A gene encoding bacillopeptidase F, bpr86-1, was cloned from B. amyloliquefaciens CH86-1 isolated from cheonggukjang. This gene could encode a preproenzyme of 1,431 amino acids. When bpr86-1 was introduced into B. subtilis WB600 via pHY300PLK, an E. coli-Bacillus shuttle vector, the transformant showed fibrinolytic activity. During growth on LB, the fibrinolytic activity of cells increased sharply when they entered the stationary phase. The highest activity (761.4 mU/mg protein) was observed at 96 h of cultivation.
효모 Saccharomyces diastaticus가 포자형성기에 세포질에서 생산된다고 알려진 포자형성 특이 glucoamylase (SGA)가 세포 외로 분비되는 단백질임을 증명하고자 S. dastaticus의 SGA promoter와 예상되는 분비신호서열 다음에 reporter gene으로 사용한 고초균의 CMCase 구조유전자를 융합한 재조합 플라스미드 pYSC25를 제작하고 수주세포인 S. diastaticus YIY345에 형질전환 하였다. 형질전환체를 1% CMC를 포함하는 최소한천배지에서 배양한 후 Congo red 염료로 염색하여 생성된 투명환으로부터 SGA의 분비서열에 의해 세균의 CMCase가 효모세포외로 분비되는 것을 확인하였다. 효모세포부위 별 CMCase의 활성분포를 측정하여 SGA 분비서열의 분비효율을 추정하기 위해 효모세포 배양액을 배양상등액, periplasmic 및 세포질 분획으로 나눈 다음 효소활성을 측정한 결과 CMCase 활성의 76%가 배양상등액과 periplasmic 부위에 존재하였으며 N-연결형 당쇄가 일어났으므로 SGA 분비서열은 효과적으로 작용함을 알 수 있었다. 대조균인 고초균에서 생산된 CMCase에서는 당쇄가 일어나지 않은 것을 확인하였다. 이상의 결과로부터 SGA는 아미노 말단에 존재하는, 24개의 아미노산으로 구성된 분비서열을 보유한 분비성 단백질임을 확인하였다.
To elucidate the efficacy of different soy protein sources on piglet's performance, a total of 280 weaned piglets ($Duroc{\times}Yorkshire{\times}Landrace$, $23{\pm}3$ d of age, $5.86{\pm}0.45$ kg initial BW) were allotted to 5 treatment diets comprising soybean meal (SBM), soy protein concentrate (SPC), Hamlet protein (HP300), fungal (Aspergillus oryzae) fermented soy protein (FSP-A), and fungal plus bacterial (A. oryzae+Bacillus subtilis) fermented soy protein (FSP-B), respectively. Experimental diets for feeding trial were formulated to contain each soy protein sources at 8% level to corn-whey powder basal diet. There were 14 pigs per pen and 4 pens per treatment. Experimental diets were fed from 0 to 14 d after weaning and then a common commercial diet was fed from 15 to 35 d. Also for ileal digestibility studies, 18 pigs were assigned to 6 dietary treatments as N-free, SBM, SPC, HP300, FSP-A and FSP-B with T-canulation at distal ileum for 6 days. At $14^{th}$ d of experimental feeding, the ADG was significantly higher (p<0.05) in SPC fed diet as compared with others. Similar trend was noticed during the 15-35 d and overall study (0-35 d). All the processed soy protein sources tested in this experiment improved (p<0.05) growth than SBM during overall study. The nutrient digestibility of GE, DM, CP and Ca showed lower (p<0.05) values in SBM and FSP-A fed groups than SPC and FSP-B treatments. The apparent ileal digestibility of TEAA, non-TEAA and TAA showed lower (p<0.05) in SBM treatments compared with other soy protein sources. The true ileal digestibility of TEAA, non-TEAA and TAA were lower (p<0.05) in SBM fed group than SPC and HP300 treatments, and lower than FSP treatments though they didn't achieve significant difference (p>0.05). Villous height and crypt depth was not affected by dietary treatments. In conclusion, the growth and digestibility of nutrients in weaned pigs fed SPC was superior to others. Also FSP-A and FSP-B showed improved performance than those fed SBM.
