본 논문은 양식장에서 자연감염된 궤양성 가물치로부터 우점종으로 분리된 Aeromonas veronii 를 건강한 가물치에 접종한 후, 어체 각 기관의 병변 진행사항을 조직학적 측면에서 연구한 것이다. 양식장내에서 자연 간염된 어체에서의 병변과정은 관찰할 수 없었지만, Aeromonas veronii 로 인공감염시킨 어체의 병변은 자연상태에서 감염된 병변과 매우 유사하였다. 인공감염시킨 어체는 감염후 2일째부터 피부를 비롯하여 아가미, 소화관 조직에 뚜렷한 조직괴사가 식별되었고, 5일 후에는 신장, 사망 직전인 9일 후에는 간과 비장까지 조직의 괴사내지는 세포응축을 나타냈다. 병이 진행됨에 따라 가물치는 피부손상을 비롯하여 호흡, 소화흡수, 배설 등 영양대사의 저해를 수반하면서 감염후 9일이내에 사망하는 것으로 나타났다. 자연감염 어체에서 우점종으로 분리된 균주, Aeromonas veronii 는 가물치의 출혈성 궤양증을 유발하는 주된 균증의 하나로 판단된다.
We reported an outbreak of Aeromonas (A.) veronii responsible for ulcerative dermatitis in Israeli carp (Cyprinus carpio). The major clinical signs were darkening body, abdominal extension, exophthalmos and severe ulcerative necrosis in the skin. The necropsy showed yellowish ascites, necrosis in liver and enlargement of kidney and spleen in the morbid fish. In blood agar for culturing bacteria, three different colonies were identified as A. veronii, Plesimonas shigelloides and Shewanella putrefaciens by phylogenetic identification using 16S rRNA or gyrB gene sequences. A. veronii was the most dominant species among them and was resistant to ampicillin, nalidixic acid and oxytetracycline.
In May 2007, mass mortality of Israeli carp, Cyprinus carpio L., was occured on a pond farm located in Jeollabukdo Province, Korea. The mortality rates reached up to 2% of the total fish in the farm per day. Typical clinical signs were abdominal distension, reddish foci on the skin, enteritis, liver congestion and enlarged spleen and kidney. On the basis of biochemical characteristics and 16S rDNA sequence, the causative bacteria isolated from affected carp were identified as Aeromonas veronii. Histologically, degeneration of hepatocytes and congestion in sinusoids were observed in the liver. Spleen showed hemorrhage and the destruction of the sheathed tissues. In kidney, necrotized renal tubules and glomerular destructions were observed. Intestinal tissues revealed necrotized and severe hemorrhage. Mass hemorrhage was observed in muscles. This is the first report that A. veronii caused mortality in cultured Israeli carp in Korea.
최근 국내의 양식 메기에 표피 박리와 근육 괴사를 특징으로 하는 새로운 질병이 발생하였다. 그 폐사율은 낮으나 질병으로 인한 상품가치의 저하로 경제적 손실이 크다. 병어로부터 원인균을 분리하고 자연감염어와 인위감염어의 병리학적 변화를 관찰하였다. 원인균은 Aeromonas veronii로 동정되었으며, 원인균을 건강어에 인위감염시켜 폐사 및 증상의 발현을 매일 관찰하였다. 인위감염된 어류의 증상은 자연감염어와 유사하였으며 원인균을 감염시킨 후 7일 이내에 모두 폐사하였다. 병어의 조직표본을 제작하여 관찰한 결과, 자연감염어의 간, 비장, 신장의 울혈 및 간세포 변성과 비장 협조직의 초자적변성이 관찰되었으며, 특히 심장에서 염증성 변성과 세균응집체가 관찰되었다. 소화관에서의 울혈과 점막고 유층의 섬유화 현상도 특징적이었다. 자연감염어에 비해 약한 경향이지만 인위감염어의 조직학적 변화도 관찰되었으며, 소화관에서의 조직학적 변성은 관찰되지 않았다.
부산의 가물치 양식장으로부터 분리된 A. veronii bv. sobria 와 A. caviae를 대상으 로 16S-23S rRNA Intergenic Spacer Region을 cloning 하여 염기서dufd을 분석하였다. A. veronii bv. sobria 는 4그룹의 band pattern이 형성되었고 A. caviae는 1그룹만이 존재하였 다. A. veronii bv. sobria 의 4그룹에 대한 band 수는 2~4개까지 다양하게 나타났으며. 479~481 bp (ISR-1), 513~524 bp (ISR-2), 537~539 bp (ISR-3) 의 염기서열을 밝혀냈다. A. caviae는 3개의 band가 형성되었고,470~480bp (ISR-1), 521~525bp (ISR-2),568~602 bp (ISR-4)의 염기서열을 가지고 있었다. 그리고 이들에 대한 tRNA를 분석한 결과 ISR-1은 tRNAIle(GAT), tRNAAla(TGC)를 가지고 있고 ISR-2,3,4는 tRNAGlu(TTC)를 가지고 있었 다. A. caviae는 ISR-4의 151~281 bp에서 A. veronii bv. sobria 가 가지고 있지 않은 보존 적인 염기서열을 가지고 있었다. 그 중 A. vaviae의 178~197 bp 염기서열을 primer로 design하여 PCR을 실시한 결과 A. caviae 균주에서만 종특이적으로 생성되는 450 bp 정도 의 밴들르 얻을수 있었다.
