본 연구에서는 시중에 유통되는 생약 10종 (금전초, 목천료, 냉초, 현초, 계심, 진피, 율초, 구절초, 총백, 고량강)을 무작위로 선정하여 생약의 생리활성 효과를 스크리닝하였다. 각 생약을 70% 에탄올로 추출한 다음 추출물의 마우스 대식세포에 대한 NO 생성 억제 효능을 확인한 결과, 구절초 추출물이 LPS에 의해 유도된 NO 생성을 억제하는 효과가 가장 높은 것으로 확인되었다. 따라서, 구절초 70% ethanol 및 물 추출물에 대한 농도별 NO 생성 억제 효능을 측정하였다. 구절초 추출물은 두 용매 추출물 모두에서 대식세포의 NO 조절 효과가 우수한 것으로 나타났으며, 70% ethanol 추출물의 고농도 (250 ㎍/mL) 처리군에서는 LPS에 의해 유도된 NO를 99% 이상 억제하는 것으로 확인되었다. 또한, 구절초 70% ethanol 및 물 추출물이 인체 대동맥 평활근 세포주 HASMCs에서 TNF-α에 의한 부착인자의 발현 억제 효능을 확인하였다. 그 결과, 구절초의 70% ethanol 추출물 및 물 추출물이 TNF-α로 자극된 인체 대동맥평활근 세포주 HASMC에서 세포 부착 인자의 발현을 억제하였으며, 이 결과는 구절초가 혈관 염증을 조절할 수 있는 가능성을 제시한다. 본 연구 결과는 구절초의 항염증 및 혈관 염증 조절 기능 소재로서 개발을 위한 기초 자료로 활용될 수 있을 것으로 사료된다.
Objectives : Crohn's disease is a severe chronic inflammation that is treated mainly by immunosuppression, which often has serious side effects. There is need to develop new therapeutic methods or drugs that have few side effects in order to treat this disease. Acupuncture with Moxi-tar at Cheonchu (ST25) has anti-inflammatory properties, but the mechanism of its anti-inflammatory actions is unclear. We investigated the protective effects and speculated the mechanisms of acupuncture with Moxi-tar at ST25 on trinitrobenzene sulfonic acid (TNBS) induced colitis in mice which is a well known Crohn's disease animal model. Methods : 5 % TNBS was treated at day 1 and day 7 into rectum of mice. To investigate therapeutic effects of acupuncture with Moxi-tar at ST25, acupuncture was carried out on day 3, and day 6. For the data analysis, we observed macroscopic and microscopic findings of the colon. Weight and width of the colon, degree of damage, changes of body weight, and myeloperoxygenase (MPO) activity were checked. For analysing protein expression, we carried out immunohistochemical staining and Western blot. For analysing mRNA expression, RT-PCR was carried out. Results : TNBS induced damages on the colon of mice, while acupuncture of Moxi-tar at ST25 suppressed TNBS mediated damages similar to those on the colons of mice in the control (not treated with TNBS) group. The average body weight of TNBS treated mice (77.4%) was decreased compared with that of the control mice (105%), and acupuncture with Moxi-tar at ST25 suppressed the loss of body weight caused by TNBS (from 77.4% to 95.3%). TNBS induced infiltration of immune cells in all layers of the colon while acupuncture with Moxi-tar at ST25 suppressed infiltration of immune cells caused by TNBS. Furthermore, acupunctured with Moxi-tar at ST25 suppressed macro-, micro- colonic damages caused by TNBS. Acupunctured with Moxi-tar at ST25 dramatically improved the clinical and histopathological symptoms such as the increase in weight of the distal colon and the MPO activity in TNBS-induced colitis. Acupuncture with Moxi-tar at ST25 down-regulated the nuclear transcription factor kappa B ($NF-{\kappa}B$) activity and suppressed tumor necrosis factor-a (TNF-${\alpha}$), interleukin-$1{\beta}$ (IL-1${\beta}$), and intracellular adhesion molecule-1 (ICAM-1) expressions caused by TNBS. Conclusions : Acupuncture with Moxi-tar at ST25 helps recovery from the TNBS-induced colonic damage by down-regulation of $NF-{\kappa}B$ activity and suppressing of TNF-${\alpha}$, IL-1${\beta}$, and ICAM-1 expressions. This may be an important method for the treatment of Crohn's disease.
