본 연구에서는 미백 기능성 화장품 및 원료의 효능을 평가하는 동물대체시험법을 개발하기 위하여 세포수준과 색소화피부모델(KeraSkin-MTM)에서 기존에 잘 알려진 4종의 미백기능성원료(arbutin, ascorbic acid, kojic acid, niacinamide)의 효능을 평가하였다. 특히 기존 시험법의 보완을 위해 인체피부유래 케라틴세포와 멜라닌세포를 혼합하고 공배양하여 색소화피부모델을 제작하였다. 그 결과 색소화피부모델을 이용하여 미백효능을 평가함으로써 세포수준에서는 확인이 어려웠던 각 피부세포층에 따른 멜라닌 과립과 멜라닌캡(melanin cap)의 분포 등의 지표들을 추가로 확인할 수 있었으며 이미지분석을 통한 정량화로 음성대조군 대비 통계적 유의성을 확인할 수 있었다. 이러한 결과는 KeraSkin-MTM을 이용한 미백효능평가법이 기존에 사용하던 총멜라닌함량와 타이로시나아제 저해 평가를 보완할 수 있는 새로운 평가법으로 사용할 수 있음을 시사한다.
Yippee 패밀리를 구성하는 yippee-유사 단백질들은 한 개의 zinc-finger 도메인을 지닌 Drosophila yippee 단백질의 homolog로서 모든 진핵생물에 존재하는 것으로 알려졌으나 그 기능은 밝혀진 바가 없다. 인체 T 림프구의 활성화과정 중 발현수준이 변화하는 유전자들을 선별하기 위해 인체 말초혈액에서 분리한 resting T 세포, immobilized anti-CD3에 의해 26시간 혹은 30시간 동안 활성화시킨 T 세포로부터 각각 정제한 total RNA를 이용하여 ODD-PCR을 수행한 결과, resting T 세포에서는 발현되지만 immobilized anti-CD3 활성화에 의해 세포주기를 개시하여 $G_1/S$ boundary에 도달한 T 세포들로부터는 전혀 발현되지 않는 흥미로운 유전자로서 Drosophila yippee 단백질 유전자의 인체 homolog인 YPEL5 유전자를 분리하였다. 노던 블로팅법으로 T 세포 활성화에 뒤이은 YPEL5 mRNA의 발현 변화를 조사한 결과, ${\sim}2.2kb$ 크기의 YPEL5 mRNA는 resting T 세포를 비롯하여 immobilize anti-CD3에 의한 활성화 후 1.5시간까지는 확인되었으나 활성화 후 5시간 이후부터 48시간에 이르는 시간에는 전혀 확인되지 않았다. YPEL5 단백질을 GFP-fusion 단백질로서 인체 암세포주인 HeLa 세포에 transfection하여 발현시킨 결과, GFP-YPEL5 단백질이 모두 핵에 위치하는 것으로 나타나 YPEL5 단백질이 핵단백질임을 확인하였다. 또한 YPEL5의 기능을 규명하기 위해 YPEL5 발현벡터를 HeLa 세포에 transfection 하고 발현시켜 HeLa 세포의 증식에 미치는 YPEL5의 영향을 MTT assay로 분석한 결과, vector plasmid를 transfection시킨 대조구의 47% 수준으로 세포증식이 감소하는 것으로 나타났다. 이러한 결과들은 YPEL5 mRNA의 발현이 T 세포 수용체를 통한 T 세포 활성화의 초기단계에 현저히 감소됨을 보여주며, 또한 YPEL5가 핵단백질로서 세포증식에 대해 저해효과를 미칠 수 있음을 시사한다.
