Calli induced from the leaf segment of Bupleurum falcatum were cultured on Mu-rashige and Skoog's(MS) medium supplemented with 2, 4-D, IBA, IAA and NAA of 0.1 mg/l , The induction of adventitious roots from callus was the best in MS medium supplemented with 0.1 mg/l 2, 4-D and the lateral root was the same. The pretreatment of 0.1 mg/l 2, 4-D for 120 hours was most effective for the formation and grwoth of adventitious roots. The number of adventitious roots per micro callus pre-treated with 0.1 mg/l 2, 4- D was 5. 3 which was the highest level. The callus subcultured for 4 weeks were best for the adventitious root formation. The callus subcultured for more than 4 weeks decreased the adventitious root formation and turned to brown in color.
The patterns of adventitious root formation from cotyledons for each cultivar of soybeans were compared. The results of adventitious root formation in cultivars are classified as two groups; the first group showed the direct adventitious root formation, and the second group resulted in the callus and adventitious root formation. The cultivars that have much callus formation had less the adventitious root formation. The adventitious root formation in the cotyledonary explants was occured only at the inoculation of adaxial side. When adaxial and abaxial side was inoculated simultaneously, the adventitious roots were formed at the adaxial side. Thus, it suggests that there must be direction to some extent. Starch in the cotyledonary explants were more abundant at the 4 days after induction than at the early stage of the adventitious root formation, but the starch was not observed after 7 days, that the growth stage of adventitious roots.
The adventitious root of Panax ginseng C.A. Meyer is regarded as an efficient alternative to cell culture or hairy root culture for biomass production due to its fast growth and stable metabolite production. To determine optimal culture conditions for the bioreactor culture of ginseng roots, experiments have been conducted on physical and chemical factors such as bioreactor type, dissolved oxygen, gas supply, aeration, medium type, macro- and micro-elements, medium supplement during culture period, sucrose concentration, osmotic agents, medium pH and light. Elicitation is a key step to increase ginsenoside accumulation in the adventitious roots but biomass growth is severely inhibited by elicitor treatment. To obtain high ginsenoside content with avoiding biomass decrease, we applied two-stage bioreactor culture system. Ginseng adventitious roots were cultured for 40 days to maximize biomass increase followed by elicitation for 7 days to enhance ginsenoside accumulation. We also experimented on types and concentrations of jasmonate to determine optimal elicitation methods. In this paper, we discussed several factors affecting the root propagation and ginsenoside accumulation. Based on the results obtained from previous experiments we have established large-scale bioreactor system (1 ton-10 ton) for the efficient production of ginseng adventitious roots and bioactive compounds including ginsenoside. Still, experiments are on going in our laboratory to determine other bioactive compounds having effects on diet, high blood pressure, DPPH elimination and increasing memories.
Kwon, Soo Jeong;Han, Eun Ji;Moon, Young Ja;Cho, Gab Yeon;Woo, Sun Hee;Boo, Hee Ock;Koo, Jin-Woog;Kim, Hag Hyun
Proceedings of the Korean Society of Crop Science Conference
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2017.06a
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pp.171-171
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2017
Propagation by crown division in Platycodon grandiflorum is too slow for producing many plants in a short time although the plants are uniform. This study was performed to enhance the mass propagation for Platycodon grandiflorum containing yellow green petals via various medium compositions and the growth regulators. The nodes containing yellow green petals were used as materials to execute the study with a variety of MS medium concentrations. The 1/4MS medium showed the best development of adventitious root, while the 1/2MS medium exhibited the potential growth. The higher the concentration of sucrose showed the better development and growth of both shoots and adventitious roots. Many adventitious roots were developed at the controlled culture medium at pH 4.8 with a tendency of suppression with higher levels of pH. Also, the cultivated node and leaf explants with the treatments of simple and combined applications with auxin and cytokinin at the 1/4MS culture medium with adding 5% of sucrose were used to identify the influences of growth regulators. The regeneration of plantlets at the 234single application showed a good result with the addition of BA $1mg{\cdot}L^{-1}$ and the development and growth of adventitious roots appeared to be good at the addition of NAA $1mg{\cdot}L^{-1}$. For the combined applications, the regeneration of plantlets and the development of adventitious roots were prosperous at the combined applications with BA $0.1mg{\cdot}L^{-1}$ and IAA $0.5mg{\cdot}L^{-1}$. The addition of IAA for the leaf explants induced a number of plantlets that showed the potential regeneration, and the highest results was obtained from the combined applications of both BA $1mg{\cdot}L^{-1}$ and IAA $2.5mg{\cdot}L^{-1}$. In addition, the development of adventitious roots showed the satisfactory results at the combined application of both BA $1mg{\cdot}L^{-1}$ and IAA $0.5mg{\cdot}L^{-1}$.
Nitric oxide (NO) affects the growth and development of plants and also affects plