Purpose: Various bone graft materials have been used for periodontal tissue regeneration. Demineralized freeze-dried bone allograft (DFDBA) is a widely used bone substitute. The current widespread use of DFDBA is based on its potential osteoinductive ability. Due to the lack of verifiable data, the purpose of this study was to assess the osteoinductive activity of different DFDBAs in vitro. Methods: Sarcoma osteogenic (SaOS-2) cells (human osteoblast-like cells) were exposed to 8 mg/mL and 16 mg/mL concentrations of three commercial types of DFDBA: Osseo+, AlloOss, and Cenobone. The effect of these materials on cell proliferation was determined using the 3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyltetrazolium bromide assay. The osteoinductive ability was evaluated using alizarin red staining, and the results were confirmed by evaluating osteogenic gene expression using reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR). Results: In the SaOS-2 cells, an 8 mg/mL concentration of Osseo+ and Cenobone significantly increased cell proliferation in 48 hours after exposure (P<0.001); however, in these two bone materials, the proliferation of cells was significantly decreased after 48 hours of exposure with a 16 mg/mL concentration (P<0.001). The alizarin red staining results demonstrated that the 16 mg/mL concentration of all three tested DFDBA induced complete morphologic differentiation and mineralized nodule production of the SaOS-2 cells. The RT-PCR results revealed osteopontin gene expression at a 16 mg/mL concentration of all three test groups, but not at an 8 mg/mL concentration. Conclusions: These commercial types of DFDBA are capable of decreasing proliferation and increasing osteogenic differentiation of the SaOS-2 cell line and have osteoinductive activity in vitro.
Background: Kalkitoxin (KT) is an active lipopeptide isolated from the cyanobacterium Lyngbya majuscula found in the bed of the coral reef. Although KT suppresses cell division and inflammation, KT's mechanism of action in vascular smooth muscle cells (VSMCs) is unidentified. Therefore, our main aim was to investigate the impact of KT on vascular calcification for the treatment of cardiovascular disease. Objectives: Using diverse calcification media, we studied the effect of KT on VSMC calcification and the underlying mechanism of this effect. Methods: VSMC was isolated from the 6 weeks ICR mice. Then VSMCs were treated with different concentrations of KT to check the cell viability. Alizarin red and von Kossa staining were carried out to examine the calcium deposition on VSMC. Thoracic aorta of 6 weeks mice were taken and treated with different concentrations of KT, and H and E staining was performed. Real-time polymerase chain reaction and western blot were performed to examine KT's effect on VSMC mineralization. Calcium deposition on VSMC was examined with a calcium deposition quantification kit. Results: Calcium deposition, Alizarin red, and von Kossa staining revealed that KT reduced inorganic phosphate-induced calcification phenotypes. KT also reduced Ca++-induced calcification by inhibiting genes that regulate osteoblast differentiation, such as runtrelated transcription factor 2 (RUNX-2), SMAD family member 4, osterix, collagen 1α, and osteopontin. Also, KT repressed Ca2+-induced bone morphogenetic protein 2, RUNX-2, collagen 1α, osteoprotegerin, and smooth muscle actin protein expression. Likewise, Alizarin red and von Kossa staining showed that KT markedly decreased the calcification of ex vivo ring formation in the mouse thoracic aorta. Conclusions: This experiment demonstrated that KT decreases vascular calcification and may be developed as a new therapeutic treatment for vascular calcification and arteriosclerosis.
Journal of the korean academy of Pediatric Dentistry
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v.42
no.4
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pp.291-301
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2015
This study compared the in vitro cell viability and differentiation potentials of human deciduous dental pulp cells (DPCs) on mineral trioxide aggregate (MTA)-like products (ProRoot MTA, RetroMTA and Endocem Zr). The experimental materials were prepared as circular discs, which were used to test the effects of the materials on the viability of human DPCs when placed in direct and indirect contact. Furthermore, the pH of the extracted materials was recorded, and their effect on cell differentiation potential was evaluated by evaluating the alkaline phosphatase (ALP) activity and Alizarin Red S staining of DPCs incubated with the test materials. In direct contact, the cell viability of human DPCs was higher with ProRoot MTA and RetroMTA than with Endocem Zr. However, when in indirect contact, the cell viability of human DPCs was generally higher in Endocem Zr than in ProRoot MTA and Retro MTA. With respect to pH, the alkalinity was lower for Endocem Zr than for the other test materials. The ALP activities of the cells were not enhanced by any of the experimental materials. Alizarin Red S staining of the tested human DPCs revealed that their differentiation potential was lower than for cells incubated with osteogenic induction medium. While there were differences in the responses of the human DPCs to the test materials, all displayed degrees of cytotoxicity and were unable to enhance either the viability or differentiation of human DPCs. However, Endocem Zr exhibited better cell viability and was less alkaline than the other test materials.
