Anaerobic chytridiomycete fungi are now well recognized as one of the major components of rumen microflora. Since the discovery of anaerobic fungi, the knowledge upon their morphology and physiology has been accumulated. It is certain that they gave roles in ruminal fiber digestion, although their quantitative contribution to rumen digestion is still unclear. Their role in fiber digestion is complicated by the dietary factors and the interaction with other microorganisms. We aim at reviewing such information in this article. Considerable attention gas been paid to the polysaccharidase of these fungi. Analysis on the fungal genes encoding these enzymes has been performed in several laboratories. This article also covers the genetical analysis of fungal polysaccharidases.
Cheng, Yan Fen;Jin, Wei;Mao, Sheng Yong;Zhu, Wei-Yun
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제26권10호
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pp.1416-1423
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2013
The metabolomic profile of the anaerobic fungus Piromyces sp. F1, isolated from the rumen of goats, and how this is affected by the presence of naturally associated methanogens, was analyzed by nuclear magnetic resonance spectroscopy. The major metabolites in the fungal monoculture were formate, lactate, ethanol, acetate, succinate, sugars/amino acids and ${\alpha}$-ketoglutarate, whereas the co-cultures of anaerobic fungi and associated methanogens produced citrate. This is the first report of citrate as a major metabolite of anaerobic fungi. Univariate analysis showed that the mean values of formate, lactate, ethanol, citrate, succinate and acetate in co-cultures were significantly higher than those in the fungal monoculture, while the mean values of glucose and ${\alpha}$-ketoglutarate were significantly reduced in co-cultures. Unsupervised principal components analysis revealed separation of metabolite profiles of the fungal mono-culture and co-cultures. In conclusion, the novel finding of citrate as one of the major metabolites of anaerobic fungi associated with methanogens may suggest a new yet to be identified pathway exists in co-culture. Anaerobic fungal metabolism was shifted by associated methanogens, indicating that anaerobic fungi are important providers of substrates for methanogens in the rumen and thus play a key role in ruminal methanogenesis.
The study was to see the effect of administration of ruminal fungi on feed intake, growth rate, rumen fermentation and nutrient digestion of calves (Tharparkar$\times$Holstein-Friesian, average age: 10 months, average body weight: 130 kg). The 6 calves in first group were fed a mixture consisted of 50% wheat straw and 50% concentrate (Maize 62%, Groundnut cake 35%, Mineral mix. 2% and Common salt 1%) along with 1 kg green oats $animal^{-1}$$day^{-1}$ while second group calves were fed the above-mentioned diet in addition to a dose of 160 ml ($10^{6}$ CFU/ml) fungal culture $calf^{-1}$$week^{-1}$. The average dry matter intake per day was slightly lowered in fungal fed calves yet feed conversion ratio was higher. The average daily weight gain was significantly higher (15.37%) in fungal administered group as compared to control. The nutrient digestibility was increased for crude fibre, NDF and ADF with fungal administration. Digestible energy value of straw-based diet in terms of percent TDN also increased. The pH and $NH_{3}$-N were lower whereas TVFA, total-N, TCA-N and number of zoospores were higher in rumen liquor in fungal administered group.
