CopA3를 이용하여 피부 염증에 대하여 연구를 하였다. 산화질소와 cytokine의 생산은 면역세포의 대표적인 염증인자이다. 세포는 LPS 처리 후 한 시간 뒤에 CopA3를 처리하였다. 세포 독성이 나타나지 않는 농도인 5, 25, 50, 100 ${\mu}g/ml$를 사용하였다. CopA3는 NO, TNF-${\alpha}$, IL-$1{\beta}$, IL-6, iNOS, COX-2의 생성을 저해 시켰다. iNOS와 COX-2 역시 100 ${\mu}g/ml$의 농도에서 각각 54%, 65%가 저해가 되었다. 게다가 CopA3는 염증성 사이토 카인인 TNF-${\alpha}$, IL-$1{\beta}$, IL-6의 생성을 감소 시켰다. 이러한 결과로 CopA3는 염증 예방과 치료에 효과적임을 확인 할 수 있었다.
This study was aimed to investigate the anti-tumor and immune response effect of Samyongtang(S1; this medicine represents for 'ENERGIZER'), Yangjeongjejeoktang(S2; this is the 'INTERMEDIATE METHOD' of S1 and S3) and Onbeakwon(S3; this is 'ATTACK' the disease of mass) on the experimental rats induced by Sarcoma-180 and Methotrexate. And to observed the differences S1, S2, and S3 treatment groups. Tumor weight(TW) in vivo, interleukin-2(IL-2), hemagglutinin titer(H.A), hemolysin titer(HL), rossete forming cell(RFC), delayed type hypersensitivity(DTH), and natural killer cell activity(NKCA) in vivo were measured in rats. The obtained results were summarized as follows. 1. Tumor weight was decreased in all treatment groups (S2>S3>S1) as compared with control group, but the difference was not statistically significant each treatment groups. 2. Interleukin-2 was increased in all treatment groups (S1>S2>Ss) as compared with control group, but the difference was not statistically significant each treatment groups. 3. Hemagglutinin titer was increased in all treatment groups (S1>S2>S3) as compared with control group, but the difference was not statistically significant each treatment groups. 4. Hemolysin titer was increased in all treatment groups (S1>S2>S3) as compared with control group, but the difference was not statistically significant each treatment groups. 5. Rossete forming cell(RFC) was increased in all treatment groups (S1>S2>S3) as compared with control group, but the difference was not statistically significant each treatment groups. 6. Delayed type hyperseneitivity(DTH) was increased in S1, S2 treatment groups (S1>S2) as compared with control group, but it was decreased in S3 treatment group. Therefore, S1 group was statistically significant compared with S3 groups. 7. Natural killer cell activity(NKCA) was increased in all treatment groups (S2>S3>S1) as compared with control group, but the difference was not statistically significant each treatment groups. Based on the above mentioned results, it is suggested that S1, S2 and S3 will have anti-tumor substances and enhance effect of immune response. But the differences were not statistically significant in each treatment groups, except for delayed type hypersensitivity.
Propionibacterium acnes is known to playa pivotal role in the pathogenesis of acne vulgaris. CBT-SL5 is one of the antimicrobial peptides from Enterococcus faecalis SL5, and it has shown antimicrobial activity against P. acnes. The aim of this study was to investigate the anti-inflammatory effect of CBT-SL5 on the inflammation induced by P. acnes in cultured human keratinocyes. Cultured human keratinocytes derived from neonatal foreskin were treated with heat-killed P. acnes to induce inflammation, and then various concentrations of CBT-SL5 were added to the P. acnes-treated keratinocytes. The mRNA expression and protein secretion of interleukin (IL)-8, an inflammation marker, was analyzed by real-time reverse transcription polymerase chain reaction and enzyme-linked immunosorbent assay, respectively. We also analyzed the nuclear factor-kappa B (NF-$\kappaB$) p65 translocation by performing immunofluorescent staining. P. acnes treatment up regulated the IL-8 mRNA expression in the keratinocytes, and this was brought about through both toll-like receptor (TLR)2 and TLR4. At the concentrations of 10, 50, and 100 ng/ml, CBT-SL5 significantly down regulated the P. acnes-induced IL-8 mRNA expression and protein production (p<0.05). At 6 hand 12 h of the treatment, CBT-SL5 significantly suppressed the P. acnes-induced IL-8 mRNA expression. Secretion of IL-8 protein was significantly reduced at 24 h. The functional inhibitory activity of CBT-SL5 was shown by CBT-SL5 suppressing the P. acnes-induced NF-$\kappaB$ translocation from the cytoplasm to the nucleus. These results demonstrated that CBT-SL5 suppressed the P. acnes-induced IL-8 expression in keratinocytes. Therefore, CBT-SL5 may be a novel anti-inflammatory treatment for acne.
