• 제목/요약/키워드: B.amyloliquefaciens-Amylase gene clonig-YEp13-Expression in E.coli

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YEp 13 vector를 이용한 Bacillus amyloliquefaciens amylase gene의 cloning I. Escherichia coli에서의 발현 (Cloning of Bacillus amyloliquefaciens amylase gene using YEp13 as a vector I. Expression of cloned amylase gene in Escherichia coli)

  • 이창후;서정훈
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제14권2호
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    • pp.155-160
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    • 1986

  • E. coli-Yeast shuttle vector YEp 13에 B. amyloliquefaciens의 $\alpha$-amylase gene을 cloning하여 얻은 hybrid plasnidlasmid를 E. coli를 숙주세포로 하여 형질을 발현시켰다. 형질전환주의 $\alpha$-amylase 활성 측정 결과, B. amyloliquefaciens에 대해 20-30%의 상대 활성도를 나타내었다. 형질전환주의 경우 생성된 $\alpha$-amylase의 60-65%가 periplasm에 축적되었으며 세포 외부로의 분비는 없었다. Hybrid DNA를 agarose-gel 전기영동으로 조사한 결과 그 크기가 다른 다수의 hybrid DNA가 확인되었으며 pHA28의 plasmid (a)(Fig.3)에서만 $\alpha$-amylase 활성을 나타내는 것으로 밝혀졌다 pHA28의 plasmid(a)의 크기가 YEp 13 plasmid DNA보다 작은 것은 YEp13 plasmid에서 yeast gene부분이 deletion된 결과로 추측되었다.

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