Berberine, an isoquinoline alkaloid found in Coptidis Rhizoma(goldenthread) extract, has multiple pharmacological effects such as anti-inflammatory, antimicrobial and anti-ischemic effects. In the present study, we examined the effects of berberine on neuronal survival and differentiation in a hippocampal precursor cell line and in the memory deficient rat model. Berberine increased in a dose dependent manner the survival of hippocampal precursor cells as well as differentiated cells. In addition, berberine promoted neuronal differentiation of hippocampal precursor cells. In the memory deficient rat model induced by stereotaxic injection of ibotenic acid into entorhinal cortex(Ibo model), hippocampal cells were increased about 2.7 fold in the pyramidal layer of CA1 region and about 2 fold in the dentate gyrus by administration of berberine after 2 weeks of ibotenic acid injection. Furthermore, neuronal cells immunoreactive to calbindin were increased in the hippocampus and entorhinal cortex area by administration of berberine. Taken together, these results suggest that berberine has neuroprotective effect in the Ibo model rat brain by promoting the neuronal survival and differentiation.
배 경 : 동물 모델을 이용하여 일정한 수준의 상기도 협착을 일으킬 수 있다면 이에 대한 임상교육에도 도움이 되며 새로운 진단법이나 치료법의 개발을 보다 쉽게 할 수 있을 것이다. 저자들은 한국산 잡견을 이용하여 Nd-YAG Laser 소작술로 기관 협착을 일정하게 유도하는데 성공하여, 이에 대해 기술하고자 본 연구를 시행하였다. 방 법 : 체중 22kg 정도의 한국산 잡견 6마리를 전신마취 시킨 후, Nd-YAG 레이저를 이용하여 4개의 기관 연골환의 전방부 180도를 $8946{\pm}2484$ Joule로 소작 하였다. 실험 동물은 매 1주마다 4주 동안 기관지내시경으로 기관 협착 정도를 관찰하였고, 병리학적 검사를 같이 시행하였다. 결 과 : 시판 협착은 레이저 소작 2주 후부터 시작되어 3주후까지 빠른 속도로 진행되었으며, 소작 4주 후에 가장 심한 양상을 보였다, 모든 실험 동물은 제 3주가 지나 심한 호흡곤란과 천명음, 식욕부진 및 체중 감소를 보였고, 이중 2마리는 호흡부전으로 4주가 되기 전에 사망하였다. 병리 육안소견상 소작 부위의 기관 연골이 소설되고 섬유조직으로 치환되어 외경도 감소되어 있었고, 현미경 소견에서 연골이 소실되고 섬유화 조직이 협착을 일으켜 내경이 감소된 모습을 확인 할 수 있었다. 결 론 : 이러한 기도 협착 동물 모델은 향후 기도 협착의 이해, 교육, 새로운 진단 및 치료법의 개발에 도움을 줄 것으로 사료된다.
Transgenic rats and mice are useful experimental animal models for medical research including human disease model studies. Somatic cell nuclear transfer (SCNT) technology is successfully applied in most mammalian species including cattle, sheep, pig and mouse. SCNT is also considered to increase the efficacy of transgenic/knockout mouse and rat production. However, in the area of reproductive biotechnology, the rodent model is inadequate because of technical obstacles in manipulating the oocytes including intracytoplasmic sperm injection and SCNT. In particular, success of rat SCNT is very limited so far. In this review, the history of rodent cloning is described.
Historically, research in toxicology has utilized non-human mammalian species, particularly rats and mice, to study in vivo the effects of toxic exposure on physiology and behavior. However, ethical considerations and the overwhelming increase in the number of chemicals to be screened has led to a shift away from in vivo work. The decline in in vivo experimentation has been accompanied by an increase in alternative methods for detecting and predicting detrimental effects: in vitro experimentation and in silico modeling. Yet, these new methodologies can not replace the need for in vivo work on animal physiology and behavior. The development of new, non-mammalian model systems shows great promise in restoring our ability to use behavioral endpoints in toxicological testing. Of these systems, the zebrafish, Danio rerio, is the model organism for which we are accumulating enough knowledge in vivo, in vitro, and in silico to enable us to develop a comprehensive, high-throughput toxicology screening system.
