• 대한한방소아과학회지
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• 제28권3호
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• pp.31-46
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• 2014

Objectives Forsythiae Fructus treatment has been used for inflammatory and allergic diseases in Korean Medicine. Nevertheless, the mechanism of action and the cellular targets are not understood well. The pathogenesis of allergic diseases are associated with Th2 cytokines such as IL-13, MIP-$1{\alpha}$, IL-13, IL-5, GM-CSF, IL-4, TNF-${\alpha}$ and IL-6, which are secreted by the mast cells. This study was conducted to investigate the effects of Forsythiae Fructus extracts (FF) on Th2 cytokines expression and signal transduction in MC/9 mast cells. Methods In the study, MC/9 mast cells were stimulated with DNP-IgE for 24 hours and then treated separately with CsA $10{\mu}g/m{\ell}$ and varying doses of FF for one hour. MC/9 mast cells stimulated with DNP-IgE was the control group, a treatment with CsA was the positive control group and a treatment with varying doses FF was the experimental groups. The mRNA levels of IL-13, IL-5, GM-CSF, IL-4, TNF-${\alpha}$, IL-6 were analyzed with Real-time PCR. The levels of IL-13, MIP-$1{\alpha}$ were measured using enzyme-linked immunosorbent assays(ELISA). NFAT, AP-1 and NF-${\kappa}B$ p65 were examined by Western blot analysis. Results 1. FF were observed to suppress the mRNA expression of IL-13, IL-5, GM-CSF, IL-4, TNF-${\alpha}$, IL-6 in comparison to DNP-IgE control group. 2. FF also has inhibited the IL-13, MIP-$1{\alpha}$ production significantly in comparison to DNP-IgE control group. 3. Western blot analysis of transduction factors involving Th2 cytokines expression has revealed a prominent decrease of the mast cell specific transduction factors including NFAT-1, NFAT-2, c-Jun, and NF-${\kappa}B$ p65 but c-Fos. Conclusions In conclusion, the anti-allergenic activities of FF may be strongly related to the regulation of transcription factors NFAT-1, NFAT-2, c-Jun, and NF-${\kappa}B$ p65 causing inhibition of Th2 cytokines in mast cells.

• The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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• 제2권1호
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• pp.119-131
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• 1998

It has been reported that the glycoprotein extracted from Aloe has strong anti-inflammatory response. However, there has been no research report yet about the effect of Aloe on allergic hypersensitivity reactivity. By using guinea pig lung mast cells, this study aimed to examine the effects of Aloe glycoprotein (NY945) on the mediator releases caused by mast cell activation, and also aimed to assess the effects of NY945 on the mechanism of mediator releases in the mast cell activation. We partially purified mast cell from guinea pig lung tissues by using the enzyme digestion, the rough and the discontinuous density percoll gradient method. Mast cells were sensitized with IgG1 (anti-OA) and challenged with ovalbumin. Histamine was assayed by fluorometric analyzer, leukotrienes by radioimmunoassay. The phospholipase D activity was assessed by the production of labeled phosphatidylalcohol. The amount of mass 1, 2-diacylglycerol (DAG) was measured by the $[^3H]DAG$ produced when prelabeled with $[^3H]myristic$ acid. The phospholipid methylation was assessed by measuring the incorporation of the $[^3H]methyl$ moiety into phospholipids of cellular membranes. Pretreatment of NY945 (10 ${\mu}g$) significantly decreased histamine and leukotrienes releases during mast cell activation. The decrease of histamine release was stronger than that of leukotriene during mast cell activation. The phospholipase D activity increased by the mast cell activation was decreased by the dose-dependent manner in the pretreatment of NY945. The amount of DAG produced by PLC activity was decreased by NY945 pretreatment. The amount of mass 1, 2-diacylglycerol produced by activation of mast cells was decreased in the pretreatment of NY945. NY945 pretreatment strongly inhibited the incorporation of the $[^3H]methyl$ moiety into phospholipids. The data suggest that NY945 purified from Aloe inhibits in part an increase of 1, 2-diacylglycerol which is produced by activating mast cells with antigen-antibody reactions, which is mediated via phosphatidylcholine-phospholipase D and phosphatidylinositol-phospholipase C systems, and then followed by the inhibition of histamine release. Furthermore, NY945 reduces the production of phosphatidylcholine by inhibiting the methyltransferase I and II, which decreases the conversion of phosphatidylcholine into arachidonic acid and inhibits the production of leukotrienes.

