본 연구는 미생물로부터 유래된 5종(AH, AK, AY, PS와 R)의 lipase들을 Amberlite XAD 7에 흡착법으로 고정화 시킨 후 각 immobilized lipase들의 특성을 알아보았다. 고정화 전과 후의 단백질 함량 및 각 free lipase들과 immobilized lipase들을 이용한 interesterification 반응물의 지방산과 TAG 조성을 분석하였다. 또한, immobilized lipase에 있어 중요한 요인인 reusability를 확인하였다. Free lipase의 단백질 함량은 2.22-11.41%로 AH가 가장 높았던 반면, immobilized lipase에서는 AH, PS와 AK가 mg protein/g support이 높았다. 한편, 반응 특성을 알아보기 위해 카놀라유, PEE와 StEE를 기질로 하여 batch type interesterification을 진행하였을 때, free lipase의 경우 free lipase R을 제외한 다른 free lipase들은 반응시간이 1시간에서 72시간으로 증가함에 따라 총 포화지방산 함량이 증가하였으며 그 중 free lipase AH가 반응성이 가장 높았다. 또한, RP-HPLC를 통해 free lipase AK 반응물을 분석한 결과, 반응시간이 길어질수록 카놀라유(0시간)에서 볼 수 있었던 57.49 area%의 ${\bigcirc}{\bigcirc}{\bigcirc}$가 6.53 area%로 감소하였다. 이는 각 free lipase들이 PEE와 StEE를 효소적 반응에 이용했기 때문이라고 판단된다. 한편, immobilized lipase AY와 R의 경우 반응시간이 1시간에서 48시간으로 증가하여도 카놀라유(0시간)의 총 포화지방산 함량과 큰 차이가 없었으나 immobilized AK의 경우 48시간에서 38.3 area%의 포화지방산 함량으로 가장 높은 활성을 보였다. 또한, 이를 사용하여 continuous type으로 반응하였을 때 유속이 느릴수록 효소와 기질 사이의 접촉 시간이 길어져 반응물의 총 포화지방산 함량이 증가함을 알 수 있었다. Reusability는 immobilized AK, AH와 PS 모두에서 두 번째 반복 반응을 하였을 때, 첫 번째 반응보다 총 포화지방산이 120-196.5% 증가하였다. 그러나 bounding protein 함량이 가장 높았던 immobilized AK는 support에 흡착되었던 free lipase AK의 탈착이 일어나 2번째 반응 후부터 활성이 감소한 반면, immobilized AH와 PS는 활성이 비교적 유지되었다.
The objective of this study was to investigate the effects of different ratios of corn silage (CS): alfalfa hay (AH), and extruded soybeans (ESB) on milk yield, milk composition, blood metabolites, and fatty acids in milk fat and plasma. Ninety multiparous Holstein cows were arranged in a randomized block design experiment which lasted 14 weeks. Treatments were arranged as a $3{\times}3$ factorial with 0%, 5% or 10% ESB (dry matter basis) and three forage treatments: I) 30% CS, 10% AH and 10% Leymus chinense hay (LC); ii) 20% corn silage, 20% alfalfa hay and 10% LC; iii) 10% CS, 30% AH and 10% LC. Cows were allowed to consume a total mixed ration ad libitum. There was no change of dry matter intake when cows were fed the experimental diets. As more AH was added to the diets, milk yield, milk protein content and yield, and trans9, cis11-conjugated linoleic acids (CLA) concentrations in milk fat and plasma increased. When ESB were supplemented to the diets, milk yield, and trans9, cis11-CLA concentration in milk fat and plasma increased. When 10% ESB was added to the diet containing 30% AH the trans9, cis11-CLA content (1.46 g/100 g of total fatty acids) in milk was the highest among all treatments. These results suggests that AH could replace part of a CS diet and be a good forage source of diet for dairy cows to improve milk yield and milk composition. Meanwhile, ESB could be included in the diet with high AH to improve production performance of dairy cows.
I. Objective The primary requirement of an endodontic root canal sealer is the biologic compatibility, because they remain in close contact with living periapical tissues over a long period of time. The aim of this study was the evaluation of cytotoxicity and genotoxicity of resin-based root canal sealers, AH 26 and ADSEAL. II. Material & Methods In this study, human periodontal ligament cells, human oral cancer cells (KB) and mouse osteoblasts (MC-3T3-E1) were used. Specimens of AH26, ADSEAL were eluted with culture medium for 1, 3, 5 and 7 days. Cytotoxicity was evaluated by using tetrazolium bromide reduction assay (MTT assay) for mitochondrial enzyme activity and cell viability. Genotoxicity was evaluated by using alkaline single cell gel electrophoresis assay (Comet assay). Also cell apoptosis induced by AH 26 was detected by Hoechst33258 staining. III. Results AH 26 and ADSEAL exhibited cytotoxic effects in all investigated cell groups. Genotoxicity was also noted for both sealers in mouse osteoblasts (MC-3T3-E1). But, ADSEAL presented significantly low cytotoxicity and genotoxicity compared with AH 26. Cytotoxicity and genotoxicity induced by AH 26 resulted in apopotosis. IV. Conclusion Our results clearly indicate that the recently invented ADSEAL has better biocompatibility than another resin based root canal sealer, AH 26. However ideal root canal sealer should have not only biocompatibility but also satisfactory physico-chemical properties such as sealing ability and stability. Thus continuous studies and developments should follow.
