Wi, Young Chan;Moon, Ahrim;Jung, Min Jung;Kim, Yeseul;Bang, Seong Sik;Jang, Kiseok;Paik, Seung Sam;Shin, Su-Jin
Journal of Pathology and Translational Medicine
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v.52
no.6
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pp.378-385
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2018
Background: BRCA1-associated protein 1 (BAP1) mutations are frequently reported in clear cell renal cell carcinoma (ccRCC); however, very few studies have evaluated the role of these mutations in other renal cell carcinoma (RCC) subtypes. Therefore, we analyzed BAP1 protein expression using immunohistochemistry in several RCC subtypes and assessed its relationship with clinicopathological characteristics of patients. Methods: BAP1 expression was immunohistochemically evaluated in tissue microarray blocks constructed from 371 samples of RCC collected from two medical institutions. BAP1 expression was evaluated based on the extent of nuclear staining in tumor cells, and no expression or expression in <10% of tumor cells was defined as negative. Results: Loss of BAP1 expression was observed in ccRCC (56/300, 18.7%), chromophobe RCC (6/26, 23.1%), and clear cell papillary RCC (1/4, 25%), while we failed to detect BAP1 expression loss in papillary RCC, acquired cystic disease-associated RCC, or collecting duct carcinoma. In ccRCC, loss of BAP1 expression was significantly associated with high World Health Organization (WHO)/International Society of Urological Pathology (ISUP) grade (p=.002); however, no significant correlation was observed between loss of BAP1 expression and survival in ccRCC. Loss of BAP1 expression showed no association with prognostic factors in chromophobe RCC. Conclusions: Loss of BAP1 nuclear expression was observed in both ccRCC and chromophobe RCC. In addition, BAP1 expression loss was associated with poor prognostic factors such as high WHO/ISUP grade in ccRCC.
Due to their stem-like characteristics and immunosuppressive properties, Mesenchymal stem cells (MSCs) offer remarkable potential in regenerative medicine. Much effort has been devoted to enhancing the efficacy of MSC therapy by enhancing MSC migration. In this study, we identified deubiquitinase BRCA1-associated protein 1 (BAP1) as an inhibitor of MSC migration. Using deubiquitinase siRNA library screening based on an in vitro wound healing assay, we found that silencing BAP1 significantly augmented MSC migration. Conversely, BAP1 overexpression reduced the migration and invasion capabilities of MSCs. BAP1 depletion in MSCs upregulates ERK phosphorylation, thereby increasing the expression of the migration factor, osteopontin. Further examination revealed that BAP1 interacts with phosphorylated ERK1/2, deubiquitinating their ubiquitins, and thus attenuating the ERK signaling pathway. Overall, our study highlights the critical role of BAP1 in regulating MSC migration through its deubiquitinase activity, and suggests a novel approach to improve the therapeutic potential of MSCs in regenerative medicine.
Callus was induced from the petioles of scented-geranium (Pelargonium graveolense) in MS medium containing various concentrations of plant growth regulators. The highest frequency of more than 70% of callus was induced in 2 mg/l NAA and 0.5 mg/l BAP or 2 mg/l 2,4-D and 0.5 mg/l BAP combined treatment, while not in 2,4-D, NAA or BAP alone. When the callus was transferred to the MS medium containing 0.05 mg/l NAA and 0.5 mg/l BAP, were highest intensity of shoot formation, 14 shoots/callus, was induced after 5 weeks. The highest rooting was observed on hormone-free rooting media from the regenerated shoots after 3 weeks, indicating that the regeneration from geranium callus might be possible by changing the hormone ratios. Peroxidase (POD) specific activities in callus induced from 2 mg/l NAA and 0.5 mg/l BAP were higher than those of 2 mg/l 2,4-D and 0.5 mg/l BAP callus during the entire culture periods. POD isozyme C3 was the main cathodic POD isozyme expressed in NAA and BAP callus, while C1 was the main in 2,4-D and BAP callus. However, anodic POD isozymes, A1, A2 and A3 were expressed with similar activities in both hormone combinations.