• 대한화장품학회지
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• 제46권3호
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• pp.283-294
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• 2020

본 연구에서는 유자 완숙과의 중량비 13%를 차지하지만 대부분 폐기 처분되어 활용이 되지 않는 유자씨앗의 활용도를 높이기 위하여, 냉압착 방법으로 추출한 유자씨 오일의 피부미용 효능을 연구하였다. 유자씨 오일은 주로 oleic acid와 linoleic acid로 이루어진 불포화 지방산을 약 74% 함유 하는 것으로 확인되었으며, 주로 유자 과피에 포함되는 limonene은 약 0.0187%로 매우 낮은 함량을 포함하였다. 유자씨 오일의 DPPH radical 소거 활성능력을 평가한 결과, 5% 농도에서 26%의 DPPH 라디칼 소거능력을 확인하였다. 항염 효능을 확인하기 위해 유자씨오일에 대한 RAW 264.7 세포 독성 시험 및 NO 생성을 시험한 결과, 세포 독성을 나타내지 않는 0.05% 농도에서 NO 생성을 53% 억제하였다. 그리고 항알러지 효능확인을 위한 RBL-2H3 세포 독성 및 β-hexosaminidase 방출 억제 효능 시험에서도 세포 독성을 나타내지 않는 0.05% 농도에서 β-hexosaminidas 방출을 26% 억제함을 확인하였다. 마지막으로 유자씨 오일을 5% 함유한 O/W 에멀젼의 인체 적용 시험 결과에서는 caprylic/capric triglyceride를 동량 함유하는 대조 에멀젼에 비하여 높은 피부 보습 효능을 나타내었다. 따라서 유자씨 오일은 우수한 스킨케어 소재로 활용 될 수 있을 것으로 판단된다.

• 대한한방내과학회지
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• 제33권4호
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• pp.418-428
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• 2012

Objectives : Ojeok-san, a traditional herbal formula, has been used for the treatment of cold illness and its related symptoms such as headache, nausea and indigestion. This study was performed to compare effects of water (OJSW) and 70% ethanol extracts (OJSE) of Ojeok-san on inflammation and its related diseases atopy, asthma and obesity in vitro. Methods : We performed HPLC to investigate contents of index components of OJSW and OJSE. We investigated the effects of OJSW and OJSE with an in vitro model, using 5 cell lines, specifically RAW 264. 7, HaCaT, MC/9, BEAS-2B and 3T3-L1. Results : HPLC analysis displayed that the contents of index components were higher in OJSE than OJSW. In lipopolysaccharide (LPS)-treated RAW 264.7 macrophages, OJSE significantly inhibited productions of interleukin (IL)-6, nitrite and prostaglandin $E_2$ ($PEG_2$). In TNF-${\alpha}$/IFN-${\gamma}$-treated HaCaT keratinocytes, OJSE significantly lowered levels of macrophage-derived chemokine (MDC) as well as regulated and normal T cell expressed and secreted (RANTES). OJSE also had a protective effect on inflammatory response by decreasing RANTES secretion in TNF-${\alpha}$-stimulated BEAS-2B cells. Conclusions : We conclude that OJSE could be more appropriate to enhance the biological activities against inflammation and its related diseases, and could be applied as a bioactive material for developing the potent anti-inflammatory agents.