Jang Ji Wook;Lee Bong;Han Chang Whan;Kim Mun Suk;Cho Sun Hang;Lee Hai Bang;Khang Gilson
Polymer(Korea)
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v.28
no.5
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pp.382-390
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2004
One of the significant natural bioactive materials is demineralized bone particle (DBP) whose has a powerful induce. of new bone growth. In this study, we developed the DBP loaded poly-lactide (PLA) and poly(L-lactide-co-glycolide) (PLGA) scaffolds for the possibility of the application of the tissue engineered bone. PLA/DBP and PLGA/DBP scaffolds were prepared by solvent casting/salt leaching method and were characterized by porosimeter, scanning electron microscopy. BMSCs were stimulated by osteogenic medium and characterized by histological stained Wright-Giemsa, Alizarin red, von Kossa, and alkaline phosphate activity (ALP). DBP impregnated scaffolds with BMSCs were implanted into the back of athymic nude mouse to observe the effect of DBP on the osteoinduction compared with control scaffolds. It can be observed that the porosity was above $90.2\%$ and the pore size was above 69.1$\mu$m. BMSCs could be differentiated into osteoprogenitor cells as result of wright-giemsa, alizarin red, von Kossa and ALP staining. In in vivo study, we could observed calcification region in PLA/DBP and PLGA/DBP groups, but calcification did not occur almost in control scaffolds. From these results, it seems that DBP as well as BMSCs play an important role for bone induction in PLA/DBP and PLGA/DBP scaffolds.
Objectives: The aim of the present study is to evaluate the effects of the extract of Pongamia pinnata on the morphology, viability, and differentiation potential of human stem cells derived from the gingiva. Methods: Stem cells obtained from gingivae were cultured in an osteogenic medium in the presence of methanol extract of Pongamia pinnata (PPT) at concentrations ranging from 0.001 to 1%. Evaluations of cell morphology and cellular viability were done at Day 1. Alkaline phosphatase activity assays and Alizarin red S staining were performed to evaluate the osteogenic differentiation of stem cells. Results: The morphology of stem cells in the presence of PPT at final concentrations of 0%, 0.001%, 0.01%, 0.1%, and 1% did not produce any noticeable changes when compared with the untreated control group. Application of PPT produced a significant increase in alkaline phosphatase activity when compared to the control group. The results of the Alizarin Red S staining showed a significant increase of absorbance with the 0.001% group. Conclusions: Based on these findings, it was concluded that PPT could produce beneficial effects on mesenchymal stem cells with enhanced osteogenic differentiation.
The purpose of this study was to investigate the effect of hydrocortisone in the fusion mechanism of the secondary palatine shelves in the rat. Pregnant rats were injected with 5.0 mg/100 gm body weight of hydrocortisone for 3 days between the 7th day and the 9th day of pregnancy. Between the 14th day md the 18 day of pregnancy, the fetuses were removed and decapitated to be immersed in $10\%$ formalin and Carney's solution. Preparations were stained with alizarin red S, hematoxylin-eosin and alcian blue respectively, and partly were treated for Periodic acid-Schiff reaction. The results were as followings: 1. The incomplete fusion of the palatal epithelium took place though the polarity of epithelial cells. 2. At the edge of shelves the differentiation of mesenchymal cells was observed, but the inter penetration of mesenchyme was not shown. 3. It was considered that the phenomenon of hypocalcification in matrix had relation to the decrease stainability to alizarin red S in shelves. 4. It might be concluded that the connective tissue under epithelium showed the decrease tendency to alcian blue and PAS reaction due to the inhibition of the synthesis of the mucopolysaccharide.
