Agaricus bisporus, commonly known as the button mushroom, is the most widely cultivated species of edible fungi. Low frequency of recombination ratio and homokaryotic or monokaryotic spore on meiotic basidia form obstacles for breeding programs. Since the first hybrid varieties for white button mushrooms were released in Europe, new varieties released afterwards were either identical of very similar to these first hybrids on morphologies. Therefore, different DNA markers have been used to define unique varieties of A. bisporus strains. Aim of this study is to assess the genetic diversity of different A. bisporus strains in Korea. Twelve UFP (Universal fungal primer, JK BioTech. Ltd), 12 simple sequence repeat (ISSR) and 30 SSR primers were used to assess genetic diversity of monokaryotic and dikaryotic Agaricus bisporus strains including other 19 Agaricus spp. Of them, four UFP, four SSR primers, $(GA)_8T$, $(AG)_8YC$, $(GA)_8C$ and $(CTC)_6$ and seven SSR markers produced PCR polymorphic bands between the Agaricus species or within A. bisporus strains. PCR polymorphic bands were inputted for UPGMA cluster analysis. Forty five strains of A. bisporus are genetically clustered into 6 groups, showing coefficient similarity from 0.75 to 0.9 among them. In addition, genetic variations of monokaryotic and dikaryotic Agaricus bisporus strains were partially detected by PCR technologies of this study. The varieties, Saea, saedo, Saejeong and Saeyeon that have recently been developed in Korea were involved in the same group with closely genetic relationship of coefficient similarity over 0.96, whereas, other strains were genetically related to A. bisporus strains that were introduced from USA, Eroupe and Chinese.
Aspergillus 속 균주 MK-24로부터 venom proteinase inhibitor의 생산조건을 검토한 결과 질소원으로서는 유기능질소가 균생육에 있어서는 매우 좋았으나 물질생성에 있어서는 무기능질소보다 못하였다. 무기질소원으로서는 sodium nitrate가 가장 좋은 효과를 보였다. 단소원으로서는 glucose가 대부분 당류와 비슷한 결과를 나타내었고 특히 arabitol, xylitol, salicin 등은 본 균주가 단소원으로 사용치 못하는 것으로 추정되었으며, vitamin 류는 물질생성에 무관하였으며 금속염류로서는 효과적인 것은 없으나, Ag$^+$, Co$^{++}$, $Zn^{++}$ 등은 억제하였다. 배양온도와 pH는 각각 3$0^{\circ}C$와 pH 5가 균의 생육과 저해물질생성에 제일 적당하였고, 단소원과 질소원으로서 glucose 2%, NaNo$_3$ 0.3%을 가한 액체배지에서 7일간 정치배양 하였을 때 저해물질생육이 가장 좋았다.
Breast cancer is the most common malignancy among women, and mutations in the BRCA1 gene produce increased susceptibility to these malignancies in certain families. In this study, the forward 1-13 exons of breast cancer associated gene BRCA1 were cloned from breast cancer cell line ZR-75-30 by RT-PCR method. Sequence analysis showed that nine BRCA1 splice forms were isolated and characterized, compared with wild-type BRCA1 gene, five splice forms of which were novel. These splice isoforms were produced from the molecular mechanism of 5' and 3' alternative splicing. All these splice forms deleting exon 11b and the locations of alternative splicing were focused on two parts:one was exons 2 and 3, and the other was exons 9 and 10. These splice forms accorded with GT-AG rule. Most these BRCA1 splice variants still kept the original reading frame. Western blot analysis indicated that some BRCA1 splice variants were expressed in ZR-75-30 cell line at the protein level. In addition, we confirmed the presence of these new transcripts of BRCA1 gene in MDA-MB-435S, K562, Hela, HLA, HIC, H9, Jurkat and human fetus samples by RT-PCR analysis. These results suggested that breast cancer associated gene BRCA1 may have unexpectedly a large number of splice variants. We hypothesized that alternative splicing of BRCA1 possibly plays a major role in the tumorigenesis of breast and/or ovarian cancer. Thus, the identification of cancer-specific splice forms will provide a novel source for the discovery of diagnostic or prognostic biomarkers and tumor antigens suitable as targets for therapeutic intervention.