Zoonoses are the diseases that are transmitted to human being from vertebrate animals either from livestock animals or from wildlife. Recently, zoonoses are increasingly common as a result of incremental human-animal contact. Propagative infections in wild animals and livestock are transmitted to human beings who are encountered with them. In general, wild animals can transmit infectious agents to livestock, and then livestock further transmit them to human being is a simple model of on how zoonotic diseases get transmitted to human being. This model emphasizes the importance of early detection of zoonoses by surveillance at its incipient stage. Cooperation between the respective ministries plays an important role in the identification of zoonoses and planning for the formulation of better preventive and control policy and strategy. We will be able to predict the occurrence of zoonotic diseases in human on the basis of disease trends in wildlife and livestock once when we obtain the surveillance data and data generated by respective ministries through sound cooperation and collaboration.
Chimeric animals are referred to as an organism composed of tissues derived from more than one species. In order to examine if a pluripotency of embryonic stem cells can cross the limitation of a species, we tried to establish human-mouse chimeric animals. Human embryonic stem cells were genetically modified to express eGFP using eukaryonic expression vector pcDNA 3.1 (In Vitrogene) for an easy identification. After selection with neomycin, approximately 15 cells were implanted into mouse blastocoele cavity. Ten chimeric blastocysts were transferred to one of the uterine horn of 2.5 days pesudopregnent ICR female. Out of 272 blastocysts transferred to pseudopregnant recipients 20 live newborn were obtained after 20 days. When newborn were obtained, pups were quickly removed immersed into 4% PFA. By histological examination using fluorescent microscope, green fluorescence was observed from the liver, heart, and spleen in newborn mice. Three weeks after born, presence of eGFP sequence within mouse genome (tail and kidney) was reconfirmed by PCR. eGFP sequence was amplified from the progenies of the animal suggesting a genetic transmission of the transgene. These chimeric mice having human cells at the beginning of development, are expected to recognize human cells as “self”, therefore, human cells or tissues will be able to escape the immunological surveillance of the host if grafted into the animal. These animals will serve as a good model system for studying the graft rejection in tissue transplantation and the potential of the cells to work well in many human disease.
Attributable to their major function in pathogen recognition, the use of bovine leukocyte antigens (BoLA) as disease markers in immunological traits in cattle is well established. However, limited report exists on polymorphism of the BoLA gene in zebu cattle breeds by high resolution typing methods. Thus, we used a polymerase chain reaction sequence-based typing (PCR-SBT) method to sequence exon 2 of the BoLA class II DRB3 gene from 100 animals (Boran, n = 13; Sheko, n = 20; Fogera, n = 16; Horro, n = 19), Hanwoo cattle (n = 18) and Bangladesh Red Chittagong zebu (n = 14). Out of the 59 detected alleles, 43 were already deposited under the Immuno Polymorphism Database for major histocompatibility complex (IPD-MHC) while 16 were unique to this study. Assessment of the level of genetic variability at the population and sequence levels with genetic distance in the breeds considered in this study showed that Zebu breeds had a gene diversity score greater than 0.752, nucleotide diversity score greater than 0.152, and mean number of pairwise differences higher than 14, being very comparable to those investigated for other cattle breeds. Regarding neutrality tests analyzed, we investigated that all the breeds except Hanwoo had an excess number of alleles and could be expected from a recent population expansion or genetic hitchhiking. Howbeit, the observed heterozygosity was not significantly (p < 0.05) higher than the expected heterozygosity. The Hardy Weinberg equilibrium (HWE) analysis revealed non-significant excess of heterozygote animals, indicative of plausible over-dominant selection. The pairwise FST values suggested a low genetic variation among all the breeds (FST = 0.056; p < 0.05), besides the rooting from the evolutionary or domestication history of the cattle. No detached clade was observed in the evolutionary divergence study of the BoLA-DRB3 gene, inferred from the phylogenetic tree based on the maximum likelihood model. The investigation herein indicated the clear differences in BoLA-DRB3 gene variability between African and Asian cattle breeds.
