여름철 경북과 강원지역 농업생태계의 화분매개네트워크를 조사한 결과 총 2,381개의 상호작용이 나타났으며, 식물 14목 17과 28속 30종에 대해 화분매개자는 4목 52과 129속 154종이 나타났다. 전체 화분매개자 중 양봉꿀벌이 50% 이상 우점하고 있었고 도라지, 들깨, 메밀 등이 식물 종 중에서 가장 많은 참여빈도수를 보였다. 화분매개자 다양성은 딱정벌레 분류군이 34%로 가장 높았으나, 상호작용 참여빈도수는 벌목이 66%로 가장 높게 나타났다. 딱정벌레목과 파리목에서 루드베키아를 선호하는 것이 공통적으로 나타났고, 벌목과 나비목에서는 도라지를 가장 선호한 것으로 나타났다. 딱정벌레목을 제외한 벌목, 파리목, 나비목에서는 도라지를 선호하는 것이 공통점으로 나타났다. 모듈화는 9개의 집단이 나타났으며, 양봉꿀벌이 모듈 간의 연결에 영향을 주는 주요 허브종으로 나타났다. 이번 연구로 여름철 경북과 강원지역 농업생태계화분매개네트워크의 구조를 확인할 수 있었고, 화분매개자들의 주요 선호도와, 우점 종들을 알 수 있었다. 이 결과는 작물별 필요 화분매개자를 확인할 수 있고, 화분매개서식처 조성을 통한 화분매개자 보호 증식의 기초 자료로 활용될 수 있다.
주남 습지대($6.02km^2$) 곤충상의 다양도, 우점도, 풍부도 등을 습지대 내 3곳의 습지에서 조사하였다. 조사방법으로는 육안조사와 쓸어잡기는 2010년, 말레이즈 트랩 조사는 2011년, 유아등 조사와 함정트랩 조사는 2012년에 실시하였다. 총 14목(目) 141과(科) 574종(種)의 9,269 개체 (딱정벌레목 36.3%, 나비목 21.3%, 잠자리목 13.9%)가 조사되었다. 종수(種數)로 비교해 보면, 나비목이 31.2%로 가장 높았고, 그 다음이 딱정벌레목(28.0%) 노린재목(12.9%) 순이었다. 우점종(총 조사개체에 대한 각 종의 개체수 비율)은 애넓적물땡땡이(Enochrus simulans, 7.9%), 꼬마줄물방개(Hydaticus grammicus, 4.3%), 일본잎벌레(Galerucella nipponensis, 4.1%), 연물명나방(Elophila interruptalis, 3.1%), 양봉꿀벌(Apis mellifera, 2.2%) 순이었다. 세 곳의 습지에서 조사된 딱정벌레목, 나비목, 잠자리목 곤충의 수는 매우 많았지만 세 습지 간에 차이는 없었다. 주남 습지대의 곤충다양도(H'), 풍부도(RI)는 각각 5.04, 59.10이었다.
본 연구는 최근 RNAi 기반 LMO의 연구 개발이 활발히 진행됨에 따라 향후 이러한 기술을 이용한 LMO의 유해성 및 자연생태계 위해성평가가 필요할 때 실험실 수준에서 dsRNA를 대량으로 발현시키는 시스템을 확립하고, 수분(화분)매개 곤충인 꿀벌을 대상으로 유해성평가 시험을 수행하는 방법을 제시하고자 하였다. L4440 vector에 Snf7과 GFP 유전자를 클로닝한 plasmid를 HT115 (DE3) 대장균에 형질 전환한 후 온도, 배양시간, IPTG 농도를 각기 다르게 하여 최적의 발현조건을 탐색한 결과 $37^{\circ}C$, 0.4 mM IPTG, 4시간의 배양시간에서 가장 많은 양의 dsRNA가 발현됨을 확인하였다. 국내 외 제시된 꿀벌 위해성평가 가이드라인을 바탕으로 대장균에서 분리한 dsRNA를 꿀벌 성충에 급성섭식으로 처리한 결과 생사율과 일반중독증상에서 차이를 보이지 않는 것으로 보아 대장균으로부터 분리한 Snf7 dsRNA와 GFP dsRNA는 꿀벌 성충에 유해하지 않음을 알 수 있었다. 본 연구를 통해 dsRNA 물질의 유해성평가 및 자연생태계 위해성 평가를 위한 대량 추출 방법과 위해성평가 대상종의 사육 및 물질 처리 방법을 확립하여 향후 이뤄질 dsRNA의 꿀벌 위해성평가에 활용될 것으로 사료된다.
