여러 토양에서 분리한 400여 개의 방선균 균주에 대해 4가지 식물병원성 진균에 대한 항진균 활성을 조사하였으며 그 중 Streptomyces costaricanus HR391 균주는 PDB 배지에서 식물병원성 진균인 Fusarium oxysporum f. sp. raphani, F. oxysporum f. sp. niveum, F. oxysporum f. sp. lycopersici와 Rhizoctonia solani의 균사 생장을대조군과 비교하여 각각 26.5, 26.2, 21.2와 23.8% 저해하였다. S. costaricanus HR391은 항진균물질인 siderophore를 $98{\mu}M$을 생성할 뿐만 아니라 유화활성을 나타내며 막지질을 파괴할 수 있는 생물계면활성제인 rhamnolipid와 lipopeptide인 iturin A와 surfactin를 생성하였다. 또한 진균 세포막을 분해할 수 있는 chitinase와 glucanase 활성도 나타내었으며 병원균의 막을 파괴하는 AMP와 항생물질 phenazine도 분비하였다. 이외에도 식물생장 촉진활성을 갖는 zeatin, gibberellin과 indole acetic acid 같은 식물호르몬도 생성하였다. 이와 같이 항진균 활성을 나타내는 S. costaricanus HR391 균주는 다양한 종류의 항진균 물질의 상승작용과 더불어 높은 생물계면활성이 본 균주의 항진균 활성에 큰 역할을 하는 것으로 보이며 친환경적인 생물학적 항진균제로서 활용이 가능할 것으로 기대된다.
청주 근처 토양에서 분리한 에너지 대사 저해제인 2,4-dinitrophenol (DNP)에 내성을 보이는 Streptomyces CM 001 균주가 생산하는 항진균성 물질(CUA)을 순수하게 분리 정제하고 화학분석을 통한 구조의 규명, 항진균활성 연구 및 유전적 변이원성(mutagenicity)등을 살펴보았다. CM 001 균주를 베네트 배지와 같이 영양성이 좋은 배지에서 배양시 항진균 활성이 동반 생성되는 색소와 비례적으로 증가했다. 배양 상등액 속의 항진균성 물질들을 염산처리, 유기용매처리 후 Amberlite XAD-4 column chromatography, silica gel adsorption-Sephadex LH-20 chromatography 과정을 통해 색소가 제거된 부분 정제 백색분말로 얻었다 이로부터 Prep. HPLC과정을 통하여 8종의 화합물을 각기 분리하였는데 이 화합물들은 동일한 UV spectrum과 216, 260nm에서 최대 흡수파장을 보였다.
Most reports demonstrated the substrate specificity-based kinetic properties of chitin or chitosan degrading enzymes. However, there is virtually less information on the high quality and quantity production of chitin or chitosan hydrolysates having a larger than (GlcN)7 from the hydrolysis of high molecular weight chitosan using specific enzymes and their biological activity. Therefore, the production of such molecules and the discovery of such enzyme sources are very important. Fortunately, the author has established a mass production method of chitosan hydrolysates (GlcN)n, n=2-13 that have been characterized as a potent antioxidant substance, as well as antifungal and antibacterial activities against Penicillium species and highly selective pathogenic bacteria. In addition, preclinical studies using (GlcN)n, n=5-25 demonstrated that these molecules played a very important role in maintaining biometric balance. Collectively, it is implicated that the application of these mixed substances to foods with significant biological activity is very encouraging.
Background: This study aimed to develop a biocontrol system for ginseng root rot caused by Fusarium cf. incarnatum. Methods: In total, 392 bacteria isolated from ginseng roots and various soils were screened for their antifungal activity against the fungal pathogen, and a bacterial isolate (B2-5) was selected as a promising candidate for the biocontrol because of the strong antagonistic activity of the bacterial cell suspension and culture filtrate against pathogen. Results: The bacterial isolate B2-5 displayed an enhanced inhibitory activity against the pathogen mycelial growth with a temperature increase to $25^{\circ}C$, produced no pectinase (related to root rotting) an no critical rot symptoms at low [$10^6$ colony-forming units (CFU)/mL] and high ($10^8CFU/mL$) inoculum concentrations. In pot experiments, pretreatment with the bacterial isolate in the presumed optimal time for disease control reduced disease severity significantly with a higher control efficacy at an inoculum concentration of $10^6CFU/mL$ than at $10^8CFU/mL$. The establishment and colonization ability of the bacterial isolates on the ginseng rhizosphere appeared to be higher when both the bacterial isolate and the pathogen were coinoculated than when the bacterial isolate was inoculated alone, suggesting its target-oriented biocontrol activity against the pathogen. Scanning electron microscopy showed that the pathogen hyphae were twisted and shriveled by the bacterial treatment, which may be a symptom of direct damage by antifungal substances. Conclusion: All of these results suggest that the bacterial isolate has good potential as a microbial agent for the biocontrol of the ginseng root rot caused by F. cf. incarnatum.