목 적: 비소세포성 폐암 환자의 호흡 조절 방사선 치료 시 호흡에 의한 종양의 움직임을 최소화하는 것이 필수적이다. 이에 본 연구에서는 자유호흡 주기와 제한호흡 주기를 각각 적용한 치료 계획을 비교, 분석하여 제한 호흡 주기의 유용성을 평가하고자 한다. 대상 및 방법: 2011년 4월부터 12월까지 비소세포성 폐암 환자 9명(tumor n=10)을 대상으로 환자에게 평소의 호흡주기를 바탕으로 측정한 '자유호흡 주기'와 의도적으로 줄인 '제한호흡 주기'를 '신호모니터-호흡(guided-breathing)'법을 사용하여 각각 훈련을 실시한 후 RPM과 4차원 전산화 단층촬영 모의치료기를 이용해 치료계획용 4D CT를 실시하여 총 10개의 호흡 위상(respiration phase)별 CT 영상을 획득하였다. 각 호흡 주기의 CT 영상에 관측자 두 명이 각각 설정한 육안적 종양체적(Gross Tumor Volume, GTV)과 내부표적체적(Internal Target Volume, ITV)부피를 측정, 비교하였고 들숨(end-inspiration, EI)인 0%와 날숨(end-exhalation, EE)인 50% 위상에서의 center of mass (COM)를 측정하여 종양 움직임의 진폭을 측정했다. 또한 관측자 두명이 각각 두 호흡 주기를 적용한 치료계획을 수립하였고 정상 폐 평균선량(mean dose to normal lung, MDTNL)과 정상 폐 용적의 정상조직합병증확률(normal tissue complication probability, NTCP)을 비교, 분석하였으며 측정된 자료의 정량적 평가를 위해 통계 분석을 실시했다. 결 과: 관측자 두 명의 '제한호흡 주기'를 적용한 치료 계획을 분석한 결과 '자유호흡 주기'에 비해 종양의 3D 방향 움직임이 관측자 1의 경우 38.75%, 관측자 2의 경우 41.10%의 감소율을 보였고 GTV와 ITV의 부피를 측정, 비교한 결과 GTV의 부피는 관측자 1의 경우 $14.96{\pm}9.44%$, 관측자 2의 경우 $19.86{\pm}10.62%$, ITV의 부피는 관측자 1의 경우 $8.91{\pm}5.91%$, 관측자 2의 경우 $15.52{\pm}9.01%$의 감소율을 보였으며 MDTNL과 NTCP를 분석, 비교한 결과 MDTNL은 관측자 1의 경우 $3.98{\pm}5.62%$, 관측자 2의 경우 $7.62{\pm}10.29%$의 감소율을, NTCP의 경우 관측자 1의 결과 $21.70{\pm}28.27%$, 관측자 2의 결과 $37.83{\pm}49.93%$의 감소율을 나타냈다. 또한 두 관측자의 결과 값의 상관관계를 분석한 결과 '자유호흡 주기'에서는 관측자간의 유의한 차이를 보이는 데 비해 '제한호흡 주기'에서는 관측자간의 차이가 없는 감소율을 보였다. 결 론: '자유호흡 주기'에 비해 '제한호흡 주기'를 적용한 치료 계획에서 평가인자들의 상대적인 감소를 나타내어 비소세포성 폐암 환자의 호흡 조절 방사선 치료 시 '제한호흡 주기'의 유용성 및 타당성을 확인할 수 있었다.
배경 : 본 연구에서는 세균성 리포다당질(lipopolysac-charide, LPS)로 인한 호중구성 염증이 EGFR 시스템을 통해서 배상 세포의 이형성 및 점액의 과다 분비를 유발할 것이라는 가설 하에, LPS와 MMPs 억제제(matrix metalloproteinase inhibitor, MMPI)를 투여한 후 EGFR 및 MMP-9의 발현을 연구하고자 하였다. 방법 : Pathogen-free Sprague-Dawley 를, 다양한 농도의 LPS를 투여한 군과 투여하지 않은 대조군으로 나누어 기도의 조직학적인 변화를 날짜 별로 관찰하였고, MMPI(CMT-3)를 LPS 투여 3일 전부터 매일 구강을 통해 섭식시켰다. 호중구의 침윤은 다섯 개의 고배율 시야에서 관찰된 호중구의 수로 정량화하여 비교하였고, mucus glycoconjugate에 대한 AB/PAS 염색 및 MUC5AC, EGFR, MMP-9에 대한 면역조직화학 염색 (immunohistochemical stain)을 시행하였다 결과 : LPS를 투여한 경우 기도 상피의 AB/PAS 및 MUC5AC의 염색 정도는 시간 및 용량 의존적으로 증가하였고, MMPI를 치료할 경우에 LPS로 인한 배상세포의 과형성이 유의하게 감소하였다. LPS를 주입할 경우 호중구의 침윤이 증가하였고 기도 상피에서 EGFR의 발현을 증가시켰다. MMPI로 치료할 경우 LPS로 인한 호중구의 침윤 및 EGFR의 발현 그리고 배상세포의 과형성이 현저하게 감소되었다. 결론 : Matrix metalloproteinase는 호중구성 염증 및 EGFR에 의해 발생하는 LPS에 의한 배상 세포의 과형성 및 점액 과다분비의 기전에 있어서 밀접하게 관련되고, 따라서 점액 과다분비를 특징으로 하는 세균 감염으로 인한 기도 질환의 치료에 있어서 MMPI가 잠재적인 임상적 효과가 있을 것으로 사료된다.
