This study was performed to assess the antioxidant activities and whitening effects of Agrimonia pilosa Ledeb on melanin synthesis. The whitening effects of Agrimonia pilosa Ledeb water extracts were examined by in vitro mushroom tyrosinase assay and B16BL6 melanoma cells. We assessed inhibitory effect of Agrimonia pilosa Ledeb water extract on expression of melanogenic enzyme proteins including tyrosinase, tyrosinase-related protein 1 (TRP-1) and tyrosinase-related protein 2 (TRP-2) in B16BL6 cells. Inhibitory effect of Agrimonia pilosa Ledeb onto free radical generation was determined by measuring DPPH and hydroxyl radical scavenging activitie. Our results indicated that Agrimonia pilosa Ledeb water extract effectively inhibited free radical generation. In DPPH and hydroxy radical scavenging activity, Agrimonia pilosa Ledeb water extract had a potent anti-oxidant activity in a dose-dependent manner. They significantly inhibited tyrosinase activity in vitro and in B16BL6 melanoma cells. Also, Agrimonia pilosa Ledeb suppressed the expression of tyrosinase in B16BL6 melanoma cells. These results show that Agrimonia pilosa Ledeb inhibited melanin production on the melanogenesis. The underlying mechanism of Agrimonia pilosa Ledeb on whitening activity may be due to the inhibition of tyrosinase activity. We suggest that Agrimonia pilosa Ledeb may be useful as new natural active ingredients for antioxidant and whitening cosmetics.
Present study was conducted to evaluate the anti oxidative activity of the Agrimonia pilosa-Ledeb leaves on non-lipid oxidative damage. The antioxidative activity of methanolic (MeOH) extract of the Agrimonia pilosa-Ledeb leaves on non-lipid oxidation, including liposome oxidation, deoxyribose oxidation, protein oxidation, chelating activity against metal ions, scavenging activity against hydrogen peroxide, scavenging activity against hydroxyl radical and 2'-deoxyguanosine (2'-dG) oxidation were investigated. The MeOH extract of the Agrimonia pilosa-Ledeb leaves exhibited high anti oxidative activity in the liposome model system. Deoxyribose peroxidation was inhibited by the MeOH extract of the Agrimonia pilosa-Ledeb leaves and MeOH extract of the Agrimonia pilosa-Ledeb leaves provided remarkable protection against damage to deoxyribose. Protective effect of MeOH extracts of the Agrimonia pilosa-Ledeb leaves on protein damage was observed at $600{\mu}g$ level (82.05%). The MeOH extracts of the Agrimonia pilosa-Ledeb leaves at $300{\mu}g$ revealed metal binding ability (32.64%) for hydrogen peroxide. Furthermore, the oxidation of 2'-deoxyguanosine (2'-dG) to 8-hydroxy-2-deoxyguanosine (8-OH-2'dG) was inhibited by MeOH extracts of the Agrimonia pilosa-Ledeb leaves and scavenging activity for hydroxyl radical exhibited a remarkable effect. From the results in the present study on biological model systems, we concluded that MeOH extract of the Agrimonia pilosa-Ledeb leaves was effective in the protection of non-lipids against various oxidative model systems.
Park, Soo-Hyun;Sim, Yun-Beom;Kang, Yu-Jung;Lee, Jin-Koo;Lim, Soon-Sung;Suh, Hong-Won
The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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제16권2호
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pp.119-123
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2012
In the present study, the antinociceptive profiles of $Agrimonia$$pilosa$$Ledeb$ extract were examined in ICR mice. $Agrimonia$$pilosa$$Ledeb$ extract administered orally (200 mg/kg) showed an antinociceptive effect as measured by the tail-flick and hot-plate tests. In addition, $Agrimonia$$pilosa$$Ledeb$ extract attenuated the writhing numbers in the acetic acid-induced writhing test. Furthermore, the cumulative nociceptive response time for intrathecal (i.t.) injection of substance P (0.7 ${\mu}g$) was diminished by $Agrimonia$$pilosa$$Ledeb$ extract. Intraperitoneal (i.p.) pretreatment with yohimbine (${\alpha}_2$-adrenergic receptor antagonist) attenuated antinociceptive effect induced by $Agrimonia$$pilosa$$Ledeb$ extract in the writhing test. However, naloxone (opioid receptor antagonist) or methysergide (5-HT serotonergic receptor antagonist) did not affect antinociception induced by $Agrimonia$$pilosa$$Ledeb$ extract in the writhing test. Our results suggest that $Agrimonia$$pilosa$$Ledeb$ extract shows an antinociceptive property in various pain models. Furthermore, this antinociceptive effect of $Agrimonia$$pilosa$$Ledeb$ extract may be mediated by ${\alpha}_2$-adrenergic receptor, but not opioidergic and serotonergic receptors.