Kim, Hyun-Ju;Kim, Jin-Cheol;Kim, Byung-Sup;Kim, Hong-Gi;Cho, Kwang-Yun
The Plant Pathology Journal
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제15권1호
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pp.14-20
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1999
Twenty isolates of Helminthosporium species were obtained from various grass plants and tested for controlling efficacy on the development of plant diseases. An isolate of Helminthosporium sp. TP-4 was chosen and six antibiotic substances were purified from cultures of the fungus by repeated silica gel column chromatography and preparative thin-layer chromatography. They were identified as ophiobolin a, 6-epiophiobolin A, 3-anhydroophiobolin A, 3-anhydro-6-epiophiobolin A, iphiobolin B, and iphiobolin I mainly by mass spectrometry and nuclear magnetic resonance spectrometry. Ophiobolins inhibited the growth of a grampositive bacterium Streptomyces griseus, but were not active against gram-negative bacteria. They also showed an antifungal activity. In in vivo tests, iphiobolin B exhibited potent controlling activities against rice blast, tomato late blight, and wheat leaf rust with control values more than 90% and 70% at concentration of $500\mu\textrm{m}$/ml and 100 ${\mu}{\textrm}{m}$/ml. Ophiobolin A and 6-epiophiobolin A controlled the development of wheat leaf rust more than 80% at concentrations of 100 /ml and $500\mu\textrm{m}$/ml respectively. 3-Anhydro-6-epiophiobolin A was not active against any plant disease. On the other hand, the A-series ophiobolins other than 3-anhydroophiobolin A showed stronger phytotoxic activity in a leaf-wounding assay using 8 plant species than those of 3-anhydroophiobolin A, ophiobolin B, and ophiobolin I. The results indicate that there is little correlation between antifungal activity and phytotoxicity of ophiobolins.
대표적인 식물병원성 곰팡이 인 Phytophthora infestans와 Fusarium oxysporum의 생장을 저해하는 근권세균들을 토양에서 분리하여 동정하였으며 이 균주들이 분비하는 항진균성 물질인 siderophore, $\beta-1$,3-glucanase, hydrogen cyanide와 chitinase의 생성능을 조사하였다. 분리균주 중 Bacilus sp. RFO41은 F. oxysporum의 생장을 가장 효율적으로 억제하였으며, siderophore 생성능과 $\beta-1$,3-glucanase의 활성이 가장 우수하였다. 또 다른 분리균주인 Bacilus sp. PS2는 P. infestans의 생장을 가장 많이 억제하였으며, chitinase 활성과 hydrogen cyanide 생성능이 가장 우수하였다. F. oxysporum과 P. infestans에 대한 항진균 효과는 근권세균이 생산하는 siderophore, $\beta-1$,3-glucanase, hydrogen cyanide와 chitinase의 활성에 따라 차이가 있음을 알 수 있었다.
Hazem S. Elshafie;Ali Osman;Mahmoud M El-Saber;Ippolito Camele ;Entsar Abbas
The Plant Pathology Journal
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제39권3호
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pp.265-274
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2023
Citrus black rot is a serious disease of citrus plants caused by Alternaria citri. The current study aimed to synthesize zinc oxide nanoparticles (ZnO-NPs) by chemically or green method and investigate their antifungal activity against A. citri. The sizes of synthesized as measured by transmission electron microscope of ZnO-NPs were 88 and 65 nm for chemical and green methods, respectively. The studied prepared ZnO-NPs were applied, in vitro and in situ, at different concentrations (500, 1,000, and 2,000 ㎍/ml) in post-harvest treatment on navel orange fruits to verify the possible control effect against A. citri. Results of in vitro assay demonstrated that, at concentration 2,000 ㎍/ml, the green ZnO-NPs was able to inhibit about 61% of the fungal growth followed by 52% of chemical ZnO-NPs. In addition, scanning electron microscopy of A. citri treated in vitro with green ZnO-NPs showed swelling and deformation of conidia. Results showed also that, using a chemically and green ZnO-NPs at 2,000 ㎍/ml in situ in post-harvest treatment of orange, artificially-infected with A. citri, has reduced the disease severity to 6.92% and 9.23%, respectively, compared to 23.84% of positive control (non-treated fruits) after 20 days of storage. The out findings of this study may contribute to the development of a natural, effective, and eco-friendly strategy for eradicating harmful phytopathogenic fungi.
