동아시아산 황기속의 외부형태학적 특징과 과피, 종피의 해부구조 및 표면 형태를 조사하여 분류학적으로 유용한 형질을 찾고자 하였다. 연구 결과, 황기속의 외부형태, 과피, 종피의 형태 및 해부학적 특징 중 생활사, 소엽의 형태, 꽃차례, 꽃잎의 색, 종자의 색, 과피의 형태, 과피 표면에서 털의 존재유무, 봉선의 구조, 그리고 내과피 층의 두께가 종을 나누는 식별형질로 사용될 수 있음을 확인하였다. 이를 바탕으로 중국에서 황기라는 약재로 사용되어지고 있는 4종의 형태 및 해부학적인 특성을 비교한 결과, 서로 같은 군으로 유집되었다. 한편, 분류학적으로 논쟁이 되고 있는 정선황기와 갯황기에서는 두 분류군간에 형태적 차이점을 발견 할 수 없었다. 따라서 금후 정선황기, 갯황기, A. bhotanensis의 종간 분류학적 처리를 명확히 규명하기 위하여 염기서열 및 분자세포학 수준에서의 연구가 필요하다.
국내에 자생하는 황기속(Astragalus L.) 식물인 정선황기(A. koraiensis)의 핵형을 분석하고, 5S 및 45S rDNA 유전자를 이용한 FISH 실험에 기초하여 세포유전학적 연구를 수행하였다. 핵형 분석 결과, 정선황기의 체세포 염색체수는 2n = 16으로, 기본 염색체수는 x = 8임을 확인하였다. 염색체 조성은 6쌍의 중부염색체(염색체 1, 3, 4, 5, 6, 8)와 2쌍의 차중부염색체(염색체 2, 7)로 구성되었다. 정선황기의 염색체상에서의 FISH 결과, 1쌍의 45S rDNA signal이 5번 염색체의 동원체 부위에서 관찰되었고, 2쌍의 5S rDNA signal이 4번 염색체의 단완 말단부위와 7번 염색체의 동원체 부위에서 관찰되었다. 이는 기존의 황기 및 제주황기, 몽골황기(A. mongholicus) 와는 전혀 다른 FISH 패턴을 보이고 있어 정선황기가 고유종임을 암시하지만, 형태학적으로 유사한 갯황기(A. sikokianus) 및 A. bhotanensis 와의 비교연구를 수행하여 정확한 분류학적 처리가 이루어져야 할 것이다.
자운영 배양으로부터 신초발생에 대한 최적 배양조건을 조사하기 위하여 배축절편을 0.1, 1.0, 2.0 4.0 mg/L 2,4-D가 첨가된 MS배지에서 6주 동안 배양하였다. MS배지에 2,4-D가 0.1 또는 1.0 mg/L로 첨가된 배지에서 형성된 캘러스로부터 신초발생능 캘러스 형성을 조사하기 위하여 2,4-D와 BA 를 혼합 첨가한 배지에 옮겨 4주 동안 배양하면서 조사하였다. 먼저 2,4-D 농도에 따라 신초와 뿌리를 형성하는 캘러스, 뿌리를 형성하는 캘러스, 캘러스, 진한 갈색으로 변하는 캘러스 등 여러가지 형태발생을 관찰할 수 있었다. 일반적으로 신초와 뿌리를 갖는 캘러스는 2,4-D가 낮은 농도로 첨가 되었을 때 형성되었으며, 반면 신초가 없는 캘러스, 갈변 되는 캘러스는 고농도로 처리되었을 때 형성되었다. 또한 BA와 2,4-D가 조합첨가된 배지에서는 신초발생에 효과적이었으며, 뿌리 발생은 감소하였다. 가장 효과적인 신초발생은 1.0 mg/L 2,4-D 와 0.5 mg/L BA가 조합 첨가되었을 때 얻어졌으며, 이러한 신초들은 1/2 MS기본배지에서 대부분 유식물체로 생육되었으며, 토양에서 정상적으로 적응하여 생장하였다.
황기 종자의 구조적 특성을 알아보고, 저장기간 및 온도와 함량 변화와 이들 요인이 발아에 미치는 영향을 구명하고자 실험한 결과를 요약하면 다음과 같다. 1. 황기의 경실 종자는 배꼽과 주공의 중앙 부분의 갈라진 선이 뚜렷하지 않고 찌그러진 것처럼 보였으며, 종피와 배의 간격이 크고 분리되어 있는 것처럼 보였다. 2. 저장기간이 길어지면 경실 종자가 많아지고 활력이 낮아졌으며 특히 28개월 이상 저장했을 때 흡수종자는 활력이 낮았으나 경실 종자는 변화가 적었다. 3. 저장기간이 길어질수록 Ca 함량이 증가하는 경향이었다.