A series of experiments was carried out to determine the possibility for the non-ionic surfactant (NIS) as a feed additive for ruminant animals. The effect of the NIS on (1) the enzyme distribution in the rumen fluids of Hereford bulls, (2) the growth of pure culture of rumen bacteria and (3) rumen anaerobic fungi, (4) the ruminal fermentation characteristics of Korean native cattle (Hanwoo), and (5) the performances of Holstein dairy cows were investigated. When NIS was added to rumen fluid at the level of 0.05 and 0.1% (v/v), the total and specific activities of cell-free enzymes were significantly (p<0.01) increased, but those of cell-bound enzymes were slightly decreased, but not statistically significant. The growth rates of ruminal noncellulolytic species (Ruminobacter amylophilus, Megasphaera elsdenii, Prevotella ruminicola and Selenomonas ruminantium) were significantly (p<0.01) increased by the addition of NIS at both concentrations tested. However, the growth rate of ruminal cellulolytic bacteria (Fibrobacter succinogenes, Ruminococcus albus, Ruminococcus flavefaciens and Butyrivibrio fibrisolvens) were slightly increased or not affected by the NIS. In general, NIS appears to effect Gram-negative bacteria more than Gram-positive bacteria; and non-cellulolytic bacteria more than cellulolytic bacteria. The growth rates of ruminal monocentric fungi (Neocallimastix patriciarum and Piromyces communis) and polycentric fungi (Orpinomyces joyonii and Anaeromyces mucronatus) were also significantly (p<0.01) increased by the addition of NIS at all concentrations tested. When NIS was administrated to the rumen of Hanwoo, Total VFA and ammonia-N concentrations, the microbial cell growth rate, CMCase and xylanase activities in the rumen increased with statistical difference (p<0.01), but NIS administration did not affect at the time of 0 and 9 h post-feeding. Addition of NIS to TMR resulted in increased TMR intake and increased milk production by Holstein cows and decreased body condition scores. The NEFA and corticoid concentrations in the blood were lowered by the addition of NIS. These results indicated that the addition of NIS may greatly stimulate the release of some kinds of enzymes from microbial cells, and stimulate the growth rates of a range of anaerobic ruminal microorganisms, and also stimulate the rumen fermentation characteristics and animal performances. Our data indicates potential uses of the NIS as a feed additive for ruminant animals.
Responses of the rumen fungus, Neocallimastix frontalis RE1, to long chain fatty acid (LCFA) were evaluated by measuring gas production, filter paper (FP) cellulose digestion and polysaccharidase enzyme activities. LCFA (stearic acid, $C_{18:0}$; oleic acid, $C_{18:1}$; linoleic acid, $C_{18:2}$ and linolenic acid, $C_{18:3}$) were emulsitied by ultrasonication under anaerobic condition, and added to the medium. When N frontalis RE1 was grown in culture with stearic, oleic and linoleic acid, the cumulative gas production, gas pool size, FP cellulose digestion and enzymes activities significantly (p<0.05) increased at some incubation times(especially, exponential phases of fungal growth, 48~120 h of incubation) relative to that for control cultures. However, the addition of linolenic acid strongly inhibited all of the investigated parameters up to 120 h incubation, but not after 168 and 216 h of incubation. These results indicated that stearic, oleic and linoleic acids tended to have great stimulatory effects on fungal cellulolysis, whereas linolenic acid caused a significant (p<0.05) inhibitory effects on the cellulolysis by the rumen fungus. These results are the first report of the effect of LCFAs on the ruminal fungi. Further research is needed to identify the mode of action of LCFAs on fungal strains and to verify whether or not ruminal fungi have ability to hydrate unsaturated LCFAs to saturated FAs. There was high correlation between cumulative in vitro gas production and fungal growth (94.78%), FP cellulose degradation (96.34%), CMCase activity(90.86%) or xylanase activity (87.67%). Thus measuring of cumulative gas production could be a useful tool for evaluating fungal growth and/or enzyme production by ruminal fungi.
Lee, S.S.;Shin, K.J.;Kim, W.Y.;Ha, J.K.;Han, In K.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제12권6호
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pp.988-1001
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1999
The rumen ecosystem is increasingly being recognized as a promising source of superior polysaccharide-degrading enzymes. They contain a wide array of novel enzymes at the levels of specific activities of 1,184, 1,069, 119, 390, 327 and $946{\mu}mol$ Reducing sugar release/min/mg protein for endoglucanase, xylanase, polygalactouronase, amylase, glucanase and arabinase, respectively. These enzymes are mainly located in the surface of rumen microbes. However, glycoside-degrading enzymes (e.g. glucosidase, fucosidase, xylosidase and arabinofuranosidase, etc.) are mainly located in the rumen fluid, when detected enzyme activities according to the ruminal compartments (e.g. enzymes in whole rumen contents, feed-associated enzymes, microbial cell-associated enzymes, and enzymes in the rumen fluid). Ruminal fungi are the primary contributors to high production of novel enzymes; the bacteria and protozoa also have important functions, but less central roles. The enzyme activities of bacteria, protozoa and fungi were detected 32.26, 19.21 and 47.60 mol glucose release/min/mL mediem for cellulose; 42.56, 14.96 and 64.93 mmol xylose release/min/mL medium after 48h incubation, respectively. The polysachharide-degrading enzyme activity of ruminal anaerobic fungi (e.g. Neocallimastix patriciarum and Piromyces communis, etc.) was much higher approximately 3~6 times than that of aerobic fungi (e.g. Tricoderma reesei, T. viridae and Aspergillus oryzae, etc.) used widely in industrial process. Therefore, the rumen ecosystem could be a growing source of novel enzymes having a tremendous potential for industrial applications.
