Tyrosine phenol-lyase of thermophilic Symbiobacterium sp. SC-1, which is obligately and symbiotically dependent on thermophilic Bacillus sp. SK-1, was purified and characterized. The enzyme is composed of four identical subunits and contains approximately 1 mol of pyridoxal 5'-phosphate (PLP) per mol subunit as a cofactor. The enzyme showed absorption maxima at 330 and 420 nm, and lost this absorption profile by treatment with phenylhydrazine. The apparent dissociation constsnt, $K'_D$, for PLP was determined with the apoenzyme to be about $1.2\;{\mu}M$. The isoelectric point was 4.9. The optimal temperature and pH for the $\alpha,\beta$-elimination of L-tyrosine were found to be $80^{\circ}C$ and pH 8.0, respectively. The substrate specificity of the enzyme was very broad: L-amino acids including L-tyrosine, 3,4-dihydroxyphenyl-L-alanine (L-DOPA), L-cysteine, L-serine, S-methyl-L-cysteine, $\beta$-chloro-L-alanine, and S-(o-nitrophenyl)-L-cysteine all served as substrates. D-Tyrosine and D-serine were also decomposed into pyruvic acid and ammonia at rates of 7% and 31% relative to their corresponding L-enantiomers, respectively. D-Alanine, which was inert as a substrate in a, $\beta$-elimination, was the only D-amino acid racemized by the enzyme. The $K_m$ values for L-tyrosine, L-DOPA, S-(o-nitrophenyl)-L-cysteine, $\beta$-chloro-L-alanine, and S-methyl-L-cysteine were 0.19, 9.9, 0.36, 12, and 5.5 mM, respectively.
Kim, Min-Hoe;Chung, Woo-Taek;Lee, Mi-Kyung;Lee, Jun-Yeup;Ohh, Sang-Jip;Lee, Jin-Ha;Park, Don-Hee;Kim, Dong-Jin;Lee, Hyeon-Yong
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제10권4호
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pp.455-461
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2000
Abstract Spirulina platensis was grown in SWlUe waste to reduce inorganic compowlds and simultaneously produce feed resources. Spirulina platensis prefers nitrogenous compounds in Ibe order: $NH_4^{+}-N>NO_3^{-}-N>simple-N$ such as urea and simple amino acids. It even consumes $NH_4^{+}-N$ first when urea or nitrate are present. Therefore, the content of residual $NH_4^{+}-N$ in Spimlina platensis cultures can be determined by the relative extent of the following processes: (i) algal uptake and assimilation; (ii) ammonia stripping; and (iii) decomposition of urea to NH;-N by urease-positive bacteria. The removal rates of total nitrogen ffild total phosphorus were estimated as an indicator of the treatment effIciency. It was found that Spirulina platensis was able to reduce 70-93% of $P_4^{3-}-P$, 67-93% of inorganic nitrogen, 80-90% of COD, and 37-56% of organic nitrogen in various concentrations of swine waste over 12 days of batch cultivation. The removal of inorganic compounds from swine waste was mainly used for cell growth, however, the organic nitrogen removal was not related to cell growlb. A maximum cell density of 1.52 dry-g/l was maintained with a dilution rate of 0.2l/day in continuous cultivation by adding 30% swine waste. The nitrogen and phosphorus removal rates were correlated to the dilution rates. Based on the amino acid profile, the quality of the proteins in the Spirulina platensis grown in the waste was the same as that in a clean culture.ulture.
A full-length cDNA of OgGRP gene encoding a glycinerich cell wall protein was isolated from wild rice (Oryza grandiglumis). Deduced amino acid sequences of OgGRP are composed of 148 amino acids (16.3 kDa), and show 85.9% homology with Osgrp-2 (Oryza sativa). RT-PCR analysis showed that RNA expression of OgGRP was regulated by defense-related signaling chemicals, such as cantharidin, endothall, jasmonic acid, wounding, or yeast extract treatment. In relation to pathogen stress, the function of OgGRP was analyzed in OgGRP over-expressing Arabidopsis thaliana. Overexpression of OgGRP in Arabidopsis contributed to moderate resistance against fungal pathogen, Botrytis cinerea, by lowering disease rate and necrosis size. In the analysis of the transgenic Arabidopsis lines to check the change of gene expression profile, induction of PR1, PR5 and PDF1.2 was confirmed. The induction seemed to be caused by the interaction of ectopic expression of OgGRP with SA-and JA-dependent signaling pathways.
