This study was carried out to investigate the influences of cultural conditions of koji on the production of organic acid during rice-koji making by Aspergillus awamori var. kawachii which is now widely used as koji-mold in brewing Takju and Yakju in Korea. The optimum temperature for the germination of the conidia of the mold was 35'8, and the time required for germination at this temperature was 8 hours. Rapid germination occurred when the water content of steamed rice was above 40%, but germination retardation occurred markedly below 35%. The optimum cultural temperature for the production of organic acid was 32$^{\circ}C$, and the production of organic acid was markedly restricted at 36$^{\circ}C$ and 4$0^{\circ}C$. It was effective for the high production of both saccharogenic amylase and organic acid to shift the cultural temperature from initial 36$^{\circ}C$ to 32$^{\circ}C$ after 20~25 hours of cultivation. Initial water content suitable to the production of organic acid was 40% in steamed rice, but its production was markedly restricted below 30% of water content. When the quantity of conidial inoculation was too small, the production of organic acid was low in initial phase, but it was retrived at later period. Acid production was markedly restricted together with the increase in koji thickness.
쌀과 같은 곡류는 전분질을 당분으로 전환시켜 술을 제조하여야 하므로 미생물이 생성하는 효소가 필요한데 그 효소원이 누룩이며 누룩은 주류의 품질이나 생산량에 영향을 미치는 가장 중요한 요소라고 할 수 있다. 본 연구는 전국44개 지역의 누룩에서 순수 분리된 89종의 곰팡이 중 효소역가와 당화력이 비교적 뛰어난 10종(Aspergillus sp. SH-412 Heunghae, Aspergillus sp. SH-422 Ulsan, Rhizopis sp. SH-606 Imdeok, Aspergillus sp. SH-607 Yhesan, Aspergilus sp. SH-613 Wolseong, Rhizopus sp. SH-654 Uncheon, Aspergillus sp. SH-660 Jeonkok, Aspergillus sp. SH-667 Dongseong, Aspergillus sp. SH-669 Uncheon, Aspergillus sp. SH-696 Daecheon)과 대조균주로 Aspergillus kawachii CF1002 그리고 효모 Saccharomyces cerevisiae를 사용하셨으며 탁주제조 중 균주별 술덧의 산도, 환원당, 아미노산도와 제조된 완성주의 유기산, 유리아미노산, 유리당, 휴젤유 및 색도를 HPLC, GC Mass, 색차계로 측정한 결과 다음과 같은 결론을 얻었다. 균주별 술덧의 주정도는 모든 실험구에서 Aspergillus kawachii보다 높았으며 특히 Aspergillus sp. SH-422는 14.9%로 가장 수율이 좋았다. 환원당은 Aspergillus sp. SH-613이 0.49%로 가장 높았고 Aspergillus sp. SH-422는 0.37%로 가장 낮았으며 산도는 시간의 경과에 따라 감소했으며 술덧 발효중 아미노산도는 시간의 경과에 따라 약간 상승 후 다소 낮아지는 경향을 보였다. 각 균주별 술덧의 유기산은 tataric acid, malic acid, succinic acid, lactic acid, acetic acid가 검출되었으며 lactic acid 함량이 2.0∼3.2g/100ml로 가장 많이 검출되었다. 유기산은 Aspergillus sp. SH-669가 가장 높게 확인되었으며 Aspergillus sp. SH-607이 가장 낮게 분석되었다. 술덧의 주 아미노산은 histidine, alanine, glutamic acid, leucine, tryptophan순으로 검출되었으며 특히 alanine은 주류에 단맛을 주는 성분으로 모든 실험구에서 많은 양이 검출되었다. 각 균주별 술덧의 유리당은 glucose가 가장 많이 검출되었으며 Fusel oil은 iso-butyl alcohol과 iso-pentyl alcohol 이 가장 많이 검출되었다. 한편 균주별 술덧의 색차를 측정한 결과 L값은 63.33∼41.98, a값은 0.09∼-3.47, b값은 17.41∼4.90으로 나타났다.
본 연구는 Monascus purpureus (Mp), Aspergillus oryzae (Ao), Aspergillus kawachii (Ak) 및 Rhizopus oryzae (Ro) 균주로 Cordycepin-고함유 동충하초(Cordyceps militaris)(CM${\alpha}$)를 발효시켜 수용성 추출물을 얻어 페놀화합물 및 플라보노이드 농도와 항산화 및 티로시나제 저해 활성을 측정한 결과 Ak로 발효시킨 CM${\alpha}$ (AkF-CM${\alpha}$)에서 각각 46 mg/g 및 093 mg/g과 6274% 및 7997%로 가장 우수한 효과를 나타내었다. 이러한 결과로부터 AkF-CM${\alpha}$를 선택하여 멜라닌 세포(B16F0 mouse melanoma cell)에서 미백효과를 검토하였다. 양성 대조구 arbutin 처리 B16F10 melanoma 세포는 92% 이상의 세포 생육과 43%의 멜라닌 생성 억제 효능을 보였고, AkF-CM${\alpha}$ 1, 3 및 5 mg/ml 처리 시 멜라닌 생성은 각각 35, 45 및 53% 억제되었다. 또한 AkF-CM${\alpha}$은 멜라닌 세포 내 tyrosinase 활성과 mushroom tyrosinase 활성 모두를 저해시켰고, 멜라닌 생성 관련 tyrosinase 단백질 발현량도 무첨가군에 비해 처리 농도 의존적으로 억제되었다. 이상의 결과에 따라 Aspergillus kawachii 균주로 발효시킨 Cordycepin-고함유 동충하초(Cordyceps militaris)의 수용성 추출물은 미백 화장품 소재로 개발 가능성이 높은 것으로 사료된다.
