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아이스플랜트의 항산화 및 HCT116 인체 유래 대장암세포 성장억제 활성 (Antioxidant and growth inhibitory activities of Mesembryanthemum crystallinum L. in HCT116 human colon cancer cells)

  • 서진아;주지형
    • Journal of Nutrition and Health
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    • 제52권2호
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    • pp.157-167
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    • 2019
  • 본 연구에서는 ice plant의 ethanol 추출물과 분획물의 항산화 및 대장암세포 성장억제 활성을 in vitro 수준에서 평가하는 것을 목적으로 하였다. Ethanol 추출물의 총 폴리페놀 함량 (3.7 mg GAE/g), 총 카로티노이드 함량 ($13.2{\mu}g/g$), DPPH 라디칼 소거활성 (21.0%), 철 환원력 (21.0%)보다 butanol 분획물의 총 폴리페놀 함량 (5.4 mg GAE/g), 총 카로티노이드 함량 ($86.6{\mu}g/g$), DPPH 라디칼 소거활성 (34.9%), 철 환원력 (80.8%)이 더 높았다. 또한 HCT116 대장암세포에서 세포 내 활성산소종 수준을 감소시키거나 세포 성장을 억제하는데 있어서 ethanol 추출물보다 butanol 분획물의 활성이 더 컸다. 대장암세포의 성장을 억제하는데 있어서 butanol 분획물이 ethanol 추출물보다 더 효과적이었던 것은 butanol 분획물의 apoptosis 유도활성이 ethanol 추출물의 활성보다 더 컸고 butanol 분획물만이 G2/M기억류활성을 나타냈기 때문인 것으로 생각된다. 앞으로 이와 같은 결과를 초래하는 주요 활성성분을 분리 동정하고 ice plant의 항산화 활성 및 대장암세포 성장억제 효과가 in vivo 수준에서 재현되는지 검증하며 이와 관련된 세부기전을 탐색하는 심도 있는 연구가 필요할 것으로 생각된다.

Immunocontraceptive Effects in Male Rats Vaccinated with Gonadotropin-Releasing Hormone-I and -II Protein Complex

  • Kim, Yong-Hyun;Park, Byung-Joo;Ahn, Hee-Seop;Han, Sang-Hoon;Go, Hyeon-Jeong;Lee, Joong-Bok;Park, Seung-Yong;Song, Chang-Seon;Lee, Sang-Won;Choi, In-Soo
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제29권4호
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    • pp.658-664
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    • 2019
  • Immunocontraception has been suggested as an optimal alternative to surgical contraception in animal species. Many immunocontraceptive vaccines have been designed to artificially produce antibodies against gonadotropin-releasing hormone-I (GnRH-I) which remove GnRH-I from the vaccinated animals. A deficiency of GnRH-I thereafter leads to a lack of gonadotropins, resulting in immunocontraception. In this study, we initially developed three immunocontraceptive vaccines composed of GnRH-I, GnRH-II, and a GnRH-I and -II (GnRH-I+II) complex, conjugated to the external domain of Salmonella Typhimurium flagellin. As the GnRH-I+II vaccine induced significantly (p < 0.01) higher levels of anti-GnRH-I antibodies than the other two vaccines, we further evaluated its immunocontraceptive effects in male rats. Mean testis weight in rats (n = 6) inoculated twice with the GnRH-I+II vaccine at 2-week intervals was significantly (p < 0.01) lower than in negative control rats at 10 weeks of age. Among the six vaccinated rats, two were non-responders whose testes were not significantly reduced when compared to those of negative control rats. Significantly smaller testis weight (p < 0.001), higher anti-GnRH-I antibody levels (p < 0.001), and lower testosterone levels (p < 0.001) were seen in the remaining four responders compared to the negative control rats at the end of the experiments. Furthermore, seminiferous tubule atrophy and spermatogenesis arrest were found in the testis tissues of responders. Therefore, the newly developed GnRH-I+II vaccine efficiently induced immunocontraception in male rats. This vaccine can potentially also be applied for birth control in other animal species.