일반적으로 청국장 제조 시 첨가하는 Bacillius subtilis와 기존 청국장에서 분리한 Bacillus sp. Kn-10, 볏짚에서 분리한 Bacillus sp. B-59를 사용하여 청국장을 조제하고 그 청국장의 품질 특성을 비교하였다. 균주에 따른 청국장 발효과정 중 pH와 총 균수는 뚜렷한 차이를 나타내지 않았다. 배양 48시간째 청국장의 점질물량은 Bacillus sp. B-59의 경우 6.28%로 가장 높았으며 , Bacillus sp. Kn-10, B. subtillis 순으로 나타났다. 모든 처리구에서 L 값은 발효가 진행됨에 따라 어두워지는 경향을 보였으며, a 값과 b 값은 감소하는 경향을 나타내었다. 환원당은 발효 24시간까지 증가하였다가 감소하는 경향을 나타내었다. 청국장의 protease 활성도는 Bacillus sp. B-59(117.19 unit), B. subtillis(109.93 unit)는 Bacillus sp. Kn-10(90.97 unit) 보다 우수하였다. B. subtillis 또는 Bacillus, sp. Kn-10 접종구의 DPPH radical 소거능은 증자콩에 비해 감소하였으나 Bacillus sp. B-59 접종구는 발효 기간 동안 증가하였다. 발효 균주에 따른 청국장의 총 아미노산 함량은 Bacillus sp. B-59(34,869.98 mg%), B. subtillis(34,481.89 mg%), Bacillus sp. Kn-10(31,791.09 mg%) 순으로 나타났으며 , Bacillus sp. B-59는 glutamic acid와 lysine 함량이 다른 처리구에 비해 높았다. 관능검사 결과, Bacillus sp. B-59로 제조한 청국장의 색, 맛, 조직감, 종합적기호도에서 가장 양호하였다.
두 종의 Bacillus와 한 종의 Pseudomonas로 구성된 컨소시엄 미생물제제를 고추 경작지에 첨가하였을 때 경작지 토양의 미생물 다양성 변화를 조사하기 위해 건전한 토양의 지표가 되는 질소순환관여 미생물과 근권토양 내 섬유소 분해기능, 인산가용화기능과 urea 가수분해기능을 가지는 기능성미생물의 활성과 밀도를 측정하였다. 고추 경작지 토양에 컨소시엄 PGPR 미생물인 B. subtilis AH18, B. licheniformis K11과 P. fluorescens 2112의 컨소시엄 미생물제제를 처리하여 토양미생물의 다양성에 변화를 측정하여 컨소시엄 미생물제제의 처리에 의한 근권토양 미생물의 다양성 변화와 고추의 생육에 미치는 영향을 분석하였다. 컨소시엄 미생물제제 처리구의 경우 Actinomyces spp., Trichoderma spp., 광합성세균과 Azotobacter spp.가 다른 처리구에 비하여 1.7-5배 이상 높았으며, 질소 순환에 관여하는 미생물은 1.4-4배 증가되었다. 또한 기능성 미생물의 다양성도 화학제제나 물처리구와 비교하였을 때 1.3-3배 증가하였다. 건고추 수확량은 컨소시엄 미생물제제를 처리하였을 경우 대조구나 화학제제를 처리하였을 때보다 15%이상 수확량이 증대되었다. 따라서 PGPR 컨소시엄 미생물제제의 처리로 인해 고추 경작지 토양의 근권미생물 다양성과 작물의 생산성에 긍정적인 영향을 주는 것으로 생각된다. 추후 메타지노믹스를 활용하여 미생물 다양성 변화를 추가적으로 확인할 예정이다.
The research was conducted(1) to confirm the agent(s) responsible for the antimicrobial activity contained in the fermented tomato juice with L. acidophilus(2) to extract and purify the antimicrobial agent(s)(3) to find the biological, physical and chemical properties of the agent(s). The following results were obtained and summarized as followings; 1. The agent responsible for the inhibitory activity was confirmed by both well assay method using fermented tomato juice with L. acidophilus and turbidimetric technique using the cell-free filtrate or neutralized filtrate of tomato acidohilus culture and found exerted antimicrobial agent other than lactic acid. 2. The procedures of purification : The isolation and purification of antimicrobial agent from the lyophilized acidophilus tomato culture were carried out by (1) methanol extraction (2) acetone extraction, (3) Sephadex G-50 gel filtration (4) paper chromatography and (5) thin layer chromatography. 3. The biological, physical and chemical properties of antimicrobial agent: The biological, physical, chemical properties of the purified antimicrobial agent were: (1) The antimicrobial activity was strong against test organisms; Bacillus subtilis(ATCC 6633), Escheichia coli(ATCC 25922), Staphylococcus aureus(ATCC 167), Pseudomonas fluorescens(KFCC 32394), Proteus vulgaris and Shigella dysenteriae. (2) The pH value of the agent was 2.0 and the inhibitory activity was lost when it was neutralized at 7.0 of pH and the agent was heat stable at $121^{\circ}C$ for 60 minutes. (3) The ultraviolet light absorption spectra of methanol-acetone extract and TLC fraction exhibited a maximum absorption at 260nm and 224nm respectively. (4) The most purified agent from TLC plate increased about 130-fold in activity. (5) The agent isolated from TLC plate was free from $H_2O_2$ or lactic acid. 4. Bioautographic assy: By means of bioautography of the agent on silica gel of TLC plate a strong inhibitory activity against B. subtilis was demonstrated. 5. Mass spectrometry: The agent obtained from TLC plate was analyzed by mass spectrometry which show the parent peak at m/e 264 suggesting the molecular weight of the compound and molecular group such as [$C_2H{^+}_4$], [CO], [CH=NH], [$C_3{H^}4_7$], [$\begin{array}{rcl}O\\{\parallel}\\CH_3-C\\\end{array}$], [$C_6-H{^+}_{11}$], [$C_5H{^+}_{11}$], [$\begin{array}{rcl}O\\{\parallel}\\C_5H_7-C^+\\\end{array}$] were suggested.