해녀콩(Canavalia lineata) 유식물 자엽에서 N-$\alpha$-benzoyl-DL-arginine p-nitroanilide hydrolase(BApNAase)를 부분정제하여 그 성질을 밝혔다. 부분정제한 BApNAase는 purification fold가 77.5이었고 회수율은 7%이었으며 비활성도는 7.75 unit/mg이었다. BApNAase의 분자량은 200 kD이고 젤라틴분해효소 P3인 것으로 밝혀졌으며 최적 pH는 9.5이었다. BApNAase의 Vmax와 Km은 각각 15.5 unit/mg와 1.6 mM로 최대반응속도가 동물의 트립신보다 7배 가량 낮은 반면에 N-$\alpha$-benzoyl-DL-arginine p-nitroanilide(BApNA)에 대한 기질 친화성은 4배 가량 높았다. 또한, BApNAse는 1 mM의 phenylmethanesulfonyl fluoride(PMSF)에 의해 90%나 크게 억제된 반면 aprotinin에 의해서는 크게 억제되지 않아 트립신과는 다른 serine proteinase로 판단되었으며, 효소활성은 Ca2+과 Mg2+에 의해 다소 증가하나 Mn2+, Hg2+, Zn2+에 의해 크게 억제되었다.
In order to investigate the micropropagation of Pelargonium, 2 cultivars of P. peltatum 'Pouletta' and P. zonale 'Pinto Red' were cultured in vitro on the MS basal medium supplemented with various concentrations of growth regulators. It attempted to study the induction of callus and the differentiation of organs from leaf disc, petiole segments, stem segments. hypocotyle segments and flower stalk segments. The results are summarized as follows; A. As for the initiation of callus, stem explant was proved to be the most suitable one among various explants of P. zonale 'Pinto Red'. The medium was supplemented with 1.0mg/1 BAP and 1.0mg/1 NAA. As NAA concentration increased, callus formation was enhanced, but higher concentration of NAA inhibited callus fromation. Leaf and hypocotyle explants showed less callus formation than stem and petiole explants. B. In P. zonale 'Pinto Red' petiole culture, the condition of cullus culture such as hormone concentration resulted in affecting shoots differentiation. The best result of shoots formation from the callus reculture were obtained from the combination of 0.5-1.0mg/1 BAP and 0.1-1.0mg/1 NAA when the callus was cultured in 1.0mg/1 BAP and 0.05mg/1 NAA. When the callus was cultured in medium without BAP, the shoot was not differentiated in subculture regardless to BAP and NAA concentration. and only callus was formed. C. Poly-phenol substance was observed in MS medium supplemented without PVP, in which callus was not formed from the leaf of P. peltatum 'Rouletta'. Polyphenol substance was not observed in MS medium supplemented with PVP, in which callus formation was increased. D. The callus formation of P. peltatum 'Rouletta' showed the stem explant being best result. The best result particularly in the stem explant among others.
The optimal hormonal concentration was 0.1mg/1 NAA and 5.0mg/1 BAP. The shoot formation was observed at 0.05mg/1 NAA and 1.0mg/1 BAP, 0.1mg/1 NAA and 5.0mg/1 BAP. The shoot was malformed and the tissue recultured turned necrotic.
This study was performed to investigate the effects of various media compositions in regeneration of Lilium lancifolium. The adventitious bud initiation from microscale was the best on MS medium supplemented with BAP 1.0 mg/L and NAA 0.1 mg/L after 4 weeks of culture. However, from bulbscales, adventitious bud initiation was the best in dark condition on MS medium supplemented with BAP 0.5 mg/L and NAA 0.1 mg/L. On the other hand, callus induction was found to be the best from the microscales incubated in complete dark condition for 8 weeks on MS medium supplemented with 2,4-D 1.0 mg/L and BAP 0.1 mg/L. The highest plantlet regeneration from callus was obtained after incubation in the light condition for 8 weeks on MS medium supplemented with NAA 0.5 mg/L and BAP 0.1 mg/L. Rooting of shoots was obtained easily on MS medium and the plantlets were transferred to soil pots after 8 weeks. The chromosome analysis of the root tip cells was revealed that the callus-derived plantlets had normal chromosome number, 2n=24. No variation was observed in the morphology of the plantlets.