Objectives : This study aimed at evaluation of the effects of Gastrodiae Rhizoma on brain edema and aquaporin water channel expressions in the brain. Methods : Brain edema following intracerebral hemorrhage (ICH) was induced by the stereotaxic intrastriatal injection of bacterial collagenase type VII in Sprague-Dawley rats. Then ethanol extract of Gastrodiae rhizoma was treated once a day for 3 days. Brain edema % and water contents, and cell size of neurons in the cerebral cortex were examined. Immuno-histochemistry was processed for AQP4, AQP1, and AQP9 expressions in the brain sections and area % of immuno-labeling was analyzed with image analysis. Results : 1. Ethanol extract of Gastrodiae Rhizoma reduced brain edema of ICH induced rats significantly. 2. Ethanol extract of Gastrodiae Rhizoma reduced excessive brain tissue water contents of ICH induced rats significantly. 3. Ethanol extract of Gastrodiae Rhizoma reduced cellular edema of neurons in cerebral cortex of ICH induced rats significantly. 4. Ethanol extract of Gastrodiae Rhizoma reduced AQP4 immuno-positive area % in cerebral cortex and external capsule of ICH induced rat brain significantly. 5. Ethanol extract of Gastrodiae Rhizoma reduced AQP9 immuno-positive area % in glia limitans externa of ICH induced rat brain significantly. Conclusions : These results suggest that Gastrodiae Rhizoma reveals protective effects against brain edema and cytotoxic edema of neurons by means of down-regulation of AQP4 expression in the brain.
The effects of (-)-epigallocatechin gallate (EGCG) on pacemaker activities of cultured interstitial cells of Cajal (ICC) from murine small intestine were investigated using whole-cell patch-clamp technique at $30^{\circ}C$ and $Ca^{2+}$ image analysis. ICC generated spontaneous pacemaker currents at a holding potential of -70 mV. The treatment of ICC with EGCG resulted in a dose-dependent decrease in the frequency and amplitude of pacemaker currents. SQ-22536, an adenylate cyclase inhibitor, and ODQ, a guanylate cyclase inhibitor, did not inhibit the effects of EGCG. EGCG-induced effects on pacemaker currents were not inhibited by glibenclamide, an ATP-sensitive $K^+$ channel blocker and TEA, a $Ca^{2+}$-activated $K^+$ channel blocker. Also, we found that EGCG inhibited the spontaneous $[Ca^{2+}]_i$ oscillations in cultured ICC. In conclusion, EGCG inhibited the pacemaker activity of ICC and reduced $[Ca^{2+}]_i$ oscillations by cAMP-, cGMP-, ATP-sensitive $K^+$ channel-independent manner.
Purpose: The purpose of this study was to preliminarily evaluate the influence of diabetes mellitus (DM) on periodontal tissue without establishment of periodontitis. Methods: Seven-week-old db/db mice were used for the diabetic experimental group and systematically healthy mice of the same age were used as controls. After 1 week of acclimatization, the animals were sacrificed for hard and soft tissue evaluation. The pattern of bone destruction was evaluated by stereomicroscope evaluation with alizarin red staining and radiographic evaluation by microscopic computerized tomography images. Histological evaluation was performed with hematoxylin and eosin stain for evaluation of soft tissue changes. Results: In both stereomicroscope evaluation and radiograph image analysis, aggressive form of bone destruction was observed in diabetic animals when compared to the systematically healthy controls. In histological evaluation, apical migration of junctional epithelium with slight inflammatory cell infiltration was observed with disarrangement of connective tissue fibers. Conclusions: Within the limits of this study, diabetic animals presented distortion in periodontal attachment and an aggressive bone loss pattern when compared to the healthy controls, suggesting that DM has an independent effect on periodontal tissue destruction irrespective of the presence or absence of periodontal disease.