• 한국식품영양과학회지
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• 제42권7호
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• pp.1015-1021
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• 2013

창과감초(Glycyrrhiza inflata Batal)는 한약재의 조화를 돕고 해독, 항염증, 항궤양 등의 약리작용으로 한방에서 널리 이용되는 약용식물이다. 본 연구에서는 지방세포와 조골세포에서 감초의 생리활성을 확인하고자 감초에탄올추출물(GBE)을 이용하여 세포분화 촉진여부를 조사하였다. GBE의 세포독성여부를 통해 안전하다고 확인된 $1{\sim}30{\mu}g/mL$의 농도 내에서 실험이 진행되었고 지방세포 분화조건에서 다분화능 세포 C3H10T1/2과 지방전구세포 3T3-L1의 Oil Red O 염색을 통해 GBE의 지방세포분화 촉진효과를 확인할 수 있었다. 또한 지방세포의 핵심전사조절인자인 $PPAR{\gamma}$와 그의 표지유전자 aP2, AdipoQ, $C/EBP{\alpha}$의 발현량 증가를 통해 GBE의 지방세포분화 촉진효과를 재확인하였다. 이와 일관된 결과로서 조골세포 분화조건에서 다분화능 세포 C3H10T1/2과 조골전구세포 MC3T3-E1의 ALP 염색을 통해 GBE의 조골세포분화 촉진효과를 확인하였고 조골세포 표지유전자인 ALP, RUNX2, osterix, collagen의 발현량 증가를 통해 GBE의 조골세포분화 촉진효과를 재확인하였다. 이에 따라 본 연구에서는 GBE의 지방세포와 조골세포 분화효과를 매개하는 감초의 구성성분을 조사하기 위해 GA(glycyrrhizic acid)와 LA(licochalcone A)의 분화촉진 여부를 확인한 결과, GA는 영향을 주지 않으나 LA가 GBE의 세포분화효과를 매개한다고 사료된다. 따라서 본 연구에서는 제2형 당뇨와 그에 수반되는 골질환과 골다공증에 대한 치료 소재로서 GBE와 그의 생리활성을 매개할 수 있는 LA의 가능성을 보았으며 GBE에서 분리되는 다양한 화합물의 동정 및 생리활성 효과, LA와의 상승효과 등의 추후 연구가 기대된다.

• 생명과학회지
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• 제29권4호
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• pp.478-483
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• 2019

본 실험에서는 Pediococcus inopinatus Y2 (P. inopinatus Y2) 유산균으로 발효시켜 제조한 발효 두유커드가 알레르기성 피부질환의 치료에 미치는 효과를 확인하기 위해 알레르기 유발 ICR 마우스를 대상으로 4주간 경구투여한 이후, 마우스의 체중, 귀 두께, IgE 농도, 면역 기관 중량 및 혈청 IgE 농도 변화를 비교 분석하였다. 대부분의 동물실험 군은 적당한 체중 증가를 보였다. 귀 두께에서, 아무처리를 하지 않은 그룹(No group)이 가장 낮은 두께를 나타냈고, PA 처리 그룹이 알레르기가 유발되어 두꺼워졌다. PA로 유도된 AD 마우스를 육안으로 관찰하였을 때, 발효 두유커드 투여그룹(FSC group)의 피부 상태는 더욱 개선되었다. 이에 따라 유산균에 의한 발효 두유커드가 피부염을 회복시킬 수 있음이 확인되었다. 마우스의 비장과 림프절의 무게와 IgE 농도를 비교 한 결과, 두유를 투여한 그룹(SM group)도 치료 효과를 보였으나 발효 두유커드의 알레르기 치료 효과가 더 우수 하였다. 결과적으로 발효 된 두유커드가 알레르기성 피부질환을 개선 할 수 있음을 확인할 수 있었다.

