• 대한핵의학회지
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• 제28권1호
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• pp.112-123
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• 1994

${\gamma}$-Glutamyltransferase (GGT: E.C. 2.3.2.2.) is a glycoprotein enzyme which is involved in glutathione metabolism and amino acid transport through the plasma membrane. It is distributed widely in several organs including liver and kidney. Several isozymes of GGT have been reported and some of the isozymes may be associated with hepatocarcinogenesis. We have produced six monoclnal antibodies (mAbs) against GGT purified from the liver of 2-acetamidofluorene (AAF) treated rats. All of the six mAbs were obtained by immunizing mice with liver GGT Six hybridomas which produced anti-GGT Abs were extensively subcloned and injected into the peritoneal cavity of BALB/c mice to obtain large quantities of Abs. These mAbs were purified from ascites by ammonium sulfate precipitation and protein A sepharose CL-4B column chromatography. Using these mAbs we preformed enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), radioimmunoassay (RIA), immunohistochemistry (IHC), and autoradiography (ARG) to study the distribution of GGT isozyme in tissue. The results indicate that GGT-mAb 1 is specific for the AAF treated liver GGT, GGT-mAb 5 for the normal liver GGT, and GGT-mAb 6 for the normal kindey GGT. These mAbs may be used to evaluate the distribution of GGT isozymes in different tissues.

• Journal of Animal Science and Technology
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• 제64권6호
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• pp.1117-1131
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• 2022

Previous studies reported that Bifidobacterium animalis ssp. lactis HY8002 (HY8002) improved intestinal integrity and had immunomodulatory effects. Lactobacillus plantarum HY7717 (HY7717) was screened in vitro from among 21 other lactic acid bacteria (LAB) and demonstrated nitric oxide (NO) production. The aims of this study were to investigate the individual and combined ex vivo and in vivo effects of LAB strains HY8002 and HY7717 at immunostimulating mice that have been challenged with an immunosuppressant drug. The combination of HY8002 and HY7717 increased the secretion of cytokines such as interferon (IFN)-γ, interleukin (IL)-12, and tumor necrosis factor (TNF)-α in splenocytes. In a cyclophosphamide (CTX)-induced immunosuppression model, administration of the foregoing LAB combination improved the splenic and hematological indices, activated natural killer (NK) cells, and up-regulated plasma immunoglobulins and cytokines. Moreover, this combination treatment increased Toll-like receptor 2 (TLR2) expression. The ability of the combination treatment to upregulate IFN-γ and TNF-α in the splenocytes was inhibited by anti-TLR2 antibody. Hence, the immune responses stimulated by the combination of HY8002 and HY7717 are associated with TLR2 activation. The preceding findings suggest that the combination of the HY8002 and HY7717 LAB strains could prove to be a beneficial and efficacious immunostimulant probiotic supplement. The combination of the two probiotic strains will be applied on the dairy foods including yogurt and cheese.

• Tuberculosis and Respiratory Diseases
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• 제43권3호
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• pp.420-433
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• 1996