본 연구에서는 식중독 유발세균에 대한 항균활성이 우수한 천연 항균성 물질을 검색하기 위해 예로부터 민간과 한방에서 널리 이용되어 온 선학초를 각종 유기용매로 추출하여 식중독 유발세균에 대한 항균활성을 조사해 보았다. 선학초를 methanol로 추출한 후, Petroleum ether, chloroform, ethyl acetate를 이용하여 실온에서 각각 용매별로 계통 분획하고, 수용성추출물을 얻은 후, 9종의 식중독 유발세균 (Staphylococcus Aureus, Bacillus Cereus, Salmonella Enteritidis, Shigella Flexneri, Escherichia Coli, Salmonella Typhimurium, Shigella Dysenteriae, Pseudomonas Aruginosa, Shigella Sonnei)에 대하여 항균효과를 조사하였다. 선학초 추출물의 농도별 항균 활성 검색에서는 선학초의 petroleum ehter 추출물이 가장 큰 항균 효과를 보였으며 Pseudomonas Aruginosa가 가장 민감하게 반응하는 균주였다. 선학초의 petroleum ehter 추출물과 자소엽의 methanol 추출물을 혼합하여 항균력을 측정해 본 결과 두 추출물을 섞어 첨가했을 경우가 단독으로 사용했을 때 보다 상승효과를 나타내었다. 또한 선학초의 petroleum ehter 추출물이 식중독 유발세균의 성장에 미치는 효과를 검정하기 위해 Bacillus Cereus와 Salmonella Enteritidis 배양액에 선학초의 petroleum ehter 추출물을 각각 4,000 ppm 농도로 첨가했을 때, Bacillus Cereus의 생육이 24시간 이상까지 억제됨을 관찰할 수 있었고, Salmonella Enteritidis 의 생육도 36시간까지 지연시킬 수 있었다. 이상의 결과 선학초의 petroleum ehter 추출물은 Bacillus Cereus와 Salmonella Enteritidis의 성장을 억제하는 것을 알 수 있었다. 이상의 결과 선학초의 petroleum ether 추출물은 각종 식중독 유발세균의 성장을 억제하는 천연 식품보존제 개발의 신소재로 활용될 가능성이 있음을 알 수 있었다.
The antioxidant potentials of the methanol extract and its various fractions from Agrimonia pilosa Ledeb were measured as 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH), and 2,2'-azinobis-(3-ethylbenzothiazoline-6-sulphonic acid) (ABTS) radical scavenging abilities as well as the reducing power decreasing NO in vitro. The methanol extract of Agrimonia pilosa Ledeb showed significantly strong scavenging effects on free radicals of DPPH, ABTS, and NO. Hexane fraction (HF), ethyl acetate fraction (EF) and n-butyl alcohol fraction (BF) were prepared by solvent fractionation. By comparison of polyphenol contents among BF and HF, EF with high polyphenol contents showed the highest DPPH, ABTS, and NO scavenging effects with the value of 50.2%, 80.4%, and 65.7%, respectively, at the highest tested dose. HPLC analysis revealed the presence of various phenolic compounds in EF of Agrimonia pilosa Ledeb. These results suggest that EF could be considered as natural antioxidant sources and dietary nutritional supplements to prevent oxidation-related diseases.
Background: In this study, microwave extraction was used, which is an effective method to extract useful bioactive substances as it requires low quantities of solvent and short time periods. The aim of this study was to determine the optimal extraction conditions for Agrimonia pilosa Ledeb. Methods and Results: The independent variables were ethanol concentration, microwave power, and extraction time, each of which had five levels. The dependent variables were total polyphenol and total flavonoid content, and DPPH radical scavenging activity. To determine the optimal extraction conditions for bioactive compounds, a response surface methodology was employed. Contour maps were generated from polynomial equations. The optimal conditions were then assumed by superimposing these contour maps. Based on the resulting graph, the optimal microwave extraction conditions for Agrimonia pilosa Ledeb were determined as 42 - 48% ethanol concentration, 240 - 280W microwave power, and 13 - 20 min of extraction time. Conclusions: Ethanol concentration had a significant effect on microwave extraction, in terms of total polyphenol and total flavonoid content, as well as DPPH radical scavenging activity. Microwave power and extraction time influenced the total polyphenol content, but not the total flavonoid content or the DPPH radical scavenging activity.