• 한국식품영양과학회지
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• 제46권3호
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• pp.306-313
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• 2017

본 연구에서는 전통적인 기능성 식품이자 의약품으로 사용되었던 자죽염(PubS)과 복분자를 조합한 복분자 자죽염(PuBS-R)을 사용해 비특이적, 선천성 면역에 중요한 역할을 하는 대식세포에서의 영향을 확인하였다. PuBS-R은 마우스 대식세포인 Raw264.7 세포에서 $1,000{\mu}g/mL$ 농도처리 시 세포의 증식을 유발하였으며, 그에 반해 PuBS를 $1,000{\mu}g/mL$ 처리 시 유의하게 세포 증식률이 억제되었다. 이어서 면역 관련 사이토카인 $TNF-{\alpha}$, $IFN-{\gamma}$, IL-12, IL-10 등을 유전자 단계와 단백질 단계에서 평가하였다. 그 결과 PuBS-R은 50, 100, $500{\mu}g/mL$에서 유의한 증가율을 보였고, 무엇보다 이것은 PuBS 군에 비해서도 월등한 증가율을 확인할 수 있었다. 마지막으로 마우스의 복강에서 분리한 peritoneal macrophage에 PuBS-R을 처리 후 $TNF-{\alpha}$, $IFN-{\gamma}$, IL-12, IL-10, iNOs를 단백질 단계에서 평가한 결과, Raw264.7 세포에서 얻은 결과와 동일한 결과를 확인할 수 있었다. 이러한 결과로 미루어 보아 PuBS-R은 인체의 대식세포 활성의 증가를 통해 비특이적, 선천성 면역력을 증가시킬 것으로 판단되며, 이러한 결과를 바탕으로 추후 실험동물을 이용한 in vivo 후속 연구를 통해 PuBS-R의 면역증강 기능성 식품 개발이 가능할 것으로 생각된다.

• 대한한방소아과학회지
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• 제25권1호
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• pp.1-27
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• 2011

Objectives: The purpose of this study is to investigate the effects of Yijungtang(YJT) on atopic dermatitis in an in-vitro and in-vivo experiment using a RBL-2H3 mast cells and a NC/Nga atopic dermatitis mouse. Methods: In-vitro experiment, IL-4, IL-13 mRNA expression were evaluated by a real-time PCR, IL-4, IL-13 production by ELISA and transcription factor as GATA-1, GATA-2, NF-AT1, NF-AT2, AP-1 and NF-kB by western blotting. In-vivo experiment, clinical skin score we evaluated by, hematology and Serum total IgE and IgG1 of NC/Nga atopic dermatitis mouse, cytokine level, total number of cell, Immunohistochemical staining and Histological features of auxiliary lymph node(ALN), draining lymph node(DLN), peripheral blood mononuclear cells(PBMCs) and dorsal skin tissue in NC/Nga mouse. Results: YJT decreased IL-4, IL-13 mRNA expression, IL-4, IL-13 production and prominently decreased the expression of mast cell specific transcription factors including GATA-2, NF-AT2, c-Fos and NF-kB. YJT oral administration reduced the levels of skin severity scores. It also decreased the level of inflammatory cytokines such as IL-5, IL-13, histamine and IgE in the serum. It elevated IFN-gamma level in the spleenocyte culture supernatant but decreased. $CD3e^+$, $CD19^+$, $CD4^+$, $CD8^+$, $CD3e^+CD69^+$, $CD11b^+Gr-1^+$, $CCR3^+$ in the PBMCs, $CD4^+$, $CD8^+$, $CD3e^+CD69^+$, $B220^+CD23^+$ in the ALN, $CD4^+$, $CD3e^+CD69^+$ in the ALN and $CD4^+$, $CD11b^+Gr-1^+$ in the dorsal skin. Histological examination showed that infiltration levels of immune cells in the skin of AD-induced NC/Nga mice were much improved by YJT oral administration. Conclusions: The anti-allergic activities of YJT may be mediated by down-regulation of Th2 cytokines, such as IL-4 and IL-13, through the regulation GATA-2, NF-AT2 and NF-kB transcription factors in mast cells. YJT would be regulate molecular mediators and immune cells which are functionally associated with atopic dermatitis induced in NC/Nga mice, and may play an important role in recovering AD symptoms.

