As a part of ongoing research to elucidate and characterize antioxidant and anti-inflammatory nutraceuticals, solvent-partitioned fractions from Spergularia marina were tested for their ability to scavenge radicals and suppress inflammation. The results of the 2',7'-dichlorofluorescein diacetate assay indicate that solvent-partitioned fractions from S. marina scavenged intracellular radicals in $H_2O_2$-stimulated mouse macrophages. The tested fractions decreased the generation of nitric oxide (NO) and the expression of inflammation mediators, namely, inducible nitric oxide synthase (iNOS) and interleukin (IL)-6, by lipopolysaccharide (LPS)-induced mouse macrophages, indicating that S. marina decreases inflammation. Among all tested fractions [i.e., $H_2O$, n-buthanol (n-BuOH), 85% aqueous methanol (aq. MeOH), and n-hexane], the 85% aq. MeOH fraction showed the strongest antioxidant and anti-inflammatory response. The 85% aq. MeOH fraction scavenged 80% of the free radicals produced by $H_2O_2$-induced control cells. In addition, NO production was 98% lower in 85% aq. MeOH fraction-treated cells compared to LPS-induced control cells. The mRNA expression of iNOS and IL-6 was also suppressed in 85% aq. MeOH fraction-treated cells. The results of the current study suggest that the phenolic compound components of S. marina are responsible for its antioxidant and anti-inflammatory effects.
Clam worms (Marphysa sanguinea) are a rich source of bioactive components such as the antibacterial peptide, perinerin. In the present study, we explored the physiological activities of a novel NCWPFQGVPLGFQAPP peptide (NCW peptide), which was purified from clam worm extract through high-performance liquid chromatography. Tandem mass spectrometry (MS/MS) revealed that NCW was a new peptide with a molecular weight of 1757.86 kDa. Moreover, NCW peptide exhibited significant antioxidant effects, causing a 50% inhibition of DPPH radical at a concentration of 20 μM without showing any cytotoxicity. These were associated with a reduction in the activity of catalase (CAT), superoxide dismutase (SOD), glutathione peroxidase (GSH-Px), and malondialdehyde (MDA) in LPS-stimulated RAW264. 7 cells. Furthermore, NCW peptide exhibited anti-inflammatory effects in LPS-stimulated RAW264.7 macrophages via inhibition of the abnormal production of pro-inflammatory cytokines including nitric oxide (NO), inducible nitric oxide synthase (iNOS), and cyclooxygenase-2 (COX-2). These anti-inflammatory effects of NCW peptide were associated with the inhibition of interleukin-1β (IL-1β) and tumor necrosis factor-α (TNF-α). Our results therefore suggest that this novel NCW peptide with antioxidant and anti-inflammatory effects could be a good therapeutic agent against inflammation-related diseases.
1. Objectives 4 herbal formulas (Yanggyeoksanhwa-tang, Yeoldahanso-tang, Cheongsimyeonja-tang and Taeeumjowi-tang) were applied to investigate the anti-inflammatory activities. In many studies, plant-derived anti-inflammatory efficacies have been investigate for their potential inhibitory effects on lipopolysaccharide (LPS)-stimulated macrophages. This study was performed to examine the anti-inflammatory activities of 4 herbal formulas on LPS-stimulated RAW 264.7 cells. 2. Methods The productions of nitric oxide (NO), prostaglandin (PG)$E_2$, interleukin(IL)-6 and tumor necrosis factor (TNF)-${\alpha}$ were examined in the presence of the 4 herbal formulas in RAW 264.7 cells. The cells were incubated with LPS 1 ${\mu}g/mL$ and 4 herbal formulas for 18 hrs. The anti-inflammatory activity of 4 herbal formulas were investigate by carrageenin-induced paw edema in rats. The paw volume was measured at 2 and 4 hrs following carrageenininduced paw edema in rats. 3. Results Yanggyeoksanhwa-tang and Cheongsimyeonja-tang showed inhibitory effect on $PGE_2$ production in LPS-stimulated RAW 264.7 cells and a reduction in carrageenin-induced paw edema on rats. Yanggyeoksanhwa-tang showed inhibitory effect on IL-6 in LPS-stimulated RAW 264.7 cells. 4 herbal formulas not affect on NO and TNF-${\alpha}$ inhibition in LPS-stimulated RAW 264.7 cells. 4. Conclusions These results suggested that Yanggyeoksanhwa-tang and Cheongsimyeonja-tang have anti-inflammatory activity.