Diabetes has been one of major health risks in industrialized countries. AMP-activated protein kinase (AMPK) has been focused as a novel therapeutic target for the treatment of metabolic syndromes, because AMPK increases glucose uptake through independent insulin signal pathway. In this study, we investigated the anti-diabetic effect of Angelica gigas Nakai extract (AGNEX), a mixture of decursin and decursinol angelate (53 : 47), decursin and decursinol angelate on blood glucose, glucose transport (GLUT) and AMPK expression levels in streptozotocin (STZ)-induced diabetic rats. To induce diabetes, 50 mg/kg of STZ was injected via i.v. route and AGNEX 2 mg/kg (STZ+AG), decursin 2 mg/kg (STZ+D), decursinol angelate 2 mg/kg (STZ+DA), and metformin 100 mg/kg (STZ+M) were administered orally for 21 days. STZ+DA group showed a significant decrease in fasting blood glucose levels compared to the other groups. Decursinol angelate significantly upregulated expression of glucose transporter 4 (GLUT4) and phosphorylation of AMPK (p-AMPK) in skeletal muscle of rats. In pancreas of rats, decursinol angelate significantly increased expression of GLUT2 through down-regulation of p-AMPK. In addition to the result of pancreatic islets morphology, AGNEX, decursin, decursinol angelate, and metformin treated group recovered ${\beta}$-cell damage by hyperglycemia. These results indicate that decursinol angelate might be a potential anti-diabetic agent and AGNEX could be useful in the treatment of diabetes mellitus.
Biphenyl dimethyl dicarboxylate (DDB) is a hepatoprotectant, which is used as an adjuvant agent in a treatment for chronic hepatitis. Amantadine is an antiviral agent, which is utilized primarily in the treatment of influenza, but also, occasionally in the treatment of hepatitis C. In a previous study, we reported that DDB, coupled with amantadine, would exert an anti-HBV effect, via the induction of interferon-inducible gene expression in the HepG2 2.2.15 cell line. The primary objective of the present study was to determine whether or not DDB and/or amantadine exhibit anti-HBV properties, and what mechanisms of action might be involved in such properties. In our study, we were able to determine that DDB stimulates Jak/Stat signaling, and induces the expression of interferon alpha $(IFN-\alpha)$ stimulated genes, most notably 6-16 and ISG12. In addition, the antiviral effectors induced by $IFN-\alpha$, PKR, OAS, and MxA, were regulated in the presence of DDB at its optimal concentration $(250{\mu}g/mL)$, to a degree commensurate with the degree of induction associated with the $IFN-\alpha$ treated group. Finally, we determined that the replication of pregenomic RNA and HBeAg was inhibited by DDB treatment, and this inhibition was maximized when coupled with the administration of amantadine $(25{\mu}g/mL)$. In conclusion, the results of this study demonstrated clearly that DDB, as well as the combination of DDB/amantadine, directly inhibited $IFN-\alpha$ signaling-mediated replication of HBV in infected hepatocytes, and thus may represent a novel treatment for chronic hepatitis B, which would be characterized principally by its improved safety over other treatment strategies.
세포내 및 세포벽 뿐만 아니라, 세포외에도 invertase를 구성적으로 생산하는 효모 Rh.glutinis K-24로 부터 세포외 invertase를 disc 전기 영동상으로 단일한 상태로까지 정제하였다. 정제 효소의 효소화학적 성질을 밝힌 후 이미 보고한 바 있는 세포내 및 세포벽 invertase와 그 개락적 성질을 비교 검토하였다.
오늘날 기업에게 기술력과 디자인은 무한경쟁시대에서 요구되는 전제조건으로 인식되고 있다. 대부분의 기업 특히 도자기기업에서는 실용적이거나 또는 제품의 미적인 부분을 개별적으로 다루고 있는 것이 사실이다. 이에 따라 기업의 아이덴티티를 형성하기에 어려움을 겪게 된다. 그러나 독일의 로젠탈사의 경우 이미 1900년대 중반부터 디자인과 더불어 독창적인 프로세스를 통하여 기업의 아이덴티티를 확립하였으며, 독창적인 디자인 매니지먼트를 통해 제품을 생산하는 기업으로 평가되고 있다. 특히 로젠탈의 아이덴티티는 디자인 결과물이 아니라 개발 프로세스를 검증하는 "Jury System"과 독립브랜드 마케팅 그리고 순수 예술가들과의 콜라보내이션과 같은 실험정신에 의해 더욱 독창적으로 형성되고 있다. 특히 디자인 개발에 예술가들이 참여함으로써 이 기업의 도자기 제품은 단순히 생활도자 제품만이 아니라 감상과 수집을 위한 명품으로 평가되고 있다. 또한 로젠탈은 기업 아이덴티티가 단순히 제품에 의해 생성되는 것이 아니라, 디자인 경영기술을 통한 기업 내 외적 요인에 의해 완성될 수 있음을 보여주고 있다.