In this study, we propose the application of doping process technology for atmospheric pressure plasma. The plasma treatment means the wafer is warmed via resistance heating from current paths. These paths are induced by the surface charge density in the presence of illuminating Argon atmospheric plasmas. Furthermore, it is investigated on the high-concentration doping to a selective partial region in P type solar cell wafer. It is identified that diffusion of impurities is related to the wafer temperature. For the fixed plasma treatment time, plasma currents were set with 40, 70, 120 mA. For the processing time, IR(Infra-Red) images are analyzed via a camera dependent on the temperature of the P type wafer. Phosphorus concentrations are also analyzed through SIMS profiles from doped wafer. According to the analysis for doping process, as applied plasma currents increase, so the doping depth becomes deeper. As the junction depth is deeper, so the surface resistance is to be lowered. In addition, the surface charge density has a tendency inversely proportional to the initial phosphorus concentration. Overall, when the plasma current increases, then it becomes higher temperatures in wafer. It is shown that the diffusion of the impurity is critically dependent on the temperature of wafers.
Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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제31권3호
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pp.228-238
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2005
Purpose: Several cryoprotectants are in use to help the survival of cells during cryopreservation of bone in maxillofacial region. Among them, $Me_2SO$(dimethyl sulfoxide), EG(ethylene glycol), sucrose were used for experimentally created defects with accompanying cryopreserved bone graft in the rabbit model. The aim of this study is to analyze the effect of above mentioned agents on bone formation using histologic and histomorphometrical methods, thus to provide experimental support for clinical application of these agents. Materials and methods: Nine rabbits were used as experimental animals. Surgical defects were created on the distal femoral heads and mesial tibial heads of each animal using trephine drill(5mm diameter and 5mm length). The harvested bones were cryopreserved in $-80^{\circ}C$ refrigerator for one week. The defects were filled with cryopreserved bone with cryoprotectants as experimental groups and cryopreserved bone without cryoprotectant as control. Then, the animals were sacrificed at 1, 2, and 3 weeks after surgery. With Goldner's modified Masson trichrome staining and semiautomatic image analysis system, we observed the change of the cells and bone formation. Results: After bone graft, bone formation and active remodeling process were examined in all experimental groups and the control. But the intensity of such activities of the control were somewhat weaker than that of the experiments. Especially $Me_2SO$+sucrose group was the best in bone formation and bone remodeling. $Me_2SO$ group was more than that of EG group in bone fomation. Sucrose seems to be helpful in survival of the bone cell. Histologic findings showed superior bony quantity and quality in experimental groups than that in control. Conclusions: The data from this study provides the basis for future studies for evaluating the effect of cryoprotectants in the cryopreservation of bone and clinical study for predictable use of these agents.
Kim, Pil Soo;Cha, Chang-Jun;Cho, Jang-Cheon;Chun, Jongsik;Im, Wan-Taek;Jahng, Kwang Yeop;Jeon, Che Ok;Joh, Kiseong;Kim, Seung Bum;Seong, Chi Nam;Yoon, Jung-Hoon;Bae, Jin-Woo
Journal of Species Research
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제5권1호
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pp.179-187
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2016
As a subset investigation to discover indigenous prokaryotic species in Korea, a total of 21 bacterial strains assigned to the class Betaproteobacteria were isolated from a wide range of environmental samples which collected from fresh water, roots of plants, mineral water and soil from ginseng farm. Phylogenetic analysis based on 16S rRNA gene sequences indicated that 21 isolated strains were most closely related to the class Betaproteobacteria, with high 16S rRNA gene sequence similarity (>99.1%) and constructed a robust phylogenetic clade with the closest species in the class Betaproteobacteria. These isolated species have no previous report or publication in Korea; therefore 17 species in 14 genera of 6 families in the order Burkholderiales, 1 species in the order Methylophilales, 2 species in 2 genera of 1 family in the order Neisseriales are reported for betaproteobacterial species found in Korea. Gram reaction, colony and cell morphology, basic biochemical characteristics, isolation source, and strain IDs are also described in the species description section and as an image.
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