Kim, Min-A;Lee, Han-Saem;Chon, So-Hyun;Park, Jeong-Eun;Lim, Yu-Mi;Kim, Eun-Jeong;Son, Eun-Kyung;Kim, Sang-Jun;So, Jai-Hyun
Journal of Applied Biological Chemistry
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제62권1호
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pp.39-50
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2019
Mitogen-activated protein (MAP) kinases play an important role in cell growth and differentiation, as well as the modulation of proinflammatory cytokines. The objective of this study was to examine the increase in the anti-inflammatory effect of Gentiana scabra Bunge (GSB), due to bioconversion with the Aspergillus kawachii crude enzyme, via inhibition of the $NF-{\kappa}B$ signaling and MAP kinase pathways in RAW 264.7 cells. The expression of inducible nitric oxide synthase (iNOS) and cyclooxygenase-2 in RAW 264.7 cells treated with the GSB ethyl acetate fraction bioconverted with A. kawachii crude enzyme (GE-BA), was dramatically suppressed as compared to GSB ethyl acetate fraction non-bioconverted with the A. kawachii crude enzyme (GE-UA). The phosphorylation of p38, extracellular signal-regulated kinases, and inhibitory ${\kappa}B$ in RAW 264.7 cells treated with GE-BA was further suppressed, as compared to exposure to GE-UA. Moreover, the mRNA expression of interleukin 6, interleukin 1-beta, and tumor necrosis $factor-{\alpha}$ was further suppressed by GE-BA, compared to GE-UA. Similarly, anti-oxidant activities, such as 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl hydrate and 2,2'-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulphonic acid) radical scavenging activity, of GE-BA were further increased compared to GE-UA. These observations demonstrate that the anti-oxidant and anti-inflammatory activities of GSB ethyl acetate fraction increases as a result from bioconversion with the A. kawachii crude enzyme.
Kim, Ah-Jin;Choi, Jung-Nam;Kim, Ji-Young;Kim, Hyang-Yeon;Park, Sait-Byul;Yeo, Soo-Hwan;Choi, Ji-Ho;Liu, Kwang-Hyeon;Lee, Choong-Hwan
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제22권1호
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pp.100-106
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2012
In this study, the metabolite profiles of three Aspergillus strains during rice koji fermentation were compared. In the partial least squares discriminant analysis-based gas chromatography-mass spectrometry data sets, the metabolite patterns of A. oryzae (KCCM 60345) were clearly distinguished from A. kawachii (KCCM 60552) and only marginal differences were observed for A. oryzae (KCCM 60551) fermentation. In the 2 days fermentation samples, the overall metabolite levels of A. oryzae (KCCM 60345) were similar to the A. oryzae (KCCM 60551) levels and lower than the A. kawachii (KCCM 60552) levels. In addition, we identified discriminators that were mainly contributing tyrosinase inhibition (kojic acid) and antioxidant activities (pyranonigrin A) in A. oryzae (KCCM 60345) and A. kawachii (KCCM 60552) inoculated rice koji, respectively. In this study, we demonstrated that the optimal inoculant Aspergillus strains and fermentation time for functional rice koji could be determined through a metabolomics approach with bioactivity correlations.
Asp. kawachii균을 파종하여 만든 누룩으로 담금 한 탁주 술덧의 발효과정 중 휘발성 향기성분을 GC와 GC/MS를 사용하여 분석 동정한 결과 ester 22종, alcohol 20종. acid 10종, aldehyde 8종, 기타 3종 등 63종의 향기 성분이 동정되었다. 동정된 향기성분 수는 담금 일에 ester 13종, alcohol 13종을 비롯한 총 32종이었으나, 발효 2일에 ester 6종, alcohol 3종을 포함한 13종이 추가 검출되어 45종으로 증가되었다. 발효 12일에는 63종으로 향기 성분수가 최대에 달하였다. Ethanol, 3-methyl-1-butanol, 2-methyl-1-propanol, benzeneethanol등 alcohol류 12종, ethyl acetate, ethyl caprylate, ethyl butyrate 등 ester류 12종, acetaldehyde, iso-butyl aldehyde등 aldehyde 3종, octanoic acid, 1,2-benzenedicarboxylic acid 등 acid 2종, 총 29종은 발효 전 과정을 통하여 검출되었다. 향기 성분의 면적비율은 ethanol이 72.18-91.32%로 발효 전 기간을 통하여 탁주 술덧에서 타 성분보다 월등히 높았다. Ethanol을 제외하고 발효 전 과정을 통하여 면적비율이 높은 성분은 ethyl caprylate, 3-methyl-1-butanol, benzeneethanol 이었다. 이외 발효기간에 따라서 2-methyl-1-propanol, 1-hexanol, 2, 3-butanediol(D.L), 1-dodecanol, 2-phenylethyl acetate, ethyl acetate, monoethyl butanoate, diethyl succinate, ethylbenzoic acid, acetic acid, iso-butylaldehyde 등의 성분도 동종 계열간의 향기성분 중 면적비율이 다소 높게 나타나기도 하였다.