본 연구는 한국산 양식 가물치에 큰 피해를 주는 출혈성 궤양증의 원인과 병리를 연구할 목적으로 수행되었다. 가물치의 출혈성 궤양증은 그 원인이 세균성이었고 궤양 및 장기로부터 분리된 Aeromonas veronii 가 주원인균이었다. A veronii 를 건강한 가물치의 피하에 인공 접종한 결과 양식 가물치에서 관찰된 병증과 유사한 궤양을 유발시켰다. 초기 증세는 주사부위를 중심으로 피부에 붉은 반점이 나타났고, 점차 확대되면서 피부가 탈락되고 출혈이 수반되었다. 곧이여 근육괴사가 진행되어 조사된 반대쪽에 구멍이 뚫렸다. $10^{5}$/CFU/0.25 ml 의 세균은 복강주사시 72시간이내에 시험개체의 50%가 치사되었다. 본 균은 cephalothin, chlorampenicol, gentamicin, tetracyline 등의 항생제에 감수성을 나타내었다.
Bacterial disease caused by Aeromonas are among the most common and troublesome diseases of fish raised in aquaculture systems. In this study, some strains identified as belonging to the Aeromonas were isolated from neon tetra (Hyphessobrycon herbertaxelrodi) skin and fin, as well as from water samples. VITEK system and API ZYM examination of the isolated strains were undertaken, and it seemed to correlate with the Aeromonas, proved to be Aeromonas veronii. The antibiotic susceptibility test of isolated strains to different groups of antibiotics was evaluated using the disc diffusion method. Cefixime was the most sensitive antibiotic.
Kim, Hyo Yeon;Jun, Jin Woo;Lim, Se Ra;Park, Seon Young;Han, Jee Eun;Park, Se Chang;Kim, Ji Hyung
대한수의학회지
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제59권4호
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pp.207-211
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2019
Mass mortality in commercially cultured Amur catfish (Silurus asotus), showing symptoms of dermal ulcerations, occurred on a private farm in Mar 2019 in Korea. β-hemolytic bacteria were isolated from the ulcers and kidneys of the fish and identified as Aeromonas veronii. The isolate was resistant to tetracycline and possessed cytotoxic heat-labile enterotoxin (aerolysin/hemolysin). We investigated the genetic determinants associated with tetracycline resistance, and the isolate has been confirmed to simultaneously possess tetA and tetE genes. This is the first report on the occurrence of tetracycline-resistant A. veronii infection related to mass mortality in commercially cultured Amur catfish in Korea.
An organic solvent- and bleach-stable protease-producing strain was isolated from a polluted river water sample and identified as Aeromonas veronii OB3 on the basis of biochemical properties (API 20E) and 16S rRNA sequence analysis. The strain was found to hyper-produce alkaline protease when cultivated on fish waste powder-based medium (HVSP, 4080 U/ml). The biochemical properties and compatibility of OB3 with several detergents and additives were studied. Maximum activity was observed at pH 9.0 and 60℃. The crude protease displayed outstanding stability to the investigated surfactants and oxidants, such as Tween 80, Triton X-100, and H2O2, and almost 36% residual activity when incubated with 1% SDS. Remarkably, the enzyme demonstrated considerable compatibility with commercial detergents, retaining more than 100% of its activity with Ariel and Tide (1 h, 40℃). Moreover, washing performance of Tide significantly improved by the supplementation of small amounts of OB3 crude protease. These properties suggest the potential use of this alkaline protease as a bio-additive in the detergent industry and other biotechnological processes such as peptide synthesis.
The detection of virulence factors of Aeromonas is a key component in determining potential pathogenicity because these factors act multifunctionally and multifactorially. In this study water samples were collected from a trout farm on a seasonal basis, and diseased fish and Aeromonas species were isolated and identified. For rapid detection of six virulence factors of isolated Aeromonas, a hexaplex-polymerase chain reaction (hexaplex-PCR) assay was used. The detected virulence factors include aerolysin (aer), GCAT (gcat), serine protease (ser), nuclease (nuc) lipase (lip) and lateral flagella (laf). The dominant strain found in our isolates was Aeromonas sobria, and the dominant virulence factors were aer and nuc for all seasons. We confirmed that A. sobria and two of the virulence genes (aer and nuc) are related. We proposed a method by which one can identify the major strains of Aeromonas: A. hydrophila, A. sobria, A. caviae, and A. veronii, using hexaplex-PCR.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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