Objectives: Notopterygium incisum(N. incisum) and Saposhnikovia divaricata(S. divaricata) have been clinically used in traditional oriental medicine for treatment of inflammatory diseases. Also, a herbal mixture prepared with N. incisum and S. divaricata has been strongly linked to the anti-inflammatory effect. In this study, we evaluate the synergistic anti-inflammatory effect of N. incisum and S. divaricata. Methods: For evaluating the anti-inflammatory activity of a herbal mixture of N. incisum and S. divaricata in vivo, we measured the changed ear thickness in 12-O-tetradecanoyl-phorbol-13-acetate(TPA)-induced mouse ear edema model after topical application of herbal mixture. In addition, the levels of markers for inflammation, such as tumore necrosis factor (TNF)-${\alpha}$, interleukin (IL)-1${\beta}$, and nitric oxide(NO), were determined by ELISA assay in lipopolysaccharide-stimulated Raw 264.7 cells. Results: We reported that water extracts of N. incisum and S. divaricata combination significantly inhibited the mouse ear edema induced by TPA. Moreover, the water extracts of N. incisum and S. divaricata combination exhibited synergistic effects in down-regulating IL-1${\beta}$ level, but not TNF-${\alpha}$ and NO. Conclusions: These results suggest that combined treatment of N. incisum and S. divaricata, based on seven methods in prescription compatibility, has a synergistic effect in down-regulating inflammatory response both in vivo and in vitro models. Especially, it seems that IL-1${\beta}$ is a one of main target of the mixture of N. incisum and S. divaricata on anti-inflammatory activity.
In the present study, the antioxidant and anti-inflammatory activities of ethanolic extracts from Lathyrus japonicus at concentrations of 50, 100, and 200 ㎍/mL were investigated in LPS-stimulated, RAW264.7 cells. Antioxidant properties were determined using 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) and 2,2'-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) (ABTS) radical scavenging assays and ferric reducing antioxidant power assay. In addition, the production of reactive oxygen species (ROS) was measured using the 2',7'-dichlorofluorescein diacetate (DCFH-DA) probe by flow cytometry. To examine the anti-inflammatory activity of the extracts of L. japonicus, their effects on the levels of nitric oxide (NO); production of cytokines such as interleukin (IL)-1β, IL-10, and tumor necrosis factor-α (TNF-α); and the activities of enzymes such as inducible NOS (iNOS) and cyclooxygenase-2 (COX-2) were assessed. The IC50 values of the DPPH and ABTS radical scavenging assays were 476.09 ± 1.50 and 34.91 ± 0.37 ㎍/mL, respectively. In addition, L. japonicus extracts not only inhibited ROS production, but also the production of NO, IL-1β, and IL-10, and the activity of iNOS in a dose-dependent manner. In summary, the ethanolic extracts of L. japonicus could be used as a functional food additive and an anti-inflammatory agent owing to their antioxidant and anti-inflammatory activities
본 연구에서는 호랑나비 유충의 유전체 분석을 통해 선별된 파필리오신 3의 항균 및 항염증 활성을 확인하였다. 선행연구에서 RNA 시퀀싱 분석을 통해 호랑나비의 전사체를 분석하였으며, 결과를 바탕으로 인실리코(in silico) 분석을 진행하여 전사체 유래 항균 펩타이드를 스크리닝하고 선발하였다. 수행된 항균 활성 및 용혈 활성 테스트에서 파필리오신 3은 그람음성균인 E. coli와 그람양성균인 S. aureus에 대해 강력한 항균활성을 나타낸 반면 마우스 적혈구에 대한 용혈 활성은 전혀 없었다. 다음으로 마우스 대식세포주 Raw264.7 세포를 이용하여 파필리오신 3의 항염증 활성을 확인하였다. 그 결과 파필리오신 3은 LPS로부터 유도된 Raw264.7 세포들의 산화질소 생성을 감소시키는 결과를 보여주었다. 뿐만 아니라 실시간 역전사 중합효소 연쇄반응(qRT-PCR) 방법과 효소결합면역흡착측정법(ELISA)을 통해 파필리오신 3이 Raw264.7 세포에서 전염증성 사이토카인(IL-6, IL-1β)의 발현을 감소시킨다는 것을 확인할 수 있었다. 또한, 염증반응의 신호전달인자들(MAPKs, NF-κB)의 인산화를 억제하는 것을 확인하였는데, 이는 파필리오신 3이 LPS와의 상호작용을 통해 결합하여 효과를 나타낸다는 것을 확인할 수 있었다. 이러한 결과들은 호랑나비 유전체 분석을 통해 확인된 파필리오신 3이 새로운 항균 및 항염증 치료제로서 개발하는데 가능성 있는 물질로 사료된다.