국내 랜덤 챗 어플리케이션에서 사용자의 행위에 따른 아티팩트 분석 (Artifacts Analysis of Users Behavior in Korea Random Chat Application)

  • 서승희;남기훈;김역;이창훈
    • 디지털포렌식연구
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    • 제12권3호
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    • pp.1-8
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    • 2018
  • 랜덤 챗 어플리케이션은 사용자들을 무작위로 연결하고 문자, 음성, 영상 채팅하도록 서비스를 제공함으로써 연인 또는 배우자를 찾을 수 있도록 돕는 소셜 데이트 어플리케이션의 일종이다. 최근 저렴한 비용으로 빠르고 편리하게 이성을 만날 수 있다는 점에서 세계적으로 그 수요가 급증하고 있다. 하지만 악의적 의도를 가진 이들에 의해 조건만남(성매매), 마약거래의 중개 창구로 활용되고 있으며 앱 사용자들 간의 실제 만남 이후 발생하는 각종 사건들로 인해 강력 범죄의 원인으로 작용하고 있다. 이러한 사실을 비추어 볼 때 랜덤 챗 어플리케이션은 조건 만남(성매매)이나 마약 거래에 대한 입증 자료나 만남 후 발생한 강간, 납치, 살인 등의 용의자 검거를 위한 각종 단서를 제공할 가능성이 높다. 이에 따라 랜덤 챗 어플리케이션에 대한 디지털 포렌식 관점에서의 분석이 필요하나 현재 관련 연구는 전무하다. 따라서 본 논문에서는 랜쳇, 앙톡, 썸팅, 다톡, 모두의 채팅, 돛단배 등 국내 랜덤 챗 어플리케이션 6종을 사용자 행위 관점에서 분석하였다. 또한 그 결과로 채팅 메시지 송수신, 채팅방 추가/삭제, 친구 추가/차단, 계정 생성 등의 사용자 행위에 따른 아티팩트로 매시지 송수신 시간, 내용, 송수신자, 친구 프로필, 계정 생성 시간 등을 확인하였다.

유방암 세포 주 MCF-7에서의 녹차 추출물이 p53 경로에 미치는 영향 (Effects of Green Tea Extract on the p53 Pathway in the MCF-7 Breast Cancer Cell Line)

  • 곽인석
    • 생명과학회지
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    • 제28권11호
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    • pp.1316-1320
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    • 2018
  • 녹차(GT) 추출물의 효과를 인간 유방암 유래 세포인 MCF-7 세포를 사용하여 조사 하였다. GT추출물의 세포 독성 효과를 MTT 방법을 사용하여 관찰한 결과, MCF-7 세포는 현저한 세포 독성 효과를 보였고, 이 독성 효과는 GT추출물 농도 의존적으로 증가하였다. p53과 관련 단백질인 p21/cip1과 CDK2의 연관성을 조사하기 위해 GT추출물 처리 후 웨스턴 분석법을 통해 이들 단백질의 발현을 조사하였다. GT추출물 처리 후, MCF-7 세포에서 p53 단백질의 양은 농도에 따라 현저하게 증가 하였다. p21/cip1 단백질의 발현은 낮은 농도의 GT추출물에서 증가되며, 고농도에서도 감소하지 않았다. 그러나 CDK2의 단백질의 양은 높은 농도의 GT추출물에서 CDK2 발현의 급격한 감소가 관찰되었다. 이 결과는 GT추출물의 처리는 MCF-7 세포에서 p53와 p21/cip1를 증가시켜, 그 결과로 활성화 된 p21/cip1는 CDK2의 발현을 억제 함을 나타내고 있다. GT추출물이 MCF-7 세포의 세포주기에 어떤 영향을 미치는지 확인하기 위하여 FACS 분석으로 관찰한 결과, MCF-7 세포에서 세포주기의 G1 단계가 점차 증가하는 결과를 보였다. 이 결과는 GT추출물의 유방암 세포에서의 항암 효과는 세포주기의 G1 단계에서 MCF-7 세포를 정지시키는 p53에 의해 조절된다는 사실을 명확하게 보여 주고 있다.