Soybean is an important crop because its seed has very high protein relative to others. The quality of soy protein is limited by the concentration of the sulfur-containing amino acids in the amino acid profile. Among the supply of various forms of 0.4mM sulfur as S nutrition during seed fill. only 0.4mM L-methionine can inhibit ${\beta}$-subunit synthesis completely and produce the highest glycinin-containing seeds. Compared to 0.4mM sulfate control, seeds supplied by 0.4mM L-methionine have lower ${\alpha}$-, no ${\beta}$-subunit, and highly increased glycinin without altering total protein concentration. Supply of 0.2mM cystine (0.4mM S) did not affect the accumulative pattern of seed storage protein (SSP) subunits. In the supply of L-methionine, 0.2mM treatment showed higher glycinin in seeds but 0.05mM resulted in lower glycinin than tile sulfate control. The relative abundance of ${\alpha}^`$-subunit was not altered by any N or S nutrition. Under 5mM nitrogen, protein concentration was increased about 3-5% by substituting ammonia for nitrate during seed fill independent of nutrition. The increase resulted in the only increase of 7S protein, mainly ${\beta}$-subunit. Our data suggest that the regulatory system of SSP genes responds to the balance between N and S assimilates supplied from mother plant. and controls the di fferential synthesis of their subunits for the maximum protein accumulation in developing soybean seed.
동결저장 중 정어리버어거의 pH는 약간 감소하였고, 휘발성 염기질소 함량은 조금 증가하였다. 동결저장 중 과산화물값, TBA값, 지방산조성 및 색조를 측정한 결과 항산화제를 첨가하여 정어리버어거를 제조한 제품(E)와 진공포장한 제품(V)이 지질산화나 산화변색이 억제되었고, 억제효과는 항산화제첨가제품(E) 보다 진공포장제품(V)이 더욱 우수하였다. 정어리버어거를 진공포장함으로써 histidine을 주체로 하는 유리아미노산, IMP를 주성분으로 하는 핵산관련물질, total creatinine, betaine, TMAO와 같은 정미성분, 구성아미노산 및 텍스튜어는 동결저장 중 거의 변화가 없었다.
A new strain of Cucumber mosaic virus (CMV) from easter lily (Lilium longiflorum), Ly2-CMV, was identified and compared to the well-characterized Mf-CMV (subgroupⅠ) and LS-CMV (subgroupⅡ) by host reaction in several indicator plants, dsRNA analysis, serological property, RT-PCR analysis, restriction enzyme profile of the PCR products and nucleotide sequence of coat protein (CP) gene. Remarkable differences in symptoms of Ly2-CMV were found between Mf-CMV or LS-CMV in tobacco plants and Datura stramoinium. Ly2-CMV induced small necrotic ringspots on the inoculated leaves of Nicotiana tabacum cvs. Xanthi nc and Burley 21 and D. stramonium, and failed to infect these species systemically. Of the indicator plants tested, N. benthamiana only reacted with systemic infection by inoculation of Lr2-CMV. In experiments of dsRNA analysis, serology and RT-PCR of CP gene, Ly2-CMV was come within subgroupⅠ CMV. However, restriction enzyme analysis of the PCR products using MspⅠ showed that Ly2-CMV was distinct to Mf-CMV. The CP gene of Ly2-CMV contains 657 nucleotides, and the nucleotide sequence is similar to that of Mf-CMV. There is also a high degree of conservation between their putative gene products in Ly2-CMV and Mf-CMV, with five amino acid changes in the 218 amino acids of the CPs.
The ${\beta}2$ integrins are cell surface transmembrane proteins regulating leukocyte functions, such as adhesion and migration. Two members of ${\beta}2$ integrin, ${\alpha}M{\beta}2$ and ${\alpha}X{\beta}2$, share the leukocyte distribution profile and integrin ${\alpha}X{\beta}2$ is involved in antigen presentation in dendritic cells and transendothelial migration of monocytes and macrophages to atherosclerotic lesions. ${\underline{R}}eceptor$ for ${\underline{a}}dvanced$${\underline{g}}lycation$${\underline{e}}nd$${\underline{p}}roducts$ (RAGE), a member of cell adhesion molecules, plays an important role in chronic inflammation and atherosclerosis. Although RAGE and ${\alpha}X{\beta}2$ play an important role in inflammatory response and the pathogenesis of atherosclerosis, the nature of their interaction and structure involved in the binding remain poorly defined. In this study, using I-domain as a ligand binding motif of ${\alpha}X{\beta}2$, we characterize the binding nature and the interacting moieties of ${\alpha}X$ I-domain and RAGE. Their binding requires divalent cations ($Mg^{2+}$ and $Mn^{2+}$) and shows an affinity on the sub-micro molar level: the dissociation constant of ${\alpha}X$ I-domains binding to RAGE being $0.49{\mu}M$. Furthermore, the ${\alpha}X$ I-domains recognize the V-domain, but not the C1 and C2-domains of RAGE. The acidic amino acid substitutions on the ligand binding site of ${\alpha}X$ I-domain significantly reduce the I-domain binding activity to soluble RAGE and the alanine substitutions of basic amino acids on the flat surface of the V-domain prevent the V-domain binding to ${\alpha}X$ I-domain. In conclusion, the main mechanism of ${\alpha}X$ I-domain binding to RAGE is a charge interaction, in which the acidic moieties of ${\alpha}X$ I-domains, including E244, and D249, recognize the basic residues on the RAGE V-domain encompassing K39, K43, K44, R104, and K107.