Atopic dermatitis (AD) is a common skin disease characterized by chronic and relapsing inflammatory dermatitis with immunological disturbances. Spleen deficiency (脾虛) is one of the major causes of AD, so development of animal model is required for AD research that reflects the pattern identification. The groups that we have used in this study included Senna folium extracts (SFE), 2,4-dinitrochlorobenzene (DNCB), and normal mice. Therefore, the present study was developed to atopic dermatitis mouse model with spleen deficiency in 2,4-dinitrochlorobenzene (DNCB) and senna leaves extracts induced AD in NC/Nga mice. The results demonstrated that senna leaves extract treatment significantly increased the dermatitis clinical score and epidermal thickness in AD-like skin lesions. We also proved beyond doubt that there was occurrence of erythema and skin moisture indices in the senna leaves extract groups. Further, we also found that the level of serum immunoglobulin E (IgE) in the senna leaves extract-treated group was increased. The amount of IL-4, IL-13, $TNF-{\alpha}$ and $TGF-{\beta}$ mRNA determined by real-time PCR was increased remarkably when senna leaves extract groups were treated on dorsal skin. Senna leaves extract groups significantly promoted the number of CD11B+/Gr-1 cell in skin, as well as the number of CD4+/CD8+ cell in dorsal skin compared with control. The review summarizes recent process in our understanding of the immunopathophysiology of spleen deficiency AD and the implications for spleen deficiency mouse models of AD on drug discovery from medical plants.
Hantaan virus(HTNV) causes hemorrhagic fever with renal syndrome(HFRS) with a case fatality rate ranging from <1 to 15 % in human. HantavaxⓇ is a vaccine against the Hantavirus, which has been conditionally approved by the Ministry of Food and Drug Safety(MFDS). However, only 50 % of volunteers had neutralizing antibodies 1 year following the boost. Effective antiviral treatments against HTNV infection are limited. Hantaviruses generally cause asymptomatic infection in adult mice. On the other hand, infection of suckling and newborn mice with hantaviruses causes lethal neurological diesease or persistant infection, which is different from the disease in humans. The development of vaccines and antiviral strategies for HTNV has been partly hampered by the lack of an efficient lethal mouse model to evaluate the efficacy of the candidate vaccines or antivirals. In this report, we established a lethal mouse model for HTNV, which may facilitate in vivo studies on the evaluation of candidate drugs against HTNV. The median lethal dose value of HTNV was calculated by probit analysis of deaths occurring within two weeks. Five groups of ten ICR mice were injected intracranially with serial 2-fold dilutions (from 50 to 3.125 PFU/head) of HTNV. Mice injected with HTNV began to die at 8 days post-infection. The lethal dose required to kill 50 % of the mice (LD50) was calculated to be 2.365 PFU/head.
Background: Colorectal cancer is a leading cause of cancer-related death, and inflammatory bowel disease is a risk factor for this malignancy. We previously reported colon cancer chemoprevention potential using American ginseng (AG) in a xenograft mice model. However, the nude mouse model is not a gut-specific colon carcinogenesis animal model. Methods: In this study, an experimental colitis and colitis-associated colorectal carcinogenesis mouse model, chemically induced by azoxymethane/dextran sodium sulfate (DSS) was established and the effects of oral AG were evaluated. The contents of representative ginseng saponins in the extract were determined. Results: AG significantly reduced experimental colitis measured by the disease activity index scores. This suppression of the experimental colitis was not only evident during DSS treatment, but also very obvious after the cessation of DSS, suggesting that the ginseng significantly promoted recovery from the colitis. Consistent with the anti-inflammation data, we showed that ginseng very significantly attenuated azoxymethane/DSS-induced colon carcinogenesis by reducing the colon tumor number and tumor load. The ginseng also effectively suppressed DSS-induced proinflammatory cytokines activation using an enzyme-linked immunosorbent assay array, in which 12 proinflammatory cytokine levels were assessed, and this effect was supported subsequently by real-time polymerase chain reaction data. Conclusion: AG, as a candidate of botanical-based colon cancer chemoprevention, should be further investigated for its potential clinical utility.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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