Potassium cyanate에 의해 조절되는 사람 대장암 세포의 방사선 감수성 변화 (Radio-sensitivity of Human Colorectal Cancer Cell is Regulated by Potassium Cyanate)

  • 양은주;장정현
    • 한국방사선학회논문지
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    • 제13권1호
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    • pp.125-132
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    • 2019
  • Potassium cyanate는 무기화합물로 단백질의 번역 후 과정에서 카바밀화(carbamylation)을 유도할 수 있고 이러한 카바밀화 반응은 다양한 질병 및 조건에서 세포의 사멸과 관련이 있다. 이전 연구결과에서 KCN은 사람 대장암 세포주인 HCT 116세포의 방사선 감수성을 향상시키는 것을 확인하였지만 그 기전을 명확히 규명하기에는 많이 부족한 실정이다. 본 연구에서는 방사선에 다소 저항성을 가지는 대장암 세포에서 KCN이 방사선 감수성을 향상시키고 세포사멸 시키는 기전을 확인하기 위해 2 mM의 KCN 처리 후 저 선량의 광자선을 조사하여 세포주기, 세포 생존율, 세포 사멸 관련 단백질(caspase-1, PARP) 발현량, $TNF-{\alpha}$ 분비 및 $TNF-{\alpha}$ 관련 전사인자($NF-{\kappa}B$)의 연관성을 확인하였다. 그 결과 KCN 처리 후 광자선을 조사한 세포에서 caspase-3 및 PARP의 활성이 증가하고 이는 세포주기의 정지와 세포사멸을 유도하였다. 또한 이 과정에서 DNA 전사인자인 $NF-{\kappa}B$에 의해 세포 외로 $TNF-{\alpha}$를 지속적으로 분비하여 세포사멸에 관여함을 확인하였다. 이러한 결과들을 토대로 KCN이 radiosensitizer로서 작용할 수 있는 가능성이 있다고 사료된다.

항암제 tubastatin A에 의한 생쥐 미성숙 난모세포의 성장과 발달에 미치는 효과 (Effects of an Anti-cancer Drug, Tubastatin A, on the Growth and Development of Immature Oocytes in Mice)

  • 최윤정;민계식
    • 생명과학회지
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    • 제29권1호
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    • pp.105-111
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    • 2019
  • Histone deacetylase (HDAC)-6은 전사조절 및 세포질 내 다양한 단백질들과의 상호작용을 통하여 난소암의 유발에 관여한다. 최근, HDAC-6을 표적으로 하는 특이적 억제제를 활용하여 암세포의 신호전달경로를 차단함으로써 새로운 항암제로서의 개발을 모색하고 있다. 특히, 난소암 치료를 위한 화학요법에서는 생식세포에 미치는 영향이 하나의 중요한 난제가 될 수 있다. 그러나, HDAC-6 억제제가 난소암세포 이외의 생식세포에 미치는 영향에 대한 연구는 아직 미흡한 실정이다. 따라서, 본 연구에서는 HDAC-6 억제제의 하나인 tubastatin A (TubA)가 생쥐의 난소 내 미성숙 난자에 미치는 영향을 RNA sequencing 분석을 통하여 검증하였다. 이러한 유전자 집합을 이용한 통계적 분석은 기존의 개별 유전자분석의 한계를 극복하여 대량의 생물학적 정보를 산출함으로써, 세포 내 신호전달경로와 같은 복잡한 생물학적 변화상태를 보다 더 광범위하고 민감하게 파악할 수 있을 뿐만 아니라 의미있는 결과의 도출에 도움을 줄 수 있다. Gene set enrichment analysis (GSEA) 결과, 세포주기와 감수분열의 조절 및 진행에 관여하는 gene sets의 발현이 germinal vesicle (GV)과 비교하여 TubA 처리군에서 대부분 감소되었다. 또한, ingenuity pathway analysis (IPA)를 통하여 TubA가 난모세포 내 p53 및 pRB의 발현을 증가시키고 CDK4/6 및 cyclin D의 발현을 감소시킬 뿐만 아니라, G2/M 단계의 DNA checkpoint 조절에 관여하는 유전자들의 발현을 증가시킴을 확인하였다. 이러한 결과는 TubA가 난소 내 미성숙 난자의 DNA 손상과 세포주기 관련 신호전달경로 유전자들의 발현변화를 유도함으로써, 세포주기의 중지와 세포사멸을 초래할 수 있음을 제시한다. 따라서, 특히 생식주기 이전의 난소암을 표적으로 하는 HDAC-6 억제제를 이용한 항암제의 개발에 있어 난소 내 미성숙 난자의 정상적인 성장과 발달을 위한 대안적 고려가 필요할 것으로 사료된다.

