Background: Chong-Myung-Tang (CMT) extract is widely used in Korea as a traditional herbal tonic for increasing memory capacity in high-school students and also for numerous body ailments since centuries. The use of CMT to improve the learning capacity has been attributed to various plant constituents, especially black ginseng, in it. Therefore, in this study, we have first investigated whether black ginseng-enriched CMT extracts affected spatial learning using the Morris water maze (MWM) test. Their molecular mechanism of action underlying improvement of learning and memory was examined in vitro. Methods: We used two types of black ginseng-enriched CMT extracts, designated as CM-1 and CM-2, and evaluated their efficacy in the MWM test for spatial learning behavior and their anti-inflammatory effects in BV2 microglial cells. Results: Our results show that both black ginseng-enriched CMT extracts improved the learning behavior in scopolamine-induced impairment in the water maze test. Moreover, these extracts also inhibited nitric oxide production in BV2 cells, with significant suppression of expression of proinflammatory cytokines, especially inducible nitric oxide synthase, cyclooxygenase-2, and $interleukin-1{\beta}$. The protein expression of mitogen-activated protein kinase and nuclear $factor-{\kappa}B$ pathway factors was also diminished by black ginseng-enriched CMT extracts, indicating that it not only improves the memory impairment, but also acts a potent anti-inflammatory agent for neuroinflammatory diseases. Conclusion: Our research for the first time provides the scientific evidence that consumption of black ginseng-enriched CMT extract as a brain tonic improves memory impairment. Thus, our study results can be taken as a reference for future neurobehavioral studies.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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