Background: This study was performed to provide a long-term bacterial seal through the formation of reparative dentin bridge, calcium silicate-based pulp capping materials have been used at sites of pulpal exposure. The aim of this study was to evaluate the mineralization-inducing potentials of calcium silicate-based pulp capping materials (ProRoot MTA [PR], Biodentine [BD], and TheraCal LC [TC]) in human dental pulp cells (HDPCs). Methods: Specimens of test materials were placed in deionized water for various incubation times to measure the pH variation and the concentration of calcium released. The morphology of HDPCs cultured on the specimens was examined using a confocal laser scanning microscope (CLSM). Alizarin red S staining and alkaline phosphatase assays were used to evaluate mineralization-inducing potentials of the capping materials. Results: BD showed the highest calcium release in all test periods, followed by PR and TC. (p<0.05). All experimental groups showed high alkalinity after 1 day, except at 14 days. BD showed the highest cell viability compared with PR and TC after 1 and 3 days, while TC showed the lowest value (p<0.05). The CLSM analysis showed that cells were well adhered and expressed actin filaments for all pulp capping materials. Mineralization by PR and BD groups was higher than that by TC group based on alizarin red S staining. BD showed significantly higher alkaline phosphatase activity than PR and TC, while TC showed the lowest value (p<0.05). Conclusion: Within the limitations of the in vitro study, BD had higher mineralization-inducing potential than PR and TC.
Journal of the korean academy of Pediatric Dentistry
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v.3
no.1
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pp.12-17
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1976
The study is about the effect of tetracycline-HCl on the amelogenesis and the dentinogenesis of the albino rats by means of histochemistry and fluorescence microscopy. Females in oestrus were mated overnight and examined the next morning for evidence of copulation. The mothers were intraperitonealy injected with a single dose of tetracycline-HCl from the eighth to tenth day of gestation. The heads of new born rats were fixed in Carnoy's solution and 10% formalin solution. The staining methods were alizarin red S stain, PAS reaction, colloidal iron reaction, Morin's stain and hematoxylin-eosin stain, The results were as follows: 1. By the single injection of tetracycline, the matrix formation of enamel and dentin were disturbed, and the shape and arrangement of ameloblast and odontoblast were distorted. 2. It seemed that, with the higher dose of tetracycline, the positive materials of PAS reaction were increased in the disturbed enamel and dentin matrix, but those of alizarin red S stain and colloidal iron reaction were decreased. 3. The fluorescence intensity in the disturbed enamel and dentin matrix were higher than the other areas and appeared to increase gradually with the higher dose of tetracycline.
Electrochemical behaviors of $Sm^3+$-ARS complexes has been investigated by d.c.polarography, differential pulse polarography and cyclic voltammetry. $Sm^3+$forms 1 : 3 adsorptive complexes with ARS.The reduction potential of complex wave $(P_2)$ shifted more negatively than the ligand wave $(P_1)$. The linear calibration curves of decreasing $P_1$ and increasing $P_2$ is obtained when $Sm^3+$ concentration varies from TEX>$2{\times}10^{-6}$ M to $3.2{\times}10^{-5}$ M.
Journal of the Korean Society of Clothing and Textiles
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v.37
no.4
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pp.590-597
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2013
This study examined the change in the dyeability of natural dyes on cotton fabrics by a PEI (polyethyleneimine) pretreatment instead of mordants. Cotton fabrics were treated with PEI and the changes in the dyeability were shown by measuring the amount of PEI on cotton fabrics. Samples treated with PEI were dyed with two natural polychromatic dyes with a different affinity to cotton fibers: Alizarin Red S and Curcumin. The changes in dyeability by three variables (time, temperature and concentration of dyes) on cotton fabrics were analyzed by the K/S value to define optimum dyeing conditions. Subsequently, the PEI treatment improved the dyeability of cotton fabrics with both dyes of low and high affinity to cotton fibers. Thus, PEI could be a suitable heavy metal mordant replacement.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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