Combination Therapy with a PI3K/mTOR Dual Inhibitor and Chloroquine Enhances Synergistic Apoptotic Cell Death in Epstein-Barr Virus-Infected Gastric Cancer Cells

  • Kim, Mi-Young;Kruger, Annie J.;Jeong, Ju-Yeon;Kim, Jaehee;Shin, Phil kyung;Kim, Sun Young;Cho, Joo Young;Hahm, Ki Baik;Hong, Sung Pyo
    • Molecules and Cells
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    • 제42권6호
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    • pp.448-459
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    • 2019
  • The phosphoinositide 3-kinase/protein kinase B/mammalian target of rapamycin (PI3K/AKT/mTOR) signaling pathway is a promising target for gastric cancer (GC) treatment; however the efficacy of PI3K/mTOR dual inhibitors in GC has not yet been maximized. Additionally, the effect of autophagy regulation by PI3K/mTOR dual inhibitors has not been clearly elucidated in GC treatment. We aimed to show that our newly developed PI3K/mTOR dual inhibitor, CMG002, when combined with an autophagy inhibitor, chloroquine (CQ), potently induces effective cancer cell death in Epstein-Barr virus (EBV)-associated gastric cancer (EBVaGC) cells, where both the PI3K/AKT/mTOR and autophagy pathways play important roles in disease pathogenesis. EBV- and mock-infected AGS and NUGC3 GC cell lines were treated with CMG002 +/- CQ. PI3K/AKT/mTOR signaling pathway mediators, cellular apoptosis and autophagy markers were confirmed by Western blot assay. Cell viability was assessed using the Cell Counting Kit-8 (CCK-8) assay. CMG002 effectively blocked the PI3K/AKT/mTOR pathway by markedly decreasing phosphorylation of AKT and its downstream mediator S6. CMG002 induced G0/G1 cell cycle arrest and enhanced apoptotic cell death in AGS and NUGC3 cells, particularly EBV-infected cells compared with mock-infected cells, as confirmed by flow cytometric analyses and TUNEL (terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP nick end labeling) assays. The combination of CMG002 plus CQ synergistically increased apoptotic cell death in EBV-infected GC cell lines when compared with CMG002 alone (P < 0.05). Our results suggest that the new PI3K/mTOR dual inhibitor, CMG002, when used in combination with the autophagy inhibitor, CQ, provides enhanced therapeutic efficacy against EBVaGC.

Novel method of histopathological analysis after testicular sperm extraction in patients with nonobstructive and obstructive azoospermia

  • Cito, Gianmartin;Coccia, Maria Elisabetta;Picone, Rita;Nesi, Gabriella;Cocci, Andrea;Dabizzi, Sara;Garaffa, Giulio;Fucci, Rossella;Falcone, Patrizia;Bertocci, Francesco;Santi, Raffaella;Criscuoli, Luciana;Serni, Sergio;Carini, Marco;Natali, Alessandro
    • Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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    • 제45권4호
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    • pp.170-176
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    • 2018
  • Objective: To assess whether the "testicular pool" could be used for histological analysis and whether it gave more accurate information than the standard testicular biopsy. Methods: Between January 2017 and March 2018, this single-center prospective study included 60 azoospermic men undergoing conventional bilateral testicular sperm extraction. Six samples were excised from each testicle and transferred to an embryologist. One additional biopsy was randomly taken from each testis for a histological analysis. After processing, the testicular pool was also sent for a histological analysis, which showed normal spermatogenesis (NS), hypospermatogenesis (HYPO), maturation arrest (MA), Sertoli cell-only syndrome (SCOS), and tubular atrophy (TA). Results: Twenty of the 60 patients (33.3%) had obstructive azoospermia (OA), while the remaining 40 (66.6%) had nonobstructive azoospermia. Their mean age was 40.5 years. All patients with OA had previously undergone unsuccessful testicular fine-needle aspiration. Successful sperm retrieval (SSR) occurred in 93.3% of patients. Histological analysis of the testicular biopsy revealed NS in 12 patients (20%), HYPO and TA in 28 patients (46.6%), MA in eight patients (13.3%), and SCOS in 12 patients (20%). The testicular pool analysis showed NS in 12 patients (20%), HYPO and TA in 44 patients (73.3%), MA in four patients (6.6%), and SCOS in no patients. In four patients with MA (6.6% of the total sample) and 12 patients with SCOS (20% of the total sample) according to the standard testicular biopsy, the embryologist found SSR with cryopreservation. Overall, in 44 patients (73.3%), the testicular pool analysis confirmed the histological findings of the standard testicular biopsy. In the 16 cases (26.6%) with a discrepancy between the single-biopsy histological findings and SSR, the testicular pool analysis confirmed the embryological data on SSR. Conclusion: The testicular pool proved to be easily analyzable, practical, manageable, and more accurate for predicting sperm retrieval than standard testicular biopsy.

