Kim, Min-Hee;Ko, Hee-Sun;Yook, Young-Min;Kim, Hyun-Soo
KSBB Journal
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v.23
no.3
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pp.219-225
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2008
For the production of an antifungal compound, one strain (I-8) was selected from approximately 400 strains isolated from various soil samples. The optimum carbon source, nitrogen source and pH culture conditions for the production of the antifungal compound were investigated. ISP No. 2 medium (yeast extract 0.4%, malt extract 1% and dextrose 0.4%, at pH 8) was determined to be the optimum medium. Strain I-8 showed broad antifungal activity against the plant pathogenic fungi tested, including Sclerotinia sclerotiorum KACC 41065, as well as cellulase and chitinase activities in an agar plate assay. The extraction of antifungal compounds was performed using ethyl ether and ethyl acetate. In a culture broth of strain I-8, the ethyl acetate extract exhibited effective growth inhibition against 14 of the 20 phytopathogenic fungi tested. By mixing the ethyl acetate extract from I-8 with the ethyl ether extract from the fungus 13-16, which shows specific antifungal activity against Colletotrichum orbiculare KACC 40808, the antifungal activity of I-8 against phytopathogenic fungi was confirmed to be slightly increased. Strain I-8 showed strong growth inhibition against 16 phytopathogenic strains in agar plate tests.
Cepacidine A was previously isolated as a novel antifungal antibiotic from the culture broth of Pseudomonas cepacia AF2001. It exhibits a potent in vitro antifungal activity against various plant pathogenic fungi, such as Plasmopora veticola on grapes, Septoria nodorum and Fusarium culmorum on wheat, as well as Colletotrichum lagenarium on cucumbers. Accordingly, this study was conducted to evaluate the potential crop protection activity of strain P. cepacia AF2001. The strain was tested in semi-greenhouse biocontrol assays, and showed an excellent biological activity against Pythium ultimum in cotton and cucumbers; however, only a minor activity against Rhizoctonia aolani in cotton was observed. Furthermore, the nematodes Haemonchus contortus and Trichostrongylus only exhibited a moderated activity in the in vitro larval development assay with no activity in the in vivo animal model.
A novel antifungal protein produced by the fungal strain Penicillium citrinum W1, which was isolated from a Southwest Indian Ocean sediment sample, was purified and characterized. The culture supernatant of P. citrinum W1 inhibited the mycelial growth of some plant pathogenic fungi. After saturation of P. citrinum W1 culture supernatants with ammonium sulfate and ion-exchange chromatography, an antifungal protein (PcPAF) was purified. The N-terminal amino acid sequence analysis showed that PcPAF might be an unknown antifungal protein. PcPAF displayed antifungal activity against Trichoderma viride, Fusarium oxysporum, Paecilomyces variotii, and Alternaria longipes at minimum inhibitory concentrations of 1.52, 6.08, 3.04, and $6.08{\mu}g/disc$, respectively. PcPAF possessed high thermostability and had a certain extent of protease and metal ion resistance. The results suggested that PcPAF may represent a novel antifungal protein with potential application in controlling plant pathogenic fungal infection.
During 2002-2008 in Korea, 455 extracts from myxobacteria consisting of 318 cellulolytic and 137 bacteriolytic myxobacteria were isolated, which were then screened for antifungal activity against the phytopathogens Botrytis cinerea, Colletotrichum acutatum, Penicillium sp., Pyricularia grisea, and Phytophthora capsici. 204 isolates had antifungal activity, causing both a clear zone due to blocked spore germination and inhibition of mycelial growth; most (199) were from cellulolytic (Sorangium cellulosum) and only five were from bacteriolytic myxobacteria. B. cinerea, the best controlled among the five tested pathogens, had a unique group of antifungal isolates of myxobacterial extracts compared to the other pathogens' groups. Among seventy-nine bioactive myxobacteria, four isolates, KYC 3130, KYC 3247, KYC 3248 and KYC 3270, were selected and all were cellulolytic. Liquid culture filtrates of these four myxobacteria were applied to tomato, cherry tomato, strawberry, and kiwi fruits 5 h before inoculation with gray mold conidia; then the treated fruits were placed in an airtight container and the experiment was repeated six to eight times. Incidence (%) of gray mold on fruit of the infected control treatment was 84-98%, whereas it was only 5-21% after the KYC 3270 treatment. After KYC 3270 treatment of the four fruits, mold control was 79-95%, which was highest among the filtrates and statistically the same as treatment with fludioxonil, a registered chemical against gray mold of stored fruits.
An extracellular chitinase of the selected strong antifungal microorganism, Serratia sp. 3095, was purified by salting out, affinity adsorption, Sepadex G-100 gel fitration, Sepadex G-75 gel fitration and DEAE Sepadex A-50 chromatography. The molecular weight of the purified chitinase was estimated to be 62,000 dalton by SDS-PAGE. Optimal pH and temperature of the chitinase were pH 7.5 and 45, respectively. The enzyme retained more than 80% of the activity between pH 5.5 and pH 10.5, and below $50^{\circ}C$ but was unstable above $60^{\circ}C$, below pH 5.0. The activity of the chitinase was inhibited about 60% by $Sn^{2+}$, 40% by $Hg^{2+}$ and $Ag^+$, 70% by AHA, 40% by iodoacetate, 35% by thiourea and p-CMB, but stabilized by SDS. $K_m$ value of the purified chitinase was 3.68 mg/ml for colloidal chitin. The chitinase from Serratia sp. 3095 showed antifungal activity to Fusariurm solani.