The purpose of this study was to investigate the mechanism of ethanol extract of Agrimonia pilosa Ledeb. (EAP)-reduced melanogenesis and diphenyl-picryl-hydrazyl (DPPH) radical scavenging activity. Agrimonia pilosa Ledeb., a perennial herbaceous plant, has been used as an antihemorrhagic, anthelminntic, and antiinflammatory agents in Chinese herbal medicine. In the present study, we observed that melanin synthesis and tyrosinase activity of B16F10 cells were significantly decreased by EAP. However, EAP could not suppress tyrosinase activity in the cell-free system, whereas kojic acid directly inhibited tyrosinase activity. Furthermore, EAP decreased the protein expression of tyrosinase, tyrosinase-related prootein 1 (TRP-1), and tyrosinase-related prootein 2 (TRP-2). EAP scavenged DPPH radical up to 41% with 100 ${\mu}g/m{\ell}$ concentration. These results suggest that the hypopigmentary effect of EPA was due to regulation of tyrosinase protein.
본 연구는 우리나라의 야산이나 길가, 들판 등에 흔히 자라는 여러해살이 풀이며, 오래 전부터 민간요법 및 한방에 유용 한 약재로 사용되어 지고 있는 선학초(Agrimonia pilosa Ledeb.)를 이용하여 여드름 유발균에 대한 항균활성을 평가하고, 이를 토대로 항여드름 관련 화장품 소재를 개발하는데 그 목적이 있다. 선학초를 methanol로 추출한 후, 이 추출물을 여드름 유발균주인 P. acne를 이용하여 minimum inhibitory concentration (MIC) 및 paper disk diffusion assay로 항균 효과를 측정하였으며, 추출물에 대한 온도 및 pH 변화에 따른 안정성을 평가하였다. 추출물을 이용하여 P. acne에 대한 MIC 값은 0.005 mg/mL로 측정되었으며, 이는 대조군으로 사용한 항생제인 triclosan의 MIC 값(0.004 mg/mL)과 비교했을 때 시료가 선학초 전초에 대한 crude extract임을 고려하면 매우 항균활성이 높은 것으로 평가되었다. 추출물에 대한 paper disk diffusion assay를 수행한 결과, 대조군으로 사용한 triclosan 처럼 높은 활성을 나타내는 것으로 측정되었으며, Staphylococcus aureus를 비롯한 여러 종의 호기성 균주에도 선학초추출물은 항균활성이 우수한 것으로 평가되었다. 선학초 추출물의 온도, pH 안정성을 평가한 결과, 70, 80, 90, 100, $121^{\circ}C$ 등 다양한 온도 조건과 $pH 2{\sim}pH 11$의 변화에 있어서도 그 효능이 변하지 않고 안정된 상태로 유지되는 것으로 관찰되었다.
Agrimonia pilosa Ledeb. has long been used for a useful natural agent ameliorating inflammation related symptoms in the folk medicine recipe. This study was performed to investigate effects of Agrimonia pilosa Ledeb.(AP) on the expression of inflammation related genes such as the inducible nitric oxide synthase (iNOS) in macrophage cell line, RAW 264.7 cells. The AP (whole plants) was extracted with 80% ethanol and sequentially partitioned with solvents in order to increase polarity. Among the various solvent extracts of AP, the n-butanol (BuOH) fraction showed the most powerful inhibitory ability against nitric oxide (NO) production in lipopolysaccharide (LPS)-induced RAW 264.7 cells without affecting cell viability. Reverse transcriptase-polymerase chain reaction and Western blot analysis revealed that the BuOH fraction provided a primary inhibitor of the iNOS protein and mRNA expression in LPS-induced RAW 264.7 cells. The DPPH and OH radical scavenging activities of the several fractions of 80% ethanol extracts of AP significantly increased by EtOAC and BuOH fractions. Thus, the present study suggests that the response of a component of the BuOH fraction to NO generation via iNOS expression provide an important clue to elucidate anti-inflammatory mechanism of AP.
Complementary and alternative medicines are considered as a promising research field to develop new therapies for various allergic diseases. In this study, we investigated the anti-allergic effect of Agrimonia pilosa Ledeb (AP) by using passive cutaneous anaphylaxis in mice and its mechanism of action in mast cells. The extract of AP reversibly inhibited degranulation in RBL-2H3 cells and bone marrow-derived mast cells (BMMCs). AP also suppressed the passive cutaneous anaphylaxis inducing by IgE and antigen (Ag) in a dose-dependent manner. In the study to find its mechanism of action, AP inhibited the phosphorylation of Syk kinase, a pivotal protein which is regulated by Src-family kinase for activation of mast cells. In addition, AP also suppressed activation of Akt and Erk1/2 that are critical for the production of cytokines in mast cells. The results strongly suggest that AP exerts anti-allergic activity in vitro and in vivo through the inhibition of activation of Syk in mast cells.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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