• 대한화장품학회지
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• 제48권2호
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• pp.105-112
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• 2022

2'-fucosyllactose (2'-FL)는 사람의 모유에 가장 많이 존재하는 올리고당(human milk oligosaccharides, HMOs)으로, 장내 유용 미생물의 성장을 촉진시키고 알레르기, 염증 반응을 완화시키는 것에 도움을 준다. 다양한 긍정적 기능을 가진 2'-FL의 미백 화장품 소재로써의 가능성을 확인하고자, 본 연구를 통해 멜라닌 생성 저해 효능 및 자가포식 유도 가능성을 검토하였다. 인간 유래 멜라닌 생성 세포로 알려진 MNT-1 세포에서 독성 실험을 진행하여 40 g/L 이하에서 세포독성이 없음을 확인하였고, 동일 세포에서 20 g/L 농도로 7 일간 처리하여 멜라닌 생성량을 분석한 결과, 40% 멜라닌 생성 감소를 확인하였다. 멜라닌 생성 관련 인자 TYR 및 TYRP1의 단백질 발현량을 western blot 법을 이용하여 분석한 결과, 2'-FL 처리는 이들을 감소시켰으며, 더불어 자가포식 표지자인 microtubule-associated protein 1 light chain 3 (LC3)의 형태가 LC3-I에서 LC3-𝚷로 변환을 확인할 수 있었다. 공초점 현미경을 통해 2'-FL 처리에 따른 LC3 puncta의 증가가 확인되었다. 따라서, 2'-FL로 활성화된 자가포식이 TYR 및 TYRP1 단백질 발현량을 저해시킴으로서 멜라닌 생성을 감소시키는 것으로 시사된다. 결론적으로 2'-FL은 자가포식을 유도하여 멜라닌 생성이 억제됨이 확인되어 미백 화장품 소재로써의 가능성이 기대된다.

• 생명과학회지
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• 제19권6호
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• pp.735-743
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• 2009

Naringill은 레몬, 오렌지에서 발견되는 flavonoid계열에 속하는 물질로 여러 식물과 과일에 다량 함유되어 있다. 항암, 항산화 작용을 하는 것으로 알려져 있는 Naringin을 ovalbumin (OVA)으로 유도한 천식(asthma) 생쥐모델을 이용하여 치료효과를 알아 보았다. 기관지 폐포 세척액을 회수하여 백혈구의 수적 변화, 제2형 협조T세포 (Th2 cell)가 생산하는 Il-4, IL-5의 생산에 미치는 영향과 폐조직에서 matrix metalloproteinase (MMP)-9 활성을 측정하였다. 또한, 최근에 Th1/Th2 전사인자로서 GATA-3가 밝혀졌는데 이번 실험에서 Naringin이 ovalbumin (OVA)으로 유도한 천식(asthma) 생쥐모델에서 Th1, Th2 싸이토가인과 유전자 발현을 조절할 수 있는가에 대하여 알아보았다 그 결과 기관지 폐포 세척액에서 OVA로 감작하여 천식을 유도한 실험군에서는 호산구의 현저한 증가, Th2 형 싸이토가인 (IL-4, 1L-5)의 증가가 관찰되었다. 그러나 Naringin 을 투여한 그룹에서는 OVA의 감작에 의하여 증가한 각종 염증성 지표들이 감소하거나 정상화 되었다. 또한 OVA에 의하여 증가된 기도저항성이 Naringin 투여에 의하여 감소하였으며 폐조직의 염증성 소견도 뚜렷하게 감소되었다. 이와 같은 연구 결과는 Naringin이 천식의 치료에 유용하게 쓰일 수 있음을 시사해준다.