다양한 제품들에 사용되고 있는 천연물 소재들의 효능에 대한 체계적이고 과학적인 증거자료와 임상자료는 매우 부족한 실정이다. 이러한 천연물 소재의 과학적 연구는 국민보건과 건강증진을 위한 다양한 제품개발의 기초자료로 활용할 수 있는 중요한 자료이다. 따라서 본 연구에서는 보리순 추출물을 이용하여 기능성 천연물 소재로서의 가능성을 검토하였다. 항염증 활성을 조사하기 위해서 대식세포 RAW264.7에 LPS로 자극시켜 유도된 염증반응에서 보리순 에탄올 추출물의 매개체 억제 효과를 수행하였고 oxazolone을 이용하여 hairless 마우스에 접촉성 피부염을 유도하여 보리순 추출물의 항염 효과를 확인하였다. 연구의 결과에서, LPS로 자극한 RAW264.7 세포에서 COX-II, iNOS와 같은 염증성 매개체뿐만 아니라 염증성 사이토카인의 생성 및 발현이 보리순 에탄올 추출물에 의하여 현저히 억제됨을 확인하였다. 이러한 보리순 에탄올 추출물의 억제효과는 $I{\kappa}B$의 분해반응을 억제함으로써 NF-${\kappa}B$의 핵으로 이동을 억제하여 신호전달체계를 불활성화시키는 것과 관련이 있는 것으로 나타났다. 또한 보리순 에탄올 추출물은 NF-${\kappa}B$의 상위 신호전달경로인 MAPKs에도 영향을 미치는 것으로 증명되었다. 대식세포에서의 실험결과를 토대로 hairless 마우스에 oxazolone으로 접촉성 피부염을 유발시킨 모델에서 보리순 에탄올 추출물을 처리하여 2주간 피부 병변을 관찰한 결과 염증반응이 현저히 감소됨을 확인하였다. 이상의 결과에서 보리순 추출물이 항염증 효능을 가진 천연물 소재로서의 가능성을 제시하고 있다. 기존 연구에 의하면, 보리 추출물에는 항산화 효과가 뛰어난 폴리페놀류인 루테오린(luteolin), 사포나린(saponarin) 등이 풍부하며, 항염증 효과가 우수한 페루릭산(ferulic acid), 루토나린(lutonarin), 그리고 각종 비타민, 미네랄 등이 풍부하다고 알려져 있다. 또한 superoxide와 hydroxyl 라디칼 생성을 억제할 수 있는 2"-O-glycosylisovitexin이 함유되어 있는 것으로 밝혀졌다. 이러한 성분들에 의하여 보리순 추출물의 항염 효과가 나타날 것으로 생각된다. 다양한 염증성 질환에서 여러 매개체들의 과도한 발현이 그 질환의 원인임을 생각해 볼 때 보리순 추출물은 항염증에 관련된 여러 제품들에서 다양하게 활용할 수 있는 천연물 소재가 될 것으로 판단되며 앞으로 보리순 추출물에서 항염 효과를 나타내는 유효화합물의 분리동정 및 생리활성평가에 대한 연구가 진행되어야 할 것으로 사료된다.