In this study we investigate physical and chemical characteristics of immature and mature skipjack tuna (Katsuwonus pelamis) roes in fresh and dried forms. Fresh roes were studied for histological structure and also dried by three methods: hot air drying (HD), vacuum drying (VD) and freeze drying (FD). The obtained roe powders were analysed for proximate composition, color value, fatty acid composition, amino acid profile, equivalent umami concentration (EUC) and protein pattern. Unyolked oocytes were more common in immature roes, while fully yolked oocytes were more common in mature roes. All dried tuna roes contained high content of protein and lipid (69.31%-70.55% and 11.14%-16.02%, respectively). The powders obtained by FD provided the highest lightness value (L*). The main fatty acid found in all roe powders was docosahexaenoic acid (DHA) (23.49%-27.02%). Glutamic acid, leucine, and aspartic acid were the three most abundant amino acids found in the powders (13.58-14.61, 8.06-8.42, and 7.81-8.39 g/100 g of protein, respectively). The mature roe powder obtained from HD provided the highest EUC value (73.09 g monosodium glutamate/100 g of samples). The protein band at molecular weight of 97 kDa (vitelline) represented the major protein. Therefore, dried tuna roe could be a functional ingredient source of protein and lipid rich in DHA and it also has potential to be used as taste enhancer with umami compound.
Objective: The objective of the present study was to investigate the effect of dietary betaine (BT) supplementation on the hepatic transcriptome profiles in broiler chickens raised under heat stress (HS) conditions. Methods: A total of 180 (21-d-old) Ross 308 male broiler chicks were allotted to 1 of 3 treatment groups with 6 replicated cages in a completely randomized design. One group was kept under thermoneutral conditions at all times and was fed a basal diet (PC). Other 2 groups were exposed to a cyclic heat stress condition. One of the 2 groups under heat stress conditions was fed the basal diet as a negative control (NC), whereas the other group was fed the basal diet supplemented with 0.2% BT. All chickens were provided with diets and water ad libitum for 21 d. Following the experiment, the liver samples were collected for RNA sequencing analysis. Results: Broiler chickens in NC and BT group had decreased (p<0.05) growth performance. In the transcriptome analysis, the number of differentially expressed genes were identified in the liver by HS conditions and dietary BT supplementation. In the comparison between NC and PC treatments, genes related to energy and nucleic acid metabolism, amino acid metabolism, and immune system were altered by HS, which support the reason why heat-stressed poultry had decreased growth performance. In the comparison between NC and BT treatments, genes related to lipid metabolism, carbohydrate metabolism, and immune system were differently expressed under HS conditions. Conclusion: HS negatively impacts various physiological processes, including DNA replication, metabolism of amino acids, lipids, and carbohydrates, and cell cycle progression in broiler chickens. Dietary BT supplementation, however, offers potential counteractive effects by modulating liver function, facilitating gluconeogenesis, and enhancing immune systems. These findings provide a basis for understanding molecular responses by HS and the possible benefits of dietary BT supplementation in broiler chickens exposed to HS.
A croquette added with heat-treated kimchi at 20% showing higher sensory preferences was analyzed for its physicochemical properties and antioxidant activity using a croquette without kimchi as a control. Compared with the control, kimchi-added croquette had 3.3-fold higher organic acids content (p<0.001), resulting in a significant reduction of pH (p<0.001) and higher metal chelating activity (p<0.001). Upon addition of kimchi, total reducing capacity increased from 109.4 to $139.4{\mu}g/g$ gallic acid equivalents (p<0.01), and DPPH radical scavenging activity also increased 2-fold, which corresponded to 54% of the electron-donating ability of 0.35 mM gallic acid. In addition, contents of free amino acids and ${\gamma}-aminobutyric$ acid (GABA) appreciably increased by 1.6-fold (p<0.01) and 10-fold (p<0.001), respectively. This could be attributed to the ingredients of kimchi and/or enzymatic transformation of precursors by microorganisms during kimchi fermentation. Kimchi-added croquette was determined to be a good source of dietary fiber relative to its calorie content. Texture profile analysis showed no significant differences in hardness, springiness, cohesiveness, gumminess, and chewiness between the two croquettes with or without kimchi. Taken together, this study shows that utilization of heat-treated kimchi as a filling for croquette could be a good strategy to improve both the nutritional quality and antioxidant activity of croquette.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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