Low Temperature Co-fired Ceramic (LTCC) technology has been used in electronic device for various functions. LTCC technology is to fire dielectric ceramic and a conductive electrode such as Ag or Cu thick film below the temperature of $900^{\circ}C$ simultaneously. The glass-ceramic has been widely used for LTCC materials due to its low sintering temperature, high mechanical properties and low dielectric constants. To obtain the high strength, addition of filler, the microstructure should have various crystals and low pores in a composite. In this study, two glass frits were mixed with different alumina size(0.5, 2, 3.7um) and sintered at the range of $850{\sim}950^{\circ}C$. The microstructure, crystal phases, thermal and mechanical properties of the composites were investigated using FE-SEM, XRD, TG-DTA, Dilatomer. When the particle size of $Al_2O_3$ filler increased, the starting temperatures for the densification of the sintered bodies, onset point of crystallization, peak crystallization temperature in the glass-ceramic composites decreased gradually. After sintered at $900^{\circ}C$, the glass frits were crystallized as $CaAl_2Si_2O_8\;and\;CaMgSi_2O_6$. The purpose of our study is to understand the relationship between the $Al_2O_3$ particle size and thermal properties in composites.
The purpose of this study was to develop a new preparation process for chemical transformation of ginseng saponin glycosides to prosapogenins. Ginseng and ginseng extracts were processed under several treatment conditions using ascorbic acid solution. Treating with ascorbic acid at pH 2-3 and above $80^{\circ}C$ increased the ginsenoside $Rg_3$ content of samples to over 3% as compared to other pH levels and temperatures. In addition, ginseng and ginseng extracts that were processed under a high ascorbic acid solution treatment condition (pH 2.0, 5 hr) contained more ginsenoside $Rg_3$ (approximately 16 times) than those processed under a low ascorbic acid solution treatment condition (pH 3.0, 5 hr). The highest quantity of ginsenoside $Rg_3$ (3.434%) occurred when a sample of fine ginseng root extract (AG2-9) was processed with the ascorbic acid solution at pH 2.0 for 9 hr. However, there was no change in the amount of ginsenoside $Rg_3$ when fine ginseng root extracts were processed with ascorbic acid solution at pH 2.0 for over 9 hr. In conclusion, the results indicated that ascorbic acid treatment of ginseng extracts can produce a level of ginsenoside $Rg_3$ that is over 90-fold the amount found in commercial red ginseng.
The proteolytic enzyme from Saccharomyces sp. B101 was purified to homogeneity by ammonium sulfate fractionation, ultrafiltration, diethyl aminoethyl (DEAE)-Sephadex A-50 ion-exchange chromatography, and Sephadex G-100 gel filtration chromatography from the culture supernatant of Saccharomyces sp. B101. The specific activity and the purification fold of the purified enzyme were 4,688.9 unit/mg and 18, respectively. The molecular weight of the purified enzyme was estimated to be 33 kDa by sodium dodecylsulfate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE). The optimum pH and temperature for the enzyme activity were pH 8.5 and $30^{\circ}C$, respectively. The enzyme activity was relatively stable in the pH range of 6.5-8.5 at below $35^{\circ}C$. The salt-tolerance and stability for the enzyme activity were relatively stable even at NaCl concentrations of 10 and 15%. The activity of enzyme was inhibited by $Ag^{2+}$ and $Fe^{2+}$, and activated by $Mn^{2+}$. In addition, the enzyme activity was potently inhibited by ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA) and phenylmethyl sulfonylfluoride (PMSF). Based on these findings we concluded that the purified enzyme was a serine protease. Km and Vmax values for hammastein milk casein were 1.02 mg/mL and 278.38 unit/mL, respectively.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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