Anaerobic rumen microorganisms mainly bacteria, protozoa and fungi degrade ligno-cellulosic feeds consumed by the ruminants. The ruminants in developing countries are predominantly maintained on low grade roughage and grazing on degraded range land resulting in their poor nutrient utilization and productivity. Hence, manipulation of rumen fermentation was tried during last two decades to optimize ruminal fermentation for improving nutrient utilization and productivity of the animals. Modification of rumen microbial composition and their activity was attempted by using chemical additives those selectively effect rumen microbes, introduction of naturally occurring or genetically modified foreign microbes into the rumen and genetically manipulation of existing microbes in the rumen ecosystem. Accordingly, rumen protozoa were eliminated by defaunation for reducing ruminal methane production and increasing protein outflow in the intestine, resulting in improve growth and feed conversion efficiency of the animals. Further, Interspecies trans-inoculation of rumen microbes was also successfully used for annulment of dietary toxic factor. Additionally, probiotics of bacterial and yeast origin have been used in animal feeding to stabilize rumen fermentation, reduced incidence of diarrhoea and thus improving growth and feed conversion efficiency of young stalk. It is envisaged that genetic manipulation of rumen microorganisms has enormous research potential in developing countries. In view of feed resource availability more emphasis has to be given for manipulating rumen fermentation to increase cellulolytic activity for efficient utilization of low grade roughage.
본 연구는 Aspergillus oryzae(AO) 혹은 Saccharomyces cerevisiae(SC)를 첨가하여 제조한 맥주박 위주 발효사료의 급여가 한우의 반추위내 미생물에 미치는 영향을 조사하기 위해 실시하였다. 공시동물은 반추위 cannula가 장착된 한우 암소 2두를 이용하였다. 시험은 시판 배합사료 $715\%$ 및 corn silage $28.5\%$ 급여구(대조구), 시판 배합사료 $45.0\%$, AO 첨가 발효사료 $26.5\%$ 및 com silage $28.5\%$ 급여구(TAO)와 시판 배합사료 $45.0\%$, SC 첨가 발효사료 $26.5\%$ 및 corn silage $28.5\%$ 급여구(TSC)의 3처리구로 구분하여 수행하였다. Total viable bacteria(p<0.05), 혐기성 곰팡이 및 protozoa(p<0.05)의 수는 대조구에 비해 TAO 및 TSC에서 높았다. 단백질 분해 박테리아(p<0.05), 섬유소 분해 박테리아 및 xylan 이용 박테리아 수는 대조구에 비해 TAO 및 TSC구에서 높은 경향이었다 Protozoa의 건물회수율은 대조구에 비해 TAO 및 TSC구에서 높았다(p<0.05). 총 미생물 및 protozoa의 조단백질 함량은 대조구 및 TAO구에 비해 TSC구에서 높았다(p<0.05). 박테리아의 조단백질 함량은 대조구에 비해 TAO 및 TSC구에서 높았다(p<0.05). 총 미생물의 조지방 함량은 대조구 및 TSC구에 비해 TAO구에서 높았으며 (p<0.05), protozoa 및 박테리아의 조지방 함량은 대조구 및 TAO구에 비해 TSC구에서 높았다(p<0.05). 총 미생물의 필수아미노산 비율은 TAO 및 TSC구에 비해 대조구에서 높았다. 박테리아의 methionin 및 alanine 비율은 대조구에 비해 TAO 및 TSC구에서 높았다(p<0.05). 이상의 결과에서 AO 혹은 SC를 첨가하여 제조한 발효사료의 급여는 반추위내 미생물 수 및 균체 조성 변화에 영향을 미치는 것으로 판단된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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