본 연구는 미국바퀴(Periplaneta americana)의 식의약용 소재로의 활용을 위하여 미국바퀴의 사육 특성을 조사하여 사육의 편의를 제공하고, 유용물질의 분리 및 분석을 통하여 식의약용 소재로의 가능성을 제시하고자 하였으며, 그 결과로 미국바퀴는 한 개의 난포가 평균 25개의 알을 포란하고 있고, 14.5개의 알이 부화하여 약 67%의 부화율을 보였으며, $28^{\circ}C$에서 사육하는 것이 가장 효율적인 사육온도로 확인하였다. 미국바퀴(P. americana) 성충의 일반성분 및 유용성분 분석 결과, 일반성분 중 수분이 60% 이상을 차지하고 있으며, 조지방이 1%, 조단백질은 33.49 %로써 조단백질 함량이 높게 측정되었다. 필수아미노산이 2.37%를 차지하고 있으며, 지방산은 항암작용을 가지고 있는 oleic acid (C18 : 1n9c)가 28.91%, palmitic acid(C16 : 0)가 19.06%로 가장 많은 량을 차지하고 있어 미국바퀴의 식용화 가능성을 확인하였다. 미국바퀴(P. americana)는 성충을 멸균증류수(DW) 및 각종 유기용매(ethyl acetate, hexan, ethyl ether, EtOH, MeOH))로 추출하여 각각의 조추출물이 가지고 있는 항균 활성을 측정하기 위하여 그램 음성균인 P. aeruginosa, E. coli와 그램 양성균인 B. subtilis, S. auricularis와 진균인 C. abbicans을 대상으로 실시한 disc diffusion test의 결과, ethyl ether를 이용하여 추출한 조추출물이 시험에 사용된 각각의 공시균주에 대하여 B. subtilis $1.88{\pm}0.40mm$, S. auricularis $7.78{\pm}0.76mm$, P. aeruginosa $6.44{\pm}1.03mm$, E. coli $7.55{\pm}0.74mm$, C. abbicans $5.61{\pm}0.57mm$의 clear zone을 형성하면서 각각의 균주 생장을 저해하는 것을 확인하였으며, 온도 스트레스에 대한 항산화 물질인 GST 발현량을 Real Time PCR을 이용하여 정량분석 한 결과, 항산화 단백질인 GST는 $37^{\circ}C$에서 한 시간 단위로 점차 발현량이 증가하고, $4^{\circ}C$ 처리를 한 경우에는 1시간 경과 후 급격하게 증가하였으며, 2시간 경과한 후에 가장 많은 발현량을 보였다. 본 연구결과에 따라서, 미국바퀴(P. americana)는 각종 유용성분을 함유하고 있으며, 항균 활성도 우수한 것으로 확인하였고, 온도처리와 같은 사육조건 조절시 고품질의 원료생산을 통한 농가소득 증대에 기여할 수 있을 것으로 기대한다.