본 연구에서는 생 들깨와 볶은 들깨의 염증매개물질 감소 효과를 RAW 264.7 대식 세포와 궤양성 대장염이 유도된 마우스를 이용하여 비교 분석하고자 하였다. LPS 처리에 의해 활성화된 RAW 264.7 대식세포에서 들깨의 에탄올 추출물은 볶음 여부와는 관계없이 NO, IL-6, TNF-${\alpha}$와 같은 염증매개물질 수준을 유의적으로 감소시키는 효과(대조군 대비 45-85% 수준)가 있었다. 반면 DSS 처리에 의해 궤양성 대장염이 유도된 마우스 모델에서는, 볶은 들깨 식이(1%)만이 대장의 $PGE_2$, $LTB_4$와 같은 염증매개물질 수준을 유의적으로 감소시키는 효과(각각 대조군 대비 34%, 58% 수준)가 있었다. 이와 같은 연구 결과를 종합하여 보면, 볶은 들깨는 in vitro 항염성 뿐 아니라 in vivo 항염성을 가지는 것으로 판단된다. 앞으로 들깨의 볶음 과정에서 생성된 항염 기능 성분들을 분리 동정하는 연구와 볶은 들깨의 항염성과 관련된 기전에 관한 후속 연구가 지속적으로 이루어진다면 볶은 들깨가 대장염을 포함한 여러 염증관련 질병 예방에 유용한 소재로 이용될 수 있을 것으로 기대된다.
본 연구는 지질다당류에 의해 유도된 대식세포주인 RAW 264.7 세포에서 자화지정 추출물이 염증 매개체 생성에 미치는 영향을 조사하고자 하였다. 자화지정 추출물이 대식세포주인 RAW 264.7 세포의 세포 생존 능력에 미치는 영향을 조사 하기 위하여 MTT assay를 실시하였다. 또한, Bio-Plex 사이토카인 분석(cytokine assay)을 통하여 NO, 인터루킨 $(IL)-1{\beta}$, 종양 괴사 인자($TNF-{\alpha}$) 및 IL-6와 같은 다양한 사이토카인(cytokine)의 농도에 의한 자화지정 추출물의 항염증 효과를 조사 하였다. 자화지정 추출물은 LPS로 유도 된 대식세포에서 NO, $IL-1{\beta}$, $TNF-{\alpha}$ 및 IL-6의 농도를 $25{\mu}g/mL$ 이상으로 유의하게 저해하였으며 세포 생존율에는 변화가 없었다. 이러한 결과는 자화지정 추출물이 LPS로 유도된 대식세포에서 $IL-1{\beta}$, $TNF-{\alpha}$ 및 IL-6와 같은 염증성 사이토카인(cytokine)의 억제와 관련된 항염증 효과를 갖는다는 것을 시사한다. 앞으로 자화지정을 이용한 염증질환에 관련된 치료제개발에 새로운 연구가 더 필요한 바이다.
Objectives: This study was performed to identify the anti-inflammatory effect of Pulsatilla koreana (PK) methanol extract on lipopolysaccharide (LPS) induced inflammatory. Methods: There were five groups. They were control group, LPS-exposed PK methanol extract group ($0{\mu}g/ml$, $10{\mu}g/ml$, $30{\mu}g/ml$, $100{\mu}g/ml$). To measure out cytotoxicity of PK, we performed the MTT assay. To evaluate the anti-inflammatory effect of PK, we examined the inflammatory mediators, such as nitric oxide (NO), prostaglandin E2 (PGE2), and pro-inflammatory cytokines (interleukin $[IL]-1{\beta}$, IL-6, tumor necrosis $factor-{\alpha}$ [$TNF-{\alpha}$], IL-10). Results: 1. The extract of PK (${\sim}100{\mu}g/ml$) itself did not have any cytotoxic effect in RAW 264.7 cells. 2. The concentration of plasma NO and PGE2 in PK methanol extract group showed a lower values than those of control group. 3. The concentration of plasma $IL-1{\beta}$, plasma IL-6, and plasma $TNF-{\alpha}$ in PK methanol extract group showed a lower values than those of control group. 4. The concentration of Plasma IL-10 in PK methanol extract groups showed higher than control group; however, these values showed no significantly different. Conclusions: According to this study, the extract of PK could be used as a protective agent against inflammation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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