화장품 원료로서 황기추출물을 산지 및 추출방법에 따라서 추출한 후, 보습효과 및 항산화효과를 시험하였다. 황기는 산지별로서 제천산, 정선산, 영주산, 태백산 및 중국산 1년 근을 사용하였다. 황기추출물에 포함된 유효성분의 한 지표성분으로서 선정한 formononetin을 HPLC 분석법을 이용하여 분석하였다. 항산화능 평가로서 자유라디칼 및 활성산소 소거효과의 경우에 75% 에탄을 수용액을 이용한 황기추출물은 정제수를 이용한 황기추출물과 비교하여 더 우수한 것으로 나타났다. 75% 에탄을 추출물의 자유라디칼 소거효과는 50% 소거효율에 대한 농도($IC_{50}$)가 2.162 mg/mL이었으며, 활성산소 소거효과의 경우는 $IC_{50}$ 값이 2.981 mg/mL로 나타났다. 특히 에틸아세테이트 분획층에 포함되어 있는 이소플라보노이드는 항산화제로 알려진 제니스테인과 유사한 자유라디칼 소거효과를 나타냈다. 황기추출물의 보습효과는 제천산 황기추출물이 가장 양호하였으며, 초음파추출을 이용한 황기추출물이 상대적으로 양호하였다.
Astragalus membranaceus Bunge is used in herbal medicine in Eastern Asian countries including Korea. In this study, we assessed the effects of A. membranaceus extract (AM) on the aquaporin-3 (AQP3) protein expression in HaCaT cells. AM did not affect viability of HaCaT cells. AQP3 expression and cell migration seem to be maximal at $100{\mu}g/mL$ concentration. Epidermal growth factor receptor (EGFR) kinase inhibitor, PD153035, blocked AM-induced AQP3 expression and cell migration. In addition, an 80% ethanol extracts of herbal prescription, SinhyoTakleesan (ST), which is composed of A. membranaceus, Angelicae gigantis, Glycyrrhiza glabra Linne, and Lonicera japonica Flos also induced AQP3 expression at $20{\mu}g/mL$ in HaCaT cells. Collectively, these results suggest that AM induce AQP3 expression via EGFR pathway.
Electron beam irradiation was applied to examine the microbial growth and qualities of vacuum-packaged Astragalus membranaceus, a Korean medicinal herb. Samples were irradiated at dose of 2, 4, 8, 12, and 16 kGy, respectively. Microbiological data on A. membranaceus showed that populations of total bacteria, yeast and mold, total coliforms were significantly reduced with increase of irradiation dose. Populations of microorganisms in A. membranaceus were decreased by 2-3 log cycles at 8 kGy irradiation. Color measurements showed that electron beam treatment caused negligible changes in Hunter color L, a, and b values of A. membranaceus. Sensory evaluations showed that there were no significant changes among the samples. These results suggest that electron beam irradiated A. membranaceus have better microbial safety and qualities, compared with the non-irradiated control.
The components were isolated from the root of Astragalus membranaceus and their structures were characterized as 3,4-methylenedioxypyrrolealdehyde, $7-O-{\beta}-D-glucopyranosyl$ 7, 3'-dihydroxy-4'-methoxy isoflavone and a naphthalene derivative on the basis of spectral and physical methods. $7-O-{\beta}-D-glucopyranosyl$ 7, 3'-dihydroxy-4'-methoxy isoflavone and the naphthalene compound showed protective effect on $CC_{l4}-induced$ cytotoxicity in primary cultured rat hepatocytes.
Phytochemical examination of seeds of Astragalus sinicus has led to the isolation and characterization of kaempferol $3-O-{\beta}-D-apiofuranosyl-(1{\rightarrow}2)-{\alpha}-L-rhamnopyranosyl-(1{\rightarrow}6)-{\beta}-D-glucopyranoside$ (1), quercetin $3-O-{\beta}-D-xylopyranosyl-(1{\rightarrow}2)-{\beta}-D-glucopyranoside$ (2), ampelopsin (3), ampelopsin $3'-O-{\beta}-D-xylopyranoside$ (4), ampelopsin $3'-O-{\beta}-Dxylopyranoside$ (5), myricetin (6), myricetin $3'-O-{\beta}-D-glucopyranoside$ (7), myricetin $3'-O-{\beta}-D-xylopyranoside$ (8). Antioxidative activity of these compounds was determined by measuring the radical scavenging effect on 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) radicals. Flavanonols(3,4, and 5) showed potent antioxidative activity.
황기 종자의 발아환경, 저장방법 및 저장기간에 따른 발아율 등을 알아보고자 실험한 결과는 다음과 같다. 1. 황기 종자의 발아에 적합한 온도는 ${20{\sim}25^{\circ}C}$였으며, 광조건이나 암조건 모두 발아가 양호하여 광무관발아(光無關發芽) 종자인 것으로 나타났다. 2. 발아율은 1년생과 2년생 식물, 그리고 채종시기별로 차이가 없었다. 3. $-20^{\circ}C$와 $-4^{\circ}C$에 저장한 종자는 15개월까지 발아율이 80%이상이었으나 $4^{\circ}C$와 실온에 저장할 때는 4개월 이후부터 발아율이 낮아졌다. 4. 실온에서 4개월 저장한 종자는 발아세가 80% 이상이었으나 16개월 저장할 때는 57%, 28개월 저장시는 23%이었으며 발아기간도 40일 이상 길었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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