급성 중독에서 체외순환보조장치의 적용 (Extracorporeal Life Support in Acute Poisoning)

  • 이시진;한갑수;이의중;김도현;박경애;이지영;김수진;이성우
    • 대한임상독성학회지
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    • 제16권2호
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    • pp.86-92
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    • 2018
  • Purpose: Cardiovascular or respiratory complications of acute intoxication are the most common causes of mortality. Advanced cardiac life support (ACLS) or specific antidotes help manage these cardiac or respiratory complications in acute intoxication. On the other hand, some cases do not respond to ACLS or antidotes and they require some special treatment, such as extracorporeal life support (ECLS). ECLS will provide the chance of recovery from acute intoxication. This study examined the optimal timing of ECLS in acute intoxication cases. Methods: This paper is a brief report of a case series about ECLS in acute poisoning. The cases of ECLS were reviewed and the effects of ECLS on the blood pressure and serum lactate level of the patients were analyzed. Results: A total of four cases were reviewed; three of them were antihypertensive agent-induced shock, and one was respiratory failure after the inhalation of acid. The time range of ECLS application was 4.8-23.5 hours after toxic exposure. The causes of ECLS implementation were one for recurrent cardiac arrest, two for shock that did not respond to ACLS, and one for respiratory failure that did not respond to mechanical ventilator support. Three patients showed an improvement in blood pressure and serum lactate level and were discharged alive. In case 1, ECLS was stared at 23.5 hours post toxic exposure; the patient died due to refractory shock and multiple organ failure. Conclusion: The specific management of ECLS should be considered when a patient with acute intoxication does not recovery from shock or respiratory failure despite ACLS, antidote therapies, or mechanical ventilator support. ECLS improved the hemodynamic and ventilator condition in complicated poisoned patients. The early application of ECLS may improve the tissue perfusion state and outcomes of these patients before the toxic damage becomes irreversible.

가슴압박 단독 심폐소생술 교육법이 일반 시민들의 심폐소생술 시행 지식 유지에 미치는 영향 (Effects of chest compression only cardiopulmonary resuscitation training on retention of correct cardiopulmonary resuscitation knowledge)

  • 최승혁;류현욱;이동언;문성배;안재윤;김종근;박정배;서강석
    • 대한응급의학회지
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    • 제29권6호
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    • pp.568-577
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    • 2018
  • Objective: Performing high quality cardiopulmonary resuscitation (CPR) is important for improving the survival rate with a good neurological outcome and fewer complications. The retention of accurate CPR knowledge is essential for providing high quality CPR. This study examined the effects of chest compression only CPR training on the retention of correct CPR knowledge. Methods: In December 2016, an interview survey to target the study population was conducted by trained interviewers, using a structured questionnaire. The respondents' general characteristics, status of CPR education, and knowledge and willingness regarding CPR were investigated. Pearson's chi-square tests and multivariate logistic regression analyses were used to determine which education-related factors affected the correct skill knowledge of performing CPR. Results: Among the respondents, there are 80 persons (17.4%) who answered correctly in the questions regarding the skills of performing CPR. The respondents who had a willingness to perform CPR to family and strangers were 90.2% and 44.9% respectively. Through multivariable analysis, the factors related to correct skill knowledge in performing CPR in the didactic with practice group were people who had undergone CPR training within 2 years (odds ratio [OR], 2.293; 95% confidence interval [CI], 1.311-4.009), and person who had undergone chest compression only CPR training (OR, 2.044; 95% CI, 1.033-4.042). Conclusion: Chest compression only type of CPR training and the experience of CPR education within 2 years were associated with accurate skill knowledge of performing CPR.