연구 배경 : 기도의 신경성 염증에서 산화질소가 관여하는 것으로 알려져 있으나, 그 역할에 대해서는 논란이 많다. 본 연구는 기도 신경성 염증에 관여하는 산화질소의 역할을 보다 명확히 밝히고자 하였다. 방법 150-350gm의 백서를 이용하여 기도의 신경성 염증에서 신경단백질 수용체 차단제인 FK224와 산화질소 합성효소 억제제인 $N^{\omega}$-nitro-L-arginine (L-NNA) 의 혈장유출에 대한 효과를 먼저 확인하고, 기도 신경성 염증에 관여하는 산화질소가 기도의 신경말단에서만 유리되는 지 또는 신경성 염증에서 유리된 신경 단백질로 인하여 다른 폐장 조직 세포에서도 산화질소가 유리되는 지를 규명하기 위하여 산화질소 합성효소의 종류와 그 분포를 polyclonal anti-NOS antibody에 대한 면역화학효소법으로 확인하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 결과 : 백서의 기도 신경성 염증에서 신경단백질 수용체 차단제인 FK224는 혈장유출을 억제시키며 산화질소 합성효소 억제제인 L-NNA는 혈장유출을 증가시켰다(P<0.05). 기도 신경성 염증유발시 조직내 염증세포의 침윤은 증가되었으며, FK224로 전처치시 조직내의 염증세포의 침윤을 억제시켰다(P<0.05). 염증을 유발하는 것으로 알려진 유도형 산화질소 합성효소(iNOS)의 활성도는 침착된 염증세포에서만 유의하게 증가하였다(P<0.05). 염증을 억제하는 것으로 알려진 산화질소를 생성하는 구성형 산화질소 합성효소(cNOS)인 eNOS의 활성노는 혈관내피세포에서 증가하였으나 의미는 없었고, bNOS의 활성도는 신경성 염증에서 신경세포에서만 증가되었으며, FK224에 의해서도 bNOS의 활성도는 억제되지 않았다. 결론 : 기도의 신경성 염증에서 조직내 염증세포가 증가되며 iNOS에서 생성되는 산화질소가 주로 혈장유출에 관여하는 것으로 사료된다. FK224의 전처치는 염증세포의 조직내 침윤을 억제시키며, iNOS 의 활성도도 감소시켜 기도 혈장유출을 억제시키는 것으로 생각된다. 또한 기도의 신경성 염증에서 NANC신경에서도 산화질소가 유리됨을 알 수 있었으며, 기도 신경성 염증에서 산화질소 합성효소 억제제인 L-NNA로 혈장유출이 증가되는 것은 bNOS에서 유리되는 산화질소의 생성을 L-NNA가 억제시킬 수 있으므로 산화질소 합성효소 억제제가 기도 신경성 염증의 혈장유출을 증가시키는 데에 bNOS가 일부 작용할 것으로 생각되는 바이다.

• 한국식물생명공학회:학술대회논문집
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• 한국식물생명공학회 2004년도 생명공학 실용화를 위한 비젼
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• pp.81-90
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• 2004

Sialic acid containing glycosphingolipids (gangliosides) have been implicated in the regulation of various biological phenomena such as atherosclerosis. Recent report suggeststhat exogenously supplied disialoganglioside (GD3) serves a dual role in vascular smooth muscle cells (VSMC) proliferation and apoptosis. However, the role of the GD3 synthase gene in VSMC responses has not yet been elucidated. To determine whether a ganglioside is able to modulate VSMC growth. the effect of overexpression of the GD3 synthase gene on DNA synthesis was examined. The results show that the overexpression of this gene has a potent inhibitory effect on DNA synthesis and ERK phosphorylation in cultured VSMC in the presence of PDGF. The suppression of the GD3 synthase gene was correlated with the down-regulation of cyclinE/CDK2. the up-regulation of the CDK inhibitor p21 and blocking of the p27 inhibition,whereas up-regulation of p53 as the result of GD3 synthase gene expression was not observed. Consistently, blockade of GD3 function with anti-GD3 antibody reversed VSMC proliferation and cell cycle proteins. The expression of the CD3 synthase gene also led to the inhibition of TNF--induced matrix metalloproteinase-9 (MMP-9) expression in VSMC as determined by zymography and immunoblot. Furthermore, GD3 synthase gene expression strongly decreased MMP-9 promoteractivlty in response to TNF-. This inhibition was characterized by the down-regulation of MMP-9,which was Iranscriptionally regulated at NF-B and activation protein-1 (AP-1) sites in the MMP-9promoter Finally, the overexpression of MMP-9 in GD3 synthase transfectant cells rescued VSMC proliferation. However MMP-2 overexpression was not affected the cell proliferation. These findings suggest that the fl13 synthase gene represents a physiological modulator of VSMC responses that may contribute to plaque instability in atherosclerosis.

• 환경위생공학
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• 제4권1호
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• pp.17-28
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• 1989