The axillary buds of 15-year-old Tilia amurensis were cultured on Saito and Ide (IS), Murashige and Skoog (MS) media and woody plant medium (WPM) to establish an effective micropropagation method. Five levels of 6-benzylaminopurine (BAP) were tested. On IS medium and WPM addition of 1.0/l BAP enhanced shoot development and shoot elongation, whereas addition of 0.5/l BAP was effective on MS medium. A better results were obtained from WPM with 1.0/l BAP and MS with 0.1/l BAP. Developed shoots were subcultured on each basal media but with 0.2/l BAP, Multiple shoots were almost doubled in a month. Root formation could be enhanced at higher concentration of indole-3-butyric acid (IBA). Better rooting rate (83.3%) was achieved on a half-strength MS medium with 3.0 /l IBA. Regenerated plantlets were successfully transferred to soil. To investigate the clonal variation in shoot development and shoot elongation by axillary bud culturing, seven plus tree clones were tested, Clonal variation in tissue culturability among plus trees was recognized by the Duncan's multiple range test at the 5% level. Kang Won No. 12 showed the best response on WPM with 1.0/l BAP.
Cho, Song Mi;Oh, Sang A;Choi, Yong Soo;Park, Sang Bin
Korean Journal of Plant Resources
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v.27
no.1
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pp.51-59
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2014
In this study, we developed a high frequency watermelon regeneration system using three breeding lines ('B02', 'B05' and 'D04') of watermelon (Citrullus lanatus (thunb.) Matsum. & Nakai) which are differed in their fruits in shape, color of pericarp and flesh. The highest frequency of explants with callus was observed by using explants that consist of cotyledon proximal part end in all breeding lines, and the highest rate of callus induction was obtained on MS medium containing 1.0 mg/L BAP + 0.5 mg/L IAA for 'B02' (94%), 3.0 mg/L BAP for 'B05' (95%), 3.0 mg/L BAP + 0.1 mg/L IAA for 'D04' (90%). The highest shoot regeneration rates from derived callus were obtained on MS medium containing 1.0 mg/L BAP + 0.5 mg/L IAA for 'B05' (94%), and then a 'B02' (81%) with a same culture conditions, and the lowest regeneration was obtained on MS medium containing 1.0 mg/L BAP for 'D04' (56%). Regenerated plants showed the best rates of root formation on MS containing 0.1 mg/L IBA for 'B02' (67%), 0.1 mg/L NAA for 'B05' (87%), 0.5 mg/L IAA for 'D04' (88%). The regenerated plants showed a 100% survival rate in soil condition. The tissue culture and regeneration conditions obtained from this study will be useful for regenerating plants in breeding applications, and will be a useful tool for further genetic transformation studies on watermelons.
A new $N_4O_3$ heptadentate ligand, N,N'-Bis(2-hydroxybenzyl)-1,3-bis[(2-aminoethyl)amino]-2-propanol(H-BAP 4HCl)was synthesized. The hydrochloric acid salts of Br-BAP 4HCl, Cl-BAP 4HCl, $CH_3O$-BAP 4HCl and $CH_3$-BAP 4HCl containing Br-, Cl-, H-, $CH_3O-$ and $CH_{3^-}$ groups at the para-site of the phenol group of the H-BAP were synthesized. The structures of the ligands were confirmed by C. H. N. atomic analysis and $^1H$ NMR, $^{13}C$ NMR, UV-visible and mass spectra. The elemental stepwise protonation constants(${logK_n}^H$) of the synthesized $N_4O_3$ ligands showed six steps of the proton dissociation. The orders of the overall dissociation constants($log{\beta}_p$) of the ligands were Br-BAP < Cl-BAP < H-BAP < $CH_3O$-BAP < $CH_3$-BAP. The orders agreed well with that of Hammett substituent constants($\sigma_p$). The calculated stability constants($logK_{ML}$) between the ligands and transition metal ions agreed well with the order of the overall proton dissociation constants of the ligands but they showed a reverse order in Hammestt substituent constants($\sigma_p$). The order of the stability constants between the transition metal ions with the ligands were Co(II) < Ni(II) < Cu(II) > Zn(II) > Cd(II) > Pb(II).
C6-Benzylamino purine (BAP) 400 ppm with 500 ppm Spreader, 500 ppm Cover, 250 ppm Spreadersticker, 350 ppm Siloxane, or 1% Tween 20 was sprayed and the effect of surface-active agents on the feathering of maiden apple trees was evaluated. Only Tween 20 showed additional effect on the feathering in comparison with the single BAP treatment. In the second year different concentrations of Tween 20 were added to 400 ppm BAP. Each BAP treatment added with 0.2, 0.5, 0.8, or 1.0% Tween 20 was more effective in feathering than BAP 400ppm alone, but no significant differences among the concentrations.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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