We have previously shown that paraquat (PQ)-induced oxidative stress causes dramatic damage in various human cell lines. Naringenin (NG) is an active flavanone, which has been reported to have beneficial bioactivities, including antioxidative, anti-inflammatory, and antitumorigenic activities, with a relatively low toxicity to normal cells. In this study, we intended to assess the cytoprotective effect of NG against PQ-induced toxicity in the human bronchial epithelial BEAS-2B cell line. Co-treatment with NG in PQ-treated BEAS-2B cells can reduce PQ-induced cellular toxicity. NG can also decrease the generation of intracellular ROS caused by PQ treatment. We also observed that treatment with NG in PQ-exposed BEAS-2B cells can significantly induce the expression of antioxidant-related genes, including GPX2, GPX3, GPX5, and GPX7. NG co-treatment can also activate the NRF2 transcription factor and promote its nuclear translocation. In addition, NG co-treatment can induce the expression of NRF2-downstream target genes such as that of heme oxygenase-1 (HO-1) and NAD(P)H:quinone oxidoreductase 1 (NQO1). A small interfering RNA study revealed that the knockdown of NRF2 can abrogate NG-mediated protection of the cells from PQ-induced cellular toxicity. We propose that NG effectively alleviates PQ-induced cytotoxicity in human bronchial epithelial BEAS-2B cells through the NRF2-regulated antioxidant defense pathway, and NG might be a good therapeutic candidate molecule in oxidative stress-related diseases.
Wounds are commonly created during almost every kind of surgery, trauma and skin diseases. Delayed wound healing affects a plenty of patients and requires prolonged treatments that seriously reduce the quality of life for patients. Skin damage involving large areas or great severity can lead to disability or even death. Wound healing involves a complicated series of actions, of various tissues and cell lineages, concerning inflammation, migration, proliferation, reepithelialization, and remodeling. Sopung-san is reported to have anti-inflammatory effect and has been used for various skin diseases such as allergic dermatitis and atopic dermatitis. In this study, the hypothesis that oral treatment with Sopung-san could enhances healing potential on rat full thickness skin wounds was tested. Twenty young male Sprague-Dawley rats were used for the studies. A full-thickness skin wound was made on the dorsal skin of the rats. Either Sopung-san water extract (SPS) or saline (Control) was orally administrated every day. The wound area was measured and the percentages of wound contraction, wound healed and wound epithelization were calculated. Wound tissue samples were excised following injection for histopathological and immunohistological examination. Wound area in rats of SPS group significantly was decreased compared to Control. SPS group showed significant promotion of wound healing compared to Cotrol group in the percentages of wound contraction, wound healed and wound epithelization. Histopathological examination revealed that SPS induces neo-vascularization potential in wound healing process. SPS treatment in rats significantly accelerated cutaneous wound healing in the neo-vascularization process by increasing VEGF and $TGF-{\beta}1$ synthesis. The results suggest that Sopung-san affects key cellular processes responsible for wound repair and point to a unique potential for this molecule in the therapy of skin wounds, particularly as an angiogenic agent.
Objective : Milk fat globule-epidermal growth factor VIII (MFG-E8) may play a key role in inflammatory responses and has the potential to function as a neuroprotective agent for ameliorating brain injury in cerebral infarction. This study aimed to determine the role of MFG-E8 in brain injury in the subacute phase of cerebral ischemia in a rat model. Methods : Focal cerebral ischemia was induced in rats by occluding the middle cerebral artery with the modified intraluminal filament technique. Twenty-four hours after ischemia induction, rats were randomly assigned to two groups and treated with either recombinant human MFG-E8 or saline. Functional outcomes were assessed using the modified Neurological Severity Score (mNSS), and infarct volumes were evaluated using histology. Anti-inflammation, angiogenesis, and neurogenesis were assessed using immunohistochemistry with antibodies against ionized calcium-binding adapter molecule 1 (Iba-1), rat endothelial cell antigen-1 (RECA-1), and bromodeoxyuridine (BrdU)/doublecortin (DCX), respectively. Results : Our results showed that intravenous MFG-E8 treatment did not reduce the infarct volume; however, the mNSS test revealed that neurobehavioral deficits were significantly improved in the MFG-E8-treated group than in the vehicle group. Immunofluorescence staining revealed a significantly lower number of Iba-1-positive cells and higher number of RECA-1 in the periinfarcted brain region, and significantly higher numbers of BrdU- and DCX-positive cells in the subventricular zone in the MFG-E8-treated group than in the vehicle group. Conclusion : Our findings suggest that MFG-E8 improves neurological function by suppressing inflammation and enhancing angiogenesis and neuronal proliferation in the subacute phase of cerebral infarction.