Park, J.H.;Park, G.J.;Lee, S.W;Jang, K.S.;Park, Y.H.;Chung, Y.R.;Cho, K.Y.;Kim, J.C.
Proceedings of the Korean Society of Plant Pathology Conference
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2003.10a
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pp.95.2-96
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2003
In order to develop a new microbial fungicide for the control of vegetable diseases using endophytic bacteria, a total of 260 bacterial strains were isolated from fresh tissues of 5 plant species. After they were cultured in broth media, their antifungal activities were screened by in vivo bioassays against Botrytis cinerea(tomato gray mold), Pythium ultimum(cucumber damping-off), Phytopkhora infestans(tomato late blight), Colletotrichum orbiculare(cucumber anthracnose), and Blumeria graminis f. sp. hordei(barley powdery mildew). As the results of screening, 38 bacterial strains showed potent antifungal activities against at least one of 5 plant pathogens. A bacterial strain EB072 displayed potent disease control activities against 3 plant diseases. Among the bacterial strains with a potent antifungal activity against cucunlber anthracnose, three bacterial strains, EB054, EB151 and EB215, also displayed a potent in vitro antifungal activity against C. acutatum, a fungal agent causing pepper anthracnose. A bacterial strain EB215 obtained from roots of cucumber was identified as Burkholderia cepacia based on its physiological and biochemical characteristics and 165 rRNA gene sequence. An antifungal substance was isolated from the liquid cultures of B. cepacia EB215 strain by ethyl acetate partitioning, repeated silica gel column chromatography, and invitro bioassay, Its structural determination is in progress by various instrumental analyses.
The fruits of cardamon (family Zingiberaceae) are used in traditional medicine for the treatment of several ailments. such as stomach disorders, liver abscess, and infection of the throat, and as a common spice as well, Amomum tsao-ko Crevost et Lemarie. a Zingiberaceous plant called "초과" in korea, is an oriental folk medicinal herb for the treatment of stomach illness. The present paper reports the isolation of the constituents of the fruits of this plant and their antifungal activity. (omitted)
The antifungal effect of pine needle extract prepared by a distinguishable extraction method and the dry distillation method, was examined. The effect of this extract itself was insignificant. The chemical components of pine needle extract were then investigated by gas chromatographic analysis, and four, chemical components, acetol, furfural, 5-methyl furfural, and terpine4-ol, were identified. The antifungal effects of those four chemical components against Alternaria mali (A. mali), an agent of Alternaria blotch of apple, were then examined. It was observed that the minimum inhibitory concentrations (MICs) were 6.25, 0.78, 0.78, and 12.5 (mg/ml) of acetol, furfural, 5-methyl furfural, and terpine-4-ol, respectively. MICs of furfural and 5-methyl furfural had the same order of magnitude as that of an antifungal agrochemical, chlorothalonil. Although furfural itself can not be completely substituted for an antifungal agrochemical, a partial mixture of furfural and antifungal agrochemical may be used as a substitute. The use of agrochemicals for the prevention of plant disease caused by pathogenic fungus such as A. mali could be partially reduced by the application of this mixture.
Ether extract of Cinnamomi Cortex showing antifungal activity was purified and characterized. The active component from the extract was identified to be trans-cinnamaldehyde, which was effective in inhibiting the growth of the representative fungi of dermatomycosis with minimum inhibitory concentration of $39{\sim}78\;{\mu}g/ml$. The antifungal spectrum of trans-cinnamaldehyde was broader than that of commercial antifungal agent, Ketoconazole.
Five strains out of 200 candidate strains (SG 1-9, 1-12, SG 2-8, 2-10, and 2-17) were selected to determine their antifungal activity against Raffaelea quercus-mongolicae. The 16S rDNA sequences of the five strains were determined by sequencing analysis and analyzed by the homology of the blast program at NCBI. The homology search showed that SG 1-9 and 1-12 had a 98% homology with Streptomyces cinnamoneus and 98% homology with Burkholderia cepacia, while SG 2-8, 2-10, and 2-17 had a 99% homology with Streptomyces fradiae, a 97% homology with Staphylococcus epidermidis, and a 99% homology with Staphylococcus epidermidis. Out of the five selected strains, organic extract and protein extracts of SG2-17 strain broth were employed to determine antifungal activity against Raffaelea quercus-mongolicae. The organic extract exhibited antifungal activity, but the protein extracts did not demonstrate such an activity. Three organic solvents, butanol, benzene, and ethyl acetate, were also used for determination of antifungal activities. The activity measurements revealed that benzene extract possessed the greatest inhibitory effect on the growth of Raffaelea quercus-mongolicae, with the next highest being butanol extract, and ethyl acetate extract being the lowest.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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