Park, Joo-Hung;Lee, Jeong-Min;Lee, Eun-Jin;Hwang, Won-Bhin;Kim, Da-Jeong
Molecules and Cells
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제41권4호
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pp.290-300
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2018
Using an in vitro model of intestinal organoids derived from intestinal crypts, we examined effects of indole-3-carbinol (I3C), a phytochemical that has anticancer and aryl hydrocarbon receptor (AhR)-activating abilities and thus is sold as a dietary supplement, on the development of intestinal organoids and investigated the underlying mechanisms. I3C inhibited the in vitro development of mouse intestinal organoids. Addition of ${\alpha}$-naphthoflavone, an AhR antagonist or AhR siRNA transfection, suppressed I3C function, suggesting that I3C-mediated interference with organoid development is AhR-dependent. I3C increased the expression of Muc2 and lysozyme, lineage-specific genes for goblet cells and Paneth cells, respectively, but inhibits the expression of IAP, a marker gene for enterocytes. In the intestines of mice treated with I3C, the number of goblet cells was reduced, but the number of Paneth cells and the depth and length of crypts and villi were not changed. I3C increased the level of active nonphosphorylated ${\beta}$-catenin, but suppressed the Notch signal. As a result, expression of Hes1, a Notch target gene and a transcriptional repressor that plays a key role in enterocyte differentiation, was reduced, whereas expression of Math1, involved in the differentiation of secretory lineages, was increased. These results provide direct evidence for the role of AhR in the regulation of the development of intestinal stem cells and indicate that such regulation is likely mediated by regulation of Wnt and Notch signals.
Formononetin is an isoflavonoid phytoestrogen found in certain foodstuffs such as soy and red clover. In this study, we examined the action of formononetin with the carcinogen activation pathway mediated through the aryl hydrocarbon receptor (AhR) in MCF-7 breast carcinoma cells. Treating the cells with formononetin alone caused the accumulation of CYP1A1 mRNA as well as elevation in CYP1A1-specific 7-ethoxyresorufin O-deethylase (EROD) activity in a dose dependent manner. However, a concomitant treatment with 7,12-dimethylbenz[a]anthracene (DMBA) and formononetin markedly reduced both the DMBA-inducible EROD activity and CYP1A1 mRNA level. Under the same conditions, formononetin inhibited the DMBA-induced AhR transactivation, as shown by reporter gene analysis using a xenobiotic responsive element (XRE). Additionally, formononetin inhibited both DMBA-inducible nuclear localization of the aryl hydrocarbon receptor (AhR) and metabolic activation of DMBA, as measured by the formation of the DMBA-DNA adducts. Furthermore, formononetin competed with the prototypical AhR ligand, 2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin (TCDD), for binding to the AhR in an isolated rat cytosol. These results suggest that formononetin might be considered as a natural ligand to bind on AhR and consequently produces a potent protective effect against DMBA-induced genotoxicity. Therefore, that's the potential to act as a chemopreventive agent that is related to its effect on AhR pathway as antagonist/agonist.
Background: Prostate-specific antigen (PSA) is a potential biomarker for early detection of prostate cancer (PCa) but its level is known to be affected by many background factors and roles of ubiquitous toxicants have not been determined. Endocrine disrupting chemicals (EDCs) are ubiquitous reproductive toxicants used in consumer products, which promote tumor formation in some reproductive model systems by binding to AhR, but human data on its expression in prostate cancer as well as its association with PSA levels are not clear. This study aimed to evaluate the expression levels of AhR and its association with serological levels of PSA and to detect possible effects of background factors and EDC exposure history on PSA levels in PCa cases. Materials and Methods: A cross-sectional study was conducted on the tissue levels of AhR and serum levels of PSA in 53 PCa cases from 2008-2011 and associations between each and background and lifestyle related factors were determined. Results: Although the AhR was overexpressed in PCa and correlated with the age of patients, it did not correlate with PSA levels.Of nutritional factors, increased intake of polysaturated fats and fish in the routine regimen of PCa cases increased the PSA levels significantly. Conclusions: AhR overexpression in PCa pontws to roles of EDCs in PCa but without any direct association with PSA levels. However, PSA levels are affected by exposure to possible toxicants in foods whichneed to be assessed as possible risk factors of PCa in future studies.