Hui-Won Park;Sun-Hee Park;Hyeon-Ju Jo;Tae-Gyu Kim;Jeong Hyun Lee;Seung-Goo Kang;Young-Saeng Jang;Pyeung-Hyeun Kim
IMMUNE NETWORK
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제20권5호
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pp.38.1-38.12
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2020
Dendritic cells (DCs) are professional antigen-presenting cells (APCs) that initiate both T-cell responses and tolerance. Tolerogenic DCs (tDCs) are regulatory DCs that suppress immune responses through the induction of T-cell anergy and Tregs. Because lactoferrin (LF) was demonstrated to induce functional Tregs and has a protective effect against inflammatory bowel disease, we explored the tolerogenic effects of LF on mouse bone marrow-derived DCs (BMDCs). The expression of CD80/86 and MHC class II was diminished in LF-treated BMDCs (LF-BMDCs). LF facilitated BMDCs to suppress proliferation and elevate Foxp3+ induced Treg (iTreg) differentiation in ovalbumin-specific CD4+ T-cell culture. Foxp3 expression was further increased by blockade of the B7 molecule using CTLA4-Ig but was diminished by additional CD28 stimulation using anti-CD28 Ab. On the other hand, the levels of arginase-1 and indoleamine 2,3-dioxygenase-1 (known as key T-cell suppressive molecules) were increased in LF-BMDCs. Consistently, the suppressive activity of LF-BMDCs was partially restored by inhibitors of these molecules. Collectively, these results suggest that LF effectively causes DCs to be tolerogenic by both the suppression of T-cell proliferation and enhancement of iTreg differentiation. This tolerogenic effect of LF is due to the reduction of costimulatory molecules and enhancement of suppressive molecules.
Hypercholesterolemia is a pivotal pathogenic factor for the development and maintenance of atherosclerosis. The present study was designed to evaluate whether the methanol extract of Sorbus commixta cortex (MSC) restores vascular dysfunction in association with the aortic expressions of proinflarnmatory and adhesion molecules in high cholesterol (HC) diet-rats. Chronic treatment with low (100 mg/kg/day) or high doses (200 mg/kg/day) of MSC lowered the increase in plasma levels of triglyceride (TG) and low-density lipoprotein (LDL) cholesterol induced by a cholesterol-enriched diet without affecting on the plasma level of high density lipoprotein (HDL)-cholesterol. Vascular tone attenuated in the HC-diet rats was restored by administration with MSC. Treatment with MSC also suppressed the HC-induced increase in the monocyte chemoattractant protein-1 (MCP-1) and nuclear factor-$_K$B (NF-$_K$B) p65 expressions as well as expressions levels of adhesion molecules including intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1), vascular cell adhesion molecule-1 (ICAM-1), and E-selectin in aorta. The present study also showed that MSC inhibited the HC-mediated induction of ET-1 and ACE expression. In histopathological examination, aortic segments in the HC-diet rat revealed thickening intima and media, which were blocked by administration with MSC. Taken together, MSC could suppress the development of atherosclerosis in the HC-diet rat model through the inhibition of the aortic expression levels of pro-inflammatory and adhesion molecules.
양격산화탕은 9가지의 약재로 구성된 처방으로 한의학적 뇌졸중 치료에 가장 널리 사용되는 처방 중 하나이며, 주로 사상체질이론의 소양인 뇌졸중 치료에 적용된다. 본 연구는 실험동물을 이용한 뇌졸중에 대한 양격산화탕의 효과에 대한 연구가 전무하여, photothrombosis로 유발된 허혈성 마우스모델을 이용하여 양격산화탕의 효과를 살펴 보았다. 동물행동학적 변화와 더불어 뇌손상에 미치는 영향을 뇌경색 용적에 대한 조직학적 검색 및 신경염증과 신생세포에 대한 면역조직화학적 검색으로 살펴 보았다. 동물행동학적 결과로 보아, 양격산화탕은 뇌허혈에 의해 손상된 운동기능, 즉 wire grip과 rotarod test에 의한 운동조정과 균형 능력 등에 대한 기능적 회복을 보였으며, 이는 조직학적 검색으로 관찰된 뇌경색 용적의 축소를 동반하였다. 면역조직화학적 결과를 보면, 양격산화탕은 tumor necrosis factor-${\alpha}$와 myeloperoxidase 면역반응세포의 수를 현저히 감소시켰다. 이와 반대로 양격산화탕은 glial fibrillary acidic protein와 ionized calcium-binding adapter molecule 1 면역반응세포의 수를 현저히 증가시켰다. 또한 양격산화탕은 Ki67/doublecortin 면역반응세포의 수를 현저히 증가시켰다. 이상의 결과로 보아, 양격산화탕은 항염증, astrocyte와 microglia의 활성화 및 신경세포의 증식을 통해 뇌경색 용적을 감소시키며, 이는 뇌허혈성 운동장애에 대한 완화 효과로 이어 지는 것을 알 수 있다. 따라서 양격산화탕은 뇌손상에 대한 신경기능적 완화효과를 보여 줌으로서 뇌졸중 환자에 대한 유효한 치료제로 사료된다.