Having studied the production of monoclonal antibodies for developing a diagnosis medicine which shall be detected by a high-sensitivity test by using Rhodotorula rubra as a fungi-host which had been extracted through biochemical tests and follow-up examinations on Yeast-like fungi obtained from pulmonary tissues of pulmonary tuberculosis patients who had been in Kong ju National Tuberculosis Hospital from Jun. to Dec. in 1987, I. have gained such results as follows: 1. The fusion rate was influenced by feeder cell layers, cell density and time required to the cell fusion with cells in myelona subculture. 2. The fusion rate did not show any significant difference when the cell was applyed with two molecular weights, i.e., 1500 and 4000, of polyethylene glycol. 3. Fused cells after the addition of HAT selection media were bright and round, whereas unfused myelona cells and spleen cells were shrunk and granulated. 4. The cell fusion rate turned out to be about $57.2\%$(150 wells / 264 wells). 5. $10\%$(15 wells / 150 wells) of the positive reaction was detected in monoclonal antibody screening. 6. The titer which had reacted positively to Rhodotorula rubra fungal-host was 800 times in density after the gradual dilution of the produced monoclonal antibodies with Indirect ELISA method. 7. The Strongest specific reaction came out after the peroxidase labelled anti-human Immunogobulin had been applyed to Rhodotorula rubra for activating its nature after making drift with Carbonate-bicarbonate buffer (pH 9.6) and drying completely.

• 한국정보통신학회:학술대회논문집
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• 한국정보통신학회 2018년도 춘계학술대회
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• pp.584-587
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• 2018

마우스 간염 바이러스, 코로나, 홍역 및 sindbis 바이러스와 같은 많은 바이러스가 쥐의 신경계에서 수초 형성의 파괴를 의미하는 탈수 초 유도의 원인 바이러스로 알려져 있다. 본 연구의 목적은 슈반 세포와 신경 세포의 공동 배양에 의한 수초화와 쥐의 sindbis 바이러스 감염에 의한 탈수초화에 의한 수초화 과정을 연구하는 데 있다. 쥐의 배아의 (Dorsal root ganglion, DRG)에서 슈반 (Schwann) 세포와 신경 세포 (neuronal cell)를 in vitro에서 배양 하였다. 유사 분열 억제인자로 처리한 신경세포와 정제 된 Schwann 세포를 갖는 공동 배양을 하였다. 그 후,이 수초화 된 공동 배양 시스템에 sindbis 바이러스 감염이 수행되었다. 수초 형성의 존재를 의미하는 peripheral myelin protein 22 (PMP 22) 항체를 사용하여 수초 형성 및 탈수초화 과정을 관찰 하였다. 우리는 수초화 된 뉴런의 존재를 의미하는 말초 myelin 단백질 22 (PMP 22)의 항체를 사용하여 수초화 및 탈수초 과정을 확인하였다. 이 연구는 과학 기술부, ICT 및 미래 계획 (NRF-2015R1C1A1A01053484 및 2017R1A2B3005753)이 자금을 지원하는 국립 연구 재단 (NRF)을 통한 기초 연구 프로그램의 지원을 받았다.

• 생명과학회지
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• 제30권8호
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• pp.731-741
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• 2020

코로나바이러스감염증-19(COVID-19)는 SARS-CoV-2에 의해 발병된다. 지금까지 인간에게 감염되는 7 가지 종류의 코로나 바이러스가 보고되었다. 그 중, HCoV-229E, HCoV-OC43, HCoV-NL63, 그리고 HCoV-HKU1 등 4종류의 코로나바이러스는 감기와 같은 단순 호흡기 질환을 유발한다고 보고되었다. 반면, SARS-CoV는 2002년에, MERS-CoV는 2012년에 각각 대유행을 일으킨 바 있다. 가장 최근에는 2019년 12월 중국 우한에서 처음 보고된 SARS-CoV-2가 전세계적인 대유행의 원인이 되고 있다. 이러한 SARS-CoV-2를 진단하고, 치료하고, 예방하기 위해서는 신속 정확한 진단키트, 치료제, 그리고 안전한 백신의 개발의 필수적으로 요구된다. 이러한 강력한 도구들을 개발하기 위해서는 SARS-CoV-2의 표현형, 유전자형, 그리고 생활주기 등의 연구가 선행되어야 한다. SARS-CoV-2의 진단기술은 현재 크게 두가지의 큰 분야인 분자진단과 면역혈청학적 진단으로 구분할 수 있다. 분자진단의 경우 SARS-CoV-2의 유전체를 대상으로 하며, 면역혈청학적 진단은 SARS-CoV-2의 항원 단백질 혹은 SARS-CoV-2에 대한 항체를 대상으로 한다. 본 총설에서는 SARS-CoV-2의 표현형, 유전체 구조, 그리고 유전자 발현에 대해서 정리하고, SARS-CoV-2에 대한 다양한 진단 기술 등에 대한 기초지식을 제공하고자 한다.