34종의 Hexachlorophene유도체가 합성되었으며 그 각각의 화합물에 대하여 항균성시험이 행해졌다. 검정균은 세종류의 세균과 무좀균(백성균)을 포함한 5종류의 진균류이다. 시험결과는 1. 2,2'-Methylene bis [$\alpha$-(3,4,6-trichlorophenoxy)-$\beta$-(N,N-diethylamino) propionic acid] 및 2,2'-methylene bis [$\alpha$-3,4,6-trichlorophenoxy)-$\beta$-(N,N-dimethylamino) propionic acid] 는 Sta. aureus와 B.subtilis에 대해 강한 항균작용을 나타냈다. 2. 2,2'-methylene bis [$\alpha$-(3,4,6-trichlorophenoxy)-$\beta$-(m-hydroxy-p-carbozyphenylarnino ) propionic acid]는 특히 진균류의 생장저해작용이 강하며 Trichophyton rubrum 및 Microsporum gypseum에는 2 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$의 농도에서 항균성을 가지며, Epidermophyton floccosum Aspergillus niger 및 Aspergillus oryzae에 대해서는 1 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$의 농도에서 항균성을 나타냄으로서 Hexachlorophene 항균성의 10배 내지 50배의 항균력을 가진다. 3. 34종류의 합성물질중 원 Hexachlorophene에 비해 5종류의 진균류에 대해 부분적으로나마 강한 항균력을 나타내는 물질은 23종류였고 3종류의 세균에 대해선 13종류였다.
Kim, Young Il;Ahmadi, Farhad;Lee, Sang Moo;Lee, Youn Hee;Choi, Do Young;Kwak, Wan Sup
한국초지조사료학회지
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제36권3호
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pp.191-198
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2016
This study evaluated the effects of TMC (trace mineral-fortified microbial culture) supplementation on growth performance, carcass characteristics, and meat quality parameters of Hanwoo steers during the last 4 months of finishing period. The TMC was a combination of 0.4% trace minerals, 20.0% Na-bentonite, and 79.6% feedstuffs, which was inoculated with a mixed microbial culture (Enterobacter ludwigii, Bacillus cereus, B. subtilis, Lactobacillus plantarum, and Saccharomyces cerevisiae). Twenty-four steers were blocked by initial BW ($634{\pm}16kg$) and randomly allocated to one of two treatments (control vs. 3.3% TMC). The effect of TMC supplementation on the growth performance was not significant. There was no incidence of urolithiasis in TMC-fed steers. However 3 out 12 steers (25%) fed the control diet were observed to have urinary calculi. The carcass yield and meat quality parameters were not affected by TMC supplementation, however marbling score was increased in TMC-fed steers (P = 0.08). There was no effect of TMC treatment on the chemical composition of longissimus dorsi muscle (LM). The TMC supplementation increased concentrations of manganese (P < 0.01), cobalt (P = 0.02), iron, and copper (P = 0.06) in LM. In conclusion, TMC treatment did not negatively affect growth performance and meat quality parameters, and positively affected the trace minerals profile of LM.
B. subtilis DJI 특유의 생육특징을 이용하여 제조된 세균형 코지에 첨가소금을 달리하여 두 가지 종류의 된장(정제염 된장, 천일염 된장)을 제조하였다. 된장 제조 시 사용된 소금의 무기질 함량을 분석한 결과 정제염은 Na와 Cl이 99.92%를 차지하였으며, 천일염은 Na와 Cl이 94.14%로 가장 많은 함량을 차지하였고 이외에도 $SO_4$, Mg, K, Br, Ca 등이 5.85%로 검출되어, NaCl 이외에도 다양한 무기질이 존재함을 알 수 있었다. 제조된 된장은 $10^{\circ}C$, $20^{\circ}C$, $30^{\circ}C$에서 60일간 숙성시키면서 그 품질특성을 살펴보았다. 된장은 숙성기간이 경과함에 따라 수분함량이 감소하는 경향을 나타내었고 숙성온도가 높을수록 더욱 많이 감소하였으나, 동일 조건에서 천일염 된장(51.88%$\rightarrow$47.90%)이 정제염 된장(51.55%$\rightarrow$45.38%)에 비해 수분함량이 적게 감소함을 알 수 있었다. 제조된장의 pH와 산도 변화에 있어서 소금에 따른 큰 차이는 없는 것으로 보이며 두 된장 모두 숙성기간이 지남에 따라 pH는 저하되고 산도는 증가하는 경향을 나타내었다. 또한 본 연구에서 제조된 된장은 숙성기간이 길수록, 숙성온도가 높을수록 갈변이 촉진되었고, 천일염 된장이 정제염 된장에 비해 갈변진행 속도가 현저히 느림을 확인할 수 있었다. 제조된장의 숙성 중 유리 아미노산 함량은 정제염 된장과 천일염 된장 모두 증가하였으며, 각각의 숙성조건에서 천일염 된장(2242.98 mg%)이 정제염 된장(1937.13 mg%)에 비해 유리아미노산 함량이 높게 검출되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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