단백질 분해 활성, 이화학적 특성 및 생리활성을 검토한 결과 우수한 효능을 나타낸 Bacillus subtilis 및 Aspergillus kawachii 균주를 이용하여 Orotic acid-유발 지방간의 개선 효과를 알아보기 위해 발효된 누에 분말을 식이에 5% 수준으로 첨가하였다. 발효 누에 분말은 Orotic acid 지방간 유발 흰쥐의 간 조직 및 혈청 중성지질 농도를 낮춰주고, 혈청 지질농도를 정상 수준으로 올려주어 지방간 개선에 도움을 주었다. SP 투여군과 AFSP 투여군에 반해, BFSP 투여군에서 지질대사와 관련된 개선 효과를 보였고, 간 조직의 병리학적 관찰결과에서도 BFSP 투여군이 간소엽을 구성하고 있는 간 세포들이 전반적으로 균일하게 배열되어 있어 정상군(N)의 간 소견과 비슷한 양상을 보여 지방간의 개선효과가 있는 것으로 보였다. 이러한 결과를 바탕으로 발효 누에 분말은 향후 지방간 개선효능을 가지는 건강식품 개발 가능성이 높은 소재로 판단되어 진다.
By treating crude enzyme extract from Aspergillus kawachii, the liquiritigenin content in the licorice (Glycyrrhizae Radix) was significantly increased. The liquiritigenin content reached its maximum level (45.7 mg/g licorice extract) after 60 min of incubation with the crude enzyme extract at $37^{\circ}C$, while the inactivated crude enzyme treated control contained trace amount (about 0.11 mg/g) of liquiritigenin. The enzyme-treated licorice extract inhibited more than 50% DPPH radical at 100 ppm and this was about two times higher activity compared to the enzyme-untreated control.
Cyanidin-3-glucoside (C3G) has been known to be more bioavailable than cyanidin-3-rutinoside (C3R), the most abundant anthocyanin in black raspberry (Rubus occidentalis). The aim of this study was to enhance the bioavailability of anthocyanins in black raspberry by cleaving ʟ-rhamnose in C3R using crude enzyme extracts (CEEs) from Aspergillus usamii KCTC 6956, A. awamori KCTC 60380, A. niger KCCM 11724, A. oryzae KCCM 12698, and A. kawachii KCCM 32819. The enzyme activities of the CEEs were determined by a spectrophotometric method using ρ-nitrophenyl-rhamnopyranoside and ρ-nitrophenyl-glucopyranoside. The CEE from A. usamii had the highest α-ʟ-rhamnosidase activity with 2.73 U/ml at 60℃, followed by those from A. awamori and A. niger. When bioconversion of C3R to C3G in black raspberry was analyzed by HPLC-DAD, the CEEs from A. usamii and A. awamori hydrolyzed 95.7% and 95.6% of C3R to C3G, respectively, after 2 h incubation. The CEEs from A. kawachii and A. oryzae did not convert C3R to C3G in black raspberry.
This study has been aimed to determine the ecological factors with relationship to the Jongkok production in view of fermentation technology by means of some strains, Asp. kawachii, which is now preserved by the author and the following factors are included during the study; inorganic salts, nitrogen, sugar, water contents and temperature. The results, are as follows: (a) Sugar among other above-mentioned factors is increasingly affecting the number of the short type of conidiophore on culture medium and the conidiophore is increased by direct ratio until glucose concentration of 50%, at which concentration is mostly effective for the short type of conidiophore, while other factors did not affect on it. (b) Until glucose concentration of 50% sugar component of culture medium is favorable for the spore formation of Asp. kawachii by direct ratio. And peptone or asparagine on nitrogen medium, calcium-phosphate among other inorganic salts, wheat bran and rice branare also favorable, but other factors rientioned earlier show no relationship with the spore formation. Sugar, however, also related with the spore color clearness of crimson and light brown, and spore color is mostly clear at the point of glucose concentration until 50%. And asparagine on nitrogen medium, calcium phosphate among other inorganic salts, rice bran did all affect on the color clearness, while other factors did not concern with color clearness. (c) Water, sugar and temperature have related with the acid formation which is promoted, by direct ratio at the point of water-saturated condition and glucose concentration of 50%, while temperature at $25^{\circ}C$favorably affected on the acid formation which is increased by inverse ratio at the temperature$25^{\circ}C$ to $45^{\circ}C$ And pH did not relate with the acid formation. (d) Cylindrical plate method devised by the author is mostly favorable for the preservation and isolation of culture, compared with the traditional slant medium method.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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