• 한국식품영양과학회지
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• 제36권2호
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• pp.155-162
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• 2007

본 연구에서는 녹차(Camellia sinensis)잎 추출물, 구아바(Psidium guajava)잎 추출물 그리고 장미(Rosa hybrida)꽃잎 추출물로 이루어진 식물추출 복합물(PEM381)에 대하여 제I형 알레르기 반응 억제 효능 및 생화학적 기전을 밝히기 위하여 COX 억제 활성, LO 억제 활성, compound 48/80에 의한 랫드 복강 비만세포의 탈과립과 히스타민 유리에 미치는 영향 그리고 수동피부아나필락시스 반응 억제효능을 측정하였다. 그 결과 PEM381은 5-LO $IC_{50}$ 값이 $14.11{\pm}0.51ppm$으로 나타났고, COX-1에 비해 COX-2를 선택적으로 억제하는 것으로 나타났다. 또한 PEM381은 compound 48/80에 의한 비만세포의 탈과립과 히스타민 유리를 농도 의존적으로 억제할 뿐만 아니라 수동피부아나필락시스 반응도 억제하였다. 이상의 결과로 PEM381은 알레르기성 비염, 아토피 피부염 및 기관지천식 같은 제I형 알레르기 질환에 대하여 예방 및 치료에 유용하게 사용될 수 있을 것으로 생각된다.

• Archives of Pharmacal Research
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• 제20권4호
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• pp.297-305
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• 1997

A new serum-free defined medium was developed that supports the growth of normal rat mammary epithelial cells. Mammary organoids from the glands of female F344 rats were cultured in a serum-free medium. Monolayer culture colonies developed within a week and remained viable for months in culture. Upon subculture of one-week-old primary colonies, almost the same morphology of colonies was developed. The scrape loading/dye transfer technique showed that most of colonies that developed in a serum-free medium containing EGF, human transferrin, insulin, and hydrocortisone (basal serum-free medium, BSFM) failed to show cell-cell communication. However, colonies cultured in BSFM supplemented with prolactin, $E_2$, and progesterone (complete hormone serum-free medium, CHSFM) showed cell-cell communication at 14 days of primary culture or of subculture. By flow cytometry with FITCPNA and PE-anti-Thy-1.1 monoclonal antibody, we distinguished four RMEC subpopulations in cultures in both media: Thy-1.1+ cells, PNA+ cells, cells negative to both reagents and cells positive to both reagents. It is likely that combined prolactin, cortisol, and insulin in CHSFM stimulate terminal differentiation of clonogenic cells.

• Journal of Acupuncture Research
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• 제24권5호
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• pp.171-183
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• 2007

Objectives : The purpose of this study was to analyze the effects of Erythrinae Cortex herbal-acupuncture solution(EC-HAS) at the Joksamni($ST_{36}$) of mice with collagen II-induced arthritis(CIA). Methods : The author performed several experimental procedures to observe the effects of the EC-HAS at the arthritis. The severity of arthritis, changes of cytokine level and antibody level, histological changes of the CIA mouse joint were analyzed. Results : 1. The incidence of arthritis and arthritis index were significantly decreased in the cases which were treated with the EC-HA. 2. Cartilage destruction and synovial cell proliferation were reduced, and the expression of the collagen fibers was similar with that of the normal group. 3. The levels of IL-6, $IFN-{\gamma}$, $TNF-{\alpha}$, $IL-1{\beta}$ in serum of the CIA mice which were treated with the EC-HA were significantly decreased compared with those of the normal group. 4. The levels of IgG, IgM and anti-collagen II in serum of CIA mice when they treated with the EC-HA were significantly decreased compared with those of the normal group. 5. The expression ratio of $CD4^+$ to $CD8^+$ cells in the EC-HA treated mice were maintained as much as the normal group of the lymph nodes in the CIA mice. 6. The $CD3e^+CD69^+$ and $CD11b^+Gr-1^+$ cell populations in the knee joint were significantly decreased in the EC-HA treated group. Conclusions : These results suggest that the EC-HA at the ST36 may be responsible roles to control on the synovial cell proliferation and to prevent the cartilage destruction in rheumatoid arthritis. These results will be important supporting evidence for the practical use of the EC-HA at rheumatoid arthritis clinic in the future.