고추역병균(疫病菌)인 Phytophthora capsici에 대한 생물학적(生物學的) 방제(防除)를 위하여 Pseudomonas sp. A-183균주(菌株)의 배양액(培養液)으로 부터 3가지 화합물(化合物)을 분리(分離) 정제(精製)한 후(後) 항균활성(抗菌活性)을 조사(調査)하여 미생물농약(微生物農藥)의 개발(開發)에 대한 가능성(可能性)을 검정(檢定)하였다. 배양여액(培養濾液)을 pH 2로 조정하여 ethyl acetate로 추출(抽出)한 경우에 항균활성(抗菌活性)이 가장 높았으며, 조추출물(粗抽出物) $50mgkg^{-1}$의 농도(濃度)에서도 P. capsici의 생육(生育)을 완전히 억제(抑制)시켰다. 배양여액(培養濾液)으로 부터 백색분말상(白色粉末狀)의 A물질(物質), sticky oil상狀(의) B물질(物質) 및 황색(黃色) 분말상(粉末狀)의 C물질(物質)을 분리(分離) 정제(精製)하였다. A, B 및 C물질(物質)의 P. capsici에 대한 항균력(抗菌力)의 최소저해농도(最小沮害濃度)는 각각(各各) $1mgkg^{-1}$, $5mgkg^{-1}$ 및 $5mgkg^{-1}$으로 나타났다. 세가지 물질(物質) 모두 pot시험(試驗)에서 P. capsici에 의한 고추역병(疫病)을 효과적(效果的)으로 방제(防除)하였다.
고추 역병균(疫病菌)(P. capsici)에 우수(優秀)한 항균활성(抗菌活性)을 가진 3가지의 항균물질(抗菌物質)을 Pseudomonas sp. A-183 배양액(培養液)으로 부터 분리(分離) 정제(精製)하였다. 분리(分離)된 3가지의 항균물질(抗菌物質)에 대한 분자구조식(分子構造式)을 구명(究明)하기 위하여 UV, IR, $^1H$ NMR, $^{13}C$ NMR Spectroscopy법(法)으로 해석하였다. A와 B물질(物質)은 Molish 및 Anthrone반응(反應)에 양성(陽性)으로, Fehling반응(反應)에는 음성(陰性)으로 나타났으므로 nonreducing sugar구조(構造)를 함유(含有)하고 있는 것으로 판단되었다. C물질(物質)은 위의 시약(試藥)에서 정색반응(呈色反應)을 나타내지 않고 단지 UV흡수(吸收)만을 나타내었다. Mass, NMR 및 IR 분광분석(分光分析)에 의해 A와 B물질(物質)은 당(糖)으로는 deoxyhexose인 rhamnose를 포함하고 지방산으로는 ${\beta}-hydroxydecanoic$ acid를 포함하였다. 또 이들 사이에는 O-glycoside결합(結合)이 형성(形成)되어 있었으며 A와 B물질(物質) 사이에는 당(糖) 한분자(分子)의 차리(差異)가 나타났다. 종합적(綜合的)으로 A물질(物質)은 glycolipid B인 3-hydroxy-(3-hydroxydecanoyl) -decanoic acid $3-O-{\alpha}-L-rhamnopyranosyl(1{\to}2)rhamnopyranoside$, B물질(物質)은 glycolipid A인 3-hydroxy-(3`-hydroxydecanoyl)decanoic acid $3-O-{\alpha}-L-rhamnopyranoside$로 동정(同定)되었으며, C물질(物質)은 phenazine으로 확인(確認)되었다.
국내 토양시료에서 분리한 174 Corallococcus 속 균주와 207 Myxococcus 속 균주들의 배양추출물을 제조하고 Candida albicans, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus에 대한 항균 활성을 비교하였다. 항진균 활성을 보이는 균주의 비율은 Corallococcus가 7.5%(174균주 중 13균주)로 51.7%(207균주 중 107균주)를 보인 Myxococcus에 비해 낮았다. 하지만, 항세균 활성을 보인 균주의 비율은 Corallococcus가 12.1%(21균주)로 1%(2균주)를 보인 Myxococcus에 비해 상대적으로 높았다. Corallococcus 균주 중 P. aeruginosa, S. aureus에 모두 활성을 보이는 6 C. coralloides 균주들은 자실체 형성에서는 차이를 보였지만 항세균 활성을 나타내는 배양추출물의 HPLC 크로마토그램은 유사하였는데, 이들이 생산하는 항세균 물질의 생산은 CYS 배지에서 6일 이상 배양할 때 가장 높았다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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