흰느타리버섯(Pleurotus cornucopiae(Per.) Rolland)중의 단백질을 선택적으로 분리정제하기 위하여 AH-Sepharose 4B를 출발 물질로 하여 benzoyl-AH-Sepharose 4B를 합성하여 친화성 크로마토그래피하였다. 1) AH-Sepharose 4B 중의 amino기의 capacity는 겔 Iml 당 $9.5{\mu}mol$ 이었으며 합성겔의 리간드인 benzoyl기의 capacity는 겔 1ml당 $9.3{\mu}mol4이었다. 2) 친화성이 있는 단백질의 총 겉보기 분자량은 255,000 돌톤 이었으며, 이는 29,500, 31,500, 34,000, 71,000 및 89,000돌톤 단백질의 복합체였다. 3) 친화성 단백질 중의 아미노산 함량은 비극성 아미노산이 45.68%, 극성 아미노산이 26.93%, 양성 아미노산이 11.81%, 그리고 음성 아미노산이15.58%였다. 4) 소수성 benzoyl기에 친화성이 있는 단백질은 비극성인 것이 선택적으로 분리되었다.
The initial irreversible capacity (IIC) of a hard carbon during the charge/discharge reaction is strongly affected by both the initial irreversible capacity on the carbon surface $(IIC_S)$ and the initial irreversible lithium insertion into carbon $(IIC_B)$. The initial coulombic efficiency of the insertion and the desertion of lithium (IIE) can be used as a performance to classify $IIC_B$ of the carbon. The $IIC_B$ was proportional to the specific discharge capacity with a slope, $IIE^{-1}$ - 1. The IIE of hard carbon had four regions. $IIE_A$ for the region of 0~95 mAh/g of $Q_{D1}$ was 60.2%. $IIE_B$ and $IIE_C$ for the regions of 95~172 mAh/g and 172~308 mAh/g had 84.9% and 91.5%, respectively. $IIE_D$ was appeared above 308 mAh/g. But, the $IIE_D$ was reduced to 82.1% compared with $IIE_C$. These IIE might be corresponding to lithium desertion from carbon at the region of 0~172 mAh/g range, lithium desertion from the micropore of carbon at the region of 172~308 mAh/g range, and to the lithium stripping of the plated lithium for the region above 308 mAh/g, respectively.
The purpose of this study was to evaluate for the cytotoxicity of root canal sealers - Tubliseal, N2, AH26, and Sealapex - on fibroblasts cultivated from human periodontal ligament. Succinate dehydrogenase activity test and $^{51}Cr$ release test were performed to evaluate the shortterm cytotoxicity. According to l,3 and 6 days vital cell count and $^{14}C$-leucine incorporation rate to fibroblasts were evaluated. The results of this study were as follows: 1. In the test of SDH activity by millipore filter method, Sealapex showed mild cytotoxicity but Tubliseal, N2 and AH26 showed severe cytotoxicity. 2. In $^{51}Cr$ release test, Tubliseal was the most cytotoxic sealer tested, and rank ordered the relative cytotoxicity of the other sealers tested as follows: AH26, N2, Sealapex. 3. In the test of viable cell count, cytotoxicity in Tubliseal was continued because vital cell number reduced with time. Because vital cell was not showed in N2 and AH26 at 1 day, it was recognized that N2 and AH26 exhibited severe cytotoxicity. In Sealapex, vital cell number increased remarkably with time, so it showed that cytotoxicity decreased with time. 4. In $^{14}C$-leucine incorporation rate test, protein sythesis was not produced in Tubliseal, N2 and AH26 after 3 days, it showed that cytotoxicity in Tubliseal, N2 and AH26 was severe. Although protein synthesis in Sealapex decreased with time, it continued after 6 days. Therefore Sealapex has been exhibited mild cytotoxicity.
Oltra, Enrique;Cox, Timothy C.;LaCourse, Matthew R.;Johnson, James D.;Paranjpe, Avina
Restorative Dentistry and Endodontics
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제42권1호
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pp.19-26
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2017
Objectives: Recently, bioceramic sealers like EndoSequence BC Sealer (BC Sealer) have been introduced and are being used in endodontic practice. However, this sealer has limited research related to its retreatability. Hence, the aim of this study was to evaluate the retreatability of two sealers, BC Sealer as compared with AH Plus using micro-computed tomographic (micro-CT) analysis. Materials and Methods: Fifty-six extracted human maxillary incisors were instrumented and randomly divided into 4 groups of 14 teeth: 1A, gutta-percha, AH Plus retreated with chloroform; 1B, gutta-percha, AH Plus retreated without chloroform; 2A, gutta-percha, EndoSequence BC Sealer retreated with chloroform; 2B, gutta-percha, EndoSequence BC Sealer retreated without chloroform. Micro-CT scans were taken before and after obturation and retreatment and analyzed for the volume of residual material. The specimens were longitudinally sectioned and digitized images were taken with the dental operating microscope. Data was analyzed using an ANOVA and a post-hoc Tukey test. Fisher exact tests were performed to analyze the ability to regain patency. Results: There was significantly less residual root canal filling material in the AH Plus groups retreated with chloroform as compared to the others. The BC Sealer samples retreated with chloroform had better results than those retreated without chloroform. Furthermore, patency could be re-established in only 14% of teeth in the BC Sealer without chloroform group. Conclusion: The results of this study demonstrate that the BC Sealer group had significantly more residual filling material than the AH Plus group regardless of whether or not both sealers were retreated with chloroform.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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