본 연구에서는 상추 추출물이 혈관내피세포의 염증반응에 미치는 영향 및 지질대사 개선 효과를 확인하기 위해 HUVEC을 이용한 in vitro 실험 및 고콜레스테롤혈증 모델을 이용한 동물실험을 수행하였다. 상추 추출물은 HUVEC에서 TNF-${\alpha}$에 의해 증가되는 세포접착단백질 ICAM-1, VCAM-1의 발현을 억제하였고 TNF-${\alpha}$에 의해 촉진되는 HUVEC와 단핵구 세포의 부착을 감소시켰다. 또한 상추 추출물은 TNF-${\alpha}$에 의해 증가되는 염증성 사이토카인 IL-6, IL-8 및 동맥경화 유발 케모카인 MCP-1의 생성을 농도 의존적으로 억제하였다. 고콜레스테롤혈증 동물모델에서 고콜레스테롤 식이군 및 상추 추출물이 첨가된 고콜레스테롤 식이군의 체중증가량 및 식이섭취량은 유의적인 차이를 보이지 않았다. 고콜레스테롤 식이군의 혈중 총 콜레스테롤 함량은 정상 식이군에 비해 크게 증가하였고 상추추출물이 첨가된 고콜레스테롤 식이군의 콜레스테롤 함량은 유의적으로 감소하였다. 고콜레스테롤 식이군의 혈중 중성지방 함량은 정상 식이군에 비해 약간 감소하였지만 유의적인 차이는 보이지 않았다. 상추 추출물이 첨가된 고콜레스테롤 식이군의 경우 혈중 중성지방 함량은 고콜레스테롤 식이군과 비교하였을 때 유의적인 차이를 보이지 않았다. 고콜레스테롤 식이군의 HDL-콜레스테롤 함량은 정상 식이군에 비해 감소하였고 상추 추출물이 첨가된 경우 HDL-콜레스테롤 함량은 고콜레스테롤 식이군에 비해 유의적으로 증가하였다. LDL-콜레스테롤 함량은 고콜레스테롤 식이군에서 크게 증가하였고 상추 추출물이 첨가된 경우 감소하였다. 혈청의 동맥경화지수 및 심혈관지수는 고콜레스테롤 식이군에서 정상 식이군에 비해 유의적으로 증가하였고 상추 추출물이 첨가된 고콜레스테롤 식이군에서 유의한 감소를 나타내었다. 이상의 연구결과는 상추 추출물이 혈관내피세포의 염증반응을 억제하여 혈관협착을 방지할 수 있고 혈중 지질대사의 개선 효과를 보여 혈액순환개선 및 동맥경화, 심혈관질환의 예방과 치료에 효과가 있다는 것을 의미한다.
선천성 면역 반응을 위해 중요한 역할을 하는 TLRs가 외부 병원성 물질에 자극을 받게 되면 NF-${\kappa}$B를 활성화시키며, 그 결과로 염증을 유도하는 COX와 같은 유전자를 발현한다. 이번 연구에서, 옛날부터 지금까지 전통적인 약재로써 질병 치료에 다양하게 쓰이고 있는 감초의 뿌리에서 추출한 성분 중의 하나인 ILG가 NF-${\kappa}$B활성과 COX 발현을 어떻게 조절하여 항염증 효과를 가지고 있는지 알아보았다. ILG는 TLR agonists인 MALP-2, Poly[I:C], 그리고 LPS에 의해 유도된 NF-${\kappa}$B 활성화와 COX-2 발현을 억제시켰다. 또한 ILG는 리간드(ligand)에 독립적인 TLRs signaling downstream molecules인 MyD88, IKK ${\beta}$, 그리고 p65에 의해서 유도된 NF-${\kappa}$B 활성을 억제시켰다. 이러한 결과는 한약재로서 많이 이용되는 감초가 단지 한약의 쓴맛을 줄이기 위함이 아니라 TLRs 신호전달 체계를 조절하여 항염증 효과를 가지고 있다는 것을 보여주는 것이라 할 수 있겠다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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