Objective: To derive information on the efficacy of Sam-chul-kun-bi-tang (SKT), by evaluating its anti-inflammatory effect. SKT is a widely-used herbal formula in traditional Korean medicine. In man y studies, plant-derived anti-inflammatory efficacies have been investigated for their potential inhibitory effects on lipopolysaccharide (LPS)-stimulated macrophages. This study was performed to examine the anti-inflammatory effects of SKT extract on LPS-stimulated RAW 264.7 cells. Methods: The production of nitric oxide (NO), prostaglandin $(PG)E_2$, tumor necrosis factor (TNF)-$\alpha$ and interleukin (IL)-6 were examined in a macrophage cell line, RAW 264.7 cells, in the presence of SKT. RAW 264.7 cells were incubated with LPS 1 ${\mu}g/mL$ and SKT for 18 hrs. The anti-inflammatory activity of SKT was investigated by carrageenan-induced paw edema in rats. The paw volume was measured at 2 and 4 hrs following carrageenan-induced paw edema in rats. Results: SKT showed inhibitory effect on $PGE_2$, TNF-$\alpha$ and IL-6 in LPS-stimulated RAW 264.7 cells. But SKT was not inhibitory effect on NO by LPS-stimulated RAW 264.7 cells. Administration of SKT (1 g/kg) also showed a reduction in carrageenan-induced paw edema on rats. Conclusion: These results suggest that SKT has anti-inflammatory activities in both in vitro and in vivo models.
Objectives : The purpose of this study was to investigate the effects of Angelicae acutilobae Radix Water Extract (AA) on the production of cytokines in RAW 264.7 cell stimulated with lipopolysaccharide (LPS). Method : RAW 264.7 cells were cotreated with AA (50 and $100{\mu}g/mL$) and lipopolysaccharide (LPS; $1{\mu}g/mL$) for 24 hours. After 24 hours treatment, using bead-based multiplex cytokine assay, concentrations of various cytokines such as interleukin(IL)-6, tumor necrosis factor-alpha(TNF-${\alpha}$) granulocyte colony-stimulating factor(G-CSF), granulocyte macrophage colony-stimulating factor(GM-CSF), and macrophage inflammatory protein(MIP)-$1{\alpha}$ were measured. Result : AA significantly inhibited LPS-induced production of IL-6 and MIP-$1{\alpha}$ from LPS-stimulated RAW 264.7 cells at the concentration of $50{\mu}g/mL$. AA significantly inhibited LPS-induced production of TNF-${\alpha}$ from LPS-stimulated RAW 264.7 cells at the concentration of $100{\mu}g/mL$. AA significantly inhibited LPS-induced production of G-CSF and GM-CSF in RAW 264.7 cells at the concentrations of 50 and $100{\mu}g/mL$. Conclusion : These results suggest that AA has anti-inflammatory effect related with its inhibition of proinflammatory cytokines such as IL-6, TNF-${\alpha}$, G-CSF, GM-CSF, and MIP-$1{\alpha}$ in LPS-induced macrophages.
Owing to its diverse range of bioactive compounds, Ganoderma lucidumhas garnered significant research attention for health promotion and disease prevention. Ganodermanondiol, which has a triterpenoid structure, is one of the major active compounds of G. lucidum. In the present study, the anti-inflammatory effects of ganodermanondiol were investigated to evaluate its usefulness as a functional ingredient. Ganodermanondiol (0.5-2 ㎍/mL) significantly inhibited the production of nitric oxide (NO), the expression of the cytokines tumor necrosis factor (TNF)??and interleukin 6 (IL-6), and the expression of cyclooxygenase (COX)-2 and inducible nitric oxide synthase (iNOS) in lipopolysaccharide-induced RAW 264.7 (murine macrophage) cells. Ganodermanondiol (0.5-2 ㎍/mL) also inhibited the phosphorylation of mitogen-activated protein kinase (MAPK) signal molecules, including p38 and c-Jun N-terminal protein kinase (JNK) in RAW 264.7 cells. Ganodermanondiol significantly inhibited the essential factors involved in the inflammatory responses of RAW 264.7 cells and would, therefore, serve as a potential prophylactic and therapeutic agent for immune-related diseases.
Flavonoids, a group of low molecular weight phenylbenzopyrones, have various pharmacological properties including antioxidant activity, anticancer, and immunomodulatory effects. In the present study, lipopolysaccharide (LPS) and phorbol 12-myristate 13-acetate/phytohemagglutinin (PMA/PHA) were used as stimulants for RAW 264.7 macrophages and human peripheral blood mononuclear cell (hPBMC), and tumor necrosis factor (TNF)-${\alpha}$ and interleukin (IL)-2 productions were measured. In addition, flavonoids were examined for their effects on LPS-induced NO production in RAW 264.7 macrophages. The results showed that all compounds were not strongly cytotoxic at the tested concentrations on hPBMC and RAW 264.7 macrophages. On immunomodulatory properties, catechin, epigallocatechin (EGC), naringenin, and fisetin repressed NO production and TNF-${\alpha}$ secretion. Furthermore, catechin, epigallocatechin gallate (EGCG), epicatechin (EC), luteolin, chrysin, quercetin, and galangin increased IL-2 secretion while EGC, apigenin, and fisetin inhibited the secretion. These results indicated that flavonoids have the capacity to modulate the immune response and have a potential anti-inflammatory activity. There was no obvious structure-activity relationship regard to the chemical composition of the flavonoids and their cell biological effects.
Yang, Kwon Min;Song, Sang mok;Lee, Doseung;Yoon, Weon-Jong;Kim, Chan-Shick;Kim, Chang Sook
Korean Journal of Plant Resources
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v.32
no.5
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pp.433-441
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2019
This study describes a preliminary evaluation of the anti-inflammatory activity and anti-atopic activity of Phormium tenax leaf extracts. P. tenax leaf was extracted using 70% ethanol and then fractionated sequentially with n-hexane, methylene chloride, ethyl acetate, n-butanol. In order to effectively screen for anti-inflammatory agents, we first investigated the inhibitory effects of P. tenax leaf crude extracts and solvent fractions on production of pro-inflammatory factors[nitric oxide(NO), prostaglandin $E_2(PGE_2)$, inducible nitric oxide synthase(iNOS) and cyclooxygenase-2(COX-2)] and pro-inflammatory cytokines [tumor necrosis $factor-{\alpha}(TNF-{\alpha})$, interleukin-6(IL-6) and $interleukin-1{\beta}(IL-1{\beta})$] in lipopolysaccharide(LPS)-stimulated RAW 264.7 cells. In addition, we also evaluated of their inhibitory effect on the atopic dermatitis-like inflammatory markers such as macrophage-derived chemokine(MDC) and thymus and activation-regulated chemokine(TARC) in HaCaT cells. Among the five solvent fractions of P. tenax, methylene chloride and ethyl acetate fractions inhibited production of pro-inflammatory factors and pro-inflammatory cytokines in a dose dependent manner, respectively. These fractions were also showed inhibitory activity for MDC and TARC expression levels in $IFN-{\gamma}-stimulated$ HaCaT cells, respectively. These results suggest that P. tenax have significantly effects of anti-inflammatory activity and anti-atopic activity that might be beneficial for the topical treatment of inflammatory skin disorders.
Objectives : Scrophulariae Radix (SRE) is commonly used in combination with other herbs as a nutrient and health strengthening agent, and to remove 'heat' and replenish vital essence. The water-based extract of this herb can lower blood pressure in both anesthetized and concious animals, and exhibits an anti-inflammatory activity. But, there is lack of studies regarding the effects of SRE on the immunological activities in molecular levels. The present study was conducted to evaluate the effect of SRE on the regulatory mechanism of cytokines and nitric oxide (NO) in Raw 264.7 cells. Method : After the treatment of Scrophulariae Radix methanol extract, cell viability was measured by MTT assay, NO production was monitored by measuring the nitrite content in culture medium. COX-2 and iNOS were determined by Immunoblot analysis, and levels of cytokine were analyzed by sandwich immunoassays. Results : Results provided evidence that SRE inhibited the production of nitrite and nitrate (NO), inducible nitric oxide synthase (iNOS), $interleukin-1{\beta}\;(IL-1{\beta})$ and interleukin-6 (IL-6), and the activation of phospholylation of inhibitor ${\kappa}B{\alpha}\;(p-I{\kappa}B{\alpha})$ in Raw 264.7 cells activated with lipopolysaccharide (LPS). Conclusion : These findings suggest that Scrophulariae Radix can produce anti-inflammatory effect, which may playa role in adjunctive therapy in Gram-negative bacterial infections.
Objectives : To develop natural ingredients that help prevent or treat anti-inflammatory-related diseases and use themas basic data, we investigated anti-inflammatory activity of Cynanchi Atrati Radix Et Rhizoma water extracts(CWE) in lipopolysaccharide(LPS)-induced murine macrophage cell line, RAW 264.7 cells. Methods : The cell viabilities were evaluated with RAW 264.7 cells. The production of nitric oxide(NO), prostaglandin E2(PGE2), pro-inflammatory cytokines such tumor necrotic factor(TNF)-α and interleukin(IL)-6 were assessed in LPS-induced RAW 264.7 cell treated with CWE. Furthermore, the protein expression of inducible nitric oxide synthase (iNOS), cyclooxygenase-2(COX-2), and mitogen-activated protein kinase(MAPK) were assessed by western blotting. Results : In RAW 264.7 cell, the cell viability by CWE treatment was more than 98.4% at a concentration of 100-400 ㎍/mL. At a concentration of 800 ug/ml of CWE, the cell viability was as low as 86%. At doses of 100, 200 and 400 ㎍/mL, CWE inhibited the production of NO, PGE2, TNF-𝛼 and IL-6 in a dose-dependent manner and also decreased the expression of iNOS and COX-2 from LPS-induced RAW 264.7 cells. In addition, CWE significantly inhibited the MAPK pathway including decreased the phosphorylation of the p38, c-Jun N-terminal kinase(JNK) and extracellular signal-regulated kinase(ERK1/2). Conclusions : Our study provides evidence that CWE inhibits the production of main pro-inflammatory molecules in LPS-induced RAW 264.7 cells via expression of p38, JNK, and ERK1/2 MAPK signaling pathways. Therefore, CWE is expected to be widely used as a natural ingredient for anti-inflammatory functional foods or pharmaceuticals in the future.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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