본 연구에서는 서양종꿀벌의 일벌에서 채집하여 정제한 정제봉독이 알코올 분해능에 관련이 있는 ADH와 ALDH 효소 활성에 미치는 영향을 알아보고자 하였다. ADH와 ALDH 활성은 in vitro kit를 사용하여 측정하였다. 그 결과 정제봉독 처리에 의해 ADH와 ALDH 효소 활성이 크게 증가하는 것으로 확인되었다. ADH 효소는 1mg/ml 이상의 정제봉독을 처리했을 경우 양성대조구(2mg/ml) 대비 $88.6{\pm}7.34%$의 활성도를 보였으며, ALDH 효소 역시 1mg/ml 이상의 정제봉독에서 양성대조구(2mg/ml) 대비 $94.6{\pm}0.57%$의 활성도를 나타내었다. 이상의 결과로 정제봉독은 숙취 해소능에 영향을 미치는 지표물질인 ADH와 ALDH 효소 활성을 크게 증가시키는 것으로 사료되었으며, 향후 추가시험을 통해 숙취해소 작용을 갖는 식의약품 소재로 사용 될 수 있을 것으로 생각된다.
프로폴리스는 꿀벌이 식물로부터 수집해 오는 수지성분으로 질병이나 기타 환경적인 요인으로부터 봉군을 보호하는 기능을 가지고 있다. 꿀벌 계통의 프로폴리스 생산성은 봉군의 유전적인 특성에 의해 결정된다. 본 연구에서는 프로폴리스 생산성 우수 계통 선발을 위한 연구의 일환으로 국내 수집 꿀벌 계통에 의한 프로폴리스 생산성을 평가하고 특성이 우수한 계통을 유지·보존하고자 하였다. 지역별 수집 계통 P1, P2, P3의 프로폴리스 생산성 평가는 2017년 6~7월, 8~9월 2차례에 걸쳐 이루어졌으며, 그 결과 P2 계통의 프로폴리스 생산성이 각각 10.1 g/hive, 4.25 g/hive로 가장 우수한 것으로 확인되었다. 이들 계통에 대한 봉군발육조사 결과 P2 계통의 일벌 개체수가 타 계통에 비해 월등히 높아 이 계통의 프로폴리스 생산성에 크게 기여했을 것으로 보고 있다. 이러한 결과를 통해 본 연구에서는 국내 수집 서양종꿀벌 원종 계통 중 프로폴리스 생산성이 가장 우수한 계통은 P2 계통인 것으로 평가되었으며, 향후 프로폴리스 생산성 우수 계통 선발을 위한 기초 자료로 제공될 수 있을 것이라 기대하고 있다.
Major Royal Jelly Protein cDNAs of Apis cerana (AcMRJP) were cloned and characterized. The open reading frames (ORFs) of the AcMRJP1 and AcMRJP2 genes were 1302 and 1392 nucleotides, encoding 433 and 463 amino acid residues, respectively. The sequence divergences between AcMRJP1 and AcMRJP2 and their corresponding protein families in A. mellifera were 0.0618 and 0.0934 at the nucleotide level and 0.0912 and 0.1438 at the protein level, respectively. Phylogenetic analysis supports the orthologous similarity between these proteins. The deduced amino acids indicated high essential amino acid contents of AcMRJP1 and AcMRJP2 (47.5 and 44.8%, respectively). The genomic organization of both AcMRJP1 and AcMRJP2 was determined. Both the AcMRJP1 (3663 bp) and AcMRJP2 (3963 bp) genes contained six exons and five introns, where all boundaries conformed to the GT/AG rule. AcMRJP1 and AcMRJP2 cDNAs were cloned into pET17b, and both the recombinant (r) AcMRJP1 (47.9 kDa) and rAcMRJP2 (51.7 kDa) were expressed in the insoluble form. Western blot analysis and N-terminal sequencing of the solubilized proteins revealed successful expression of rAcMRJP1 and rAcMRJP2 in vitro. The yields of the purified rAcMRJP1 and rAcMRJP2 were approximately 20 and 8mg protein per liter of the flask culture, respectively.
The concern over the use of melittin in honey bee venom due to its adverse reaction caused by allergens such as phospholipase A2 ($PLA_2$) and hyaluronidase (HYA) has been an obstacle towards its usage. We developed a novel single-step method for melittin purification and the removal of $PLA_2$ and HYA. This study explores the influence of pH, buffer compositions, salt concentration, and types of cation-exchange chromatography resins on the recovery of melittin and the removal of both HYA and $PLA_2$. Melittin was readily purified with a strong cation-exchange resin at pH 6.0 with sodium phosphate buffer. It resulted in a recovery yield of melittin up to 93% (5.87 mg from a total of 6.32 mg of initial melittin in crude bee venom), which is higher than any previously reported studies on melittin purification. $PLA_2$ (99%) and HYA (96%) were also successfully removed. Our study generates a single-step purification method for melittin with a high removal rate of $PLA_2$ and HYA, enabling melittin to be fully utilized for its therapeutic purposes.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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제18권1호
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pp.33-40
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2009
A vitellogenin cDNA was cloned from the bumblebee Bombus ignitus. The cDNA encoding B. ignitus vitellogenin (BiVg) is 5473 bases long with an open reading frame of 1773 amino acid residues. BiVg possesses two consensus (RXXR/S) cleavage sites and has the conserved DGXR and GL/ICG motif near its C-terminus. The deduced amino acid sequence of BiVg cDNA showed significant similarity with hymenopteran Vgs (51% identity to Apis mellifera Vg, and $33{\sim}36%$ to other insect Vgs). The BiVg cDNA was expressed as a 200-kDa polypeptide in baculovirus-infected insect Sf9 cells. Northern and Western blot analyses showed the expression of BiVg in fat bodies of pupae and adults. In queens, the expression of BiVg was first detected in late pupal stage fat bodies, and secreted BiVg was also observed in late pupal stage hemolymph.
Wei, Yadong;Gui, Zhongzheng;Choi, Young Soo;Guo, Xijie;Zhang, Guozheng;Sohn, Hung Dae;Jin, Byung Rae
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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제9권1호
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pp.123-126
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2004
The actin-binding protein profilin cDNA was firstly isolated from the lepidopteran insect, silkworm Bombyx mori. The B. mori profilin cDNA contains an open reading frame of 378 bp encoding 126 amino acid residues and possesses three cysteine residues. The deduced amino acid sequence of the B. mori profilin cDNA showed 80% identity to Apis mellifera profilin and 72% to Drosophila melanogaster profilin. Northern blot analysis showed that B. mori profilin is highly expressed in epidermis and less strongly in silk gland. In addition, Northern blot analysis revealed the presence of B. mori profilin transcripts in all tissues examined, suggesting that B. mori profilin gene is expressed in most, if not all, body tissues.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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제2권1호
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pp.1-6
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2001
This paper reports a few characteristics of seven insect mitochondrial genomes sequenced completely (Bombyx mori, Drosophila melanogaster, D. yakuba, Apis mellifera, Anopheles gambiae, A. quadrimaculatus, and Locusta migratoria). Comparative analysis of complete mt genome sequences from several species revealed a number of interesting features (base composition, gene content, A+T-rich region, and gene arrangement, etc) of insect mitochondrial genome. The properties revealed by our work shed new light on the organization and evolution of the insect mitochondrial genome and more importantly open up the way to clearly aimed experimental studies for understanding critical roles of the regulatory mechanisms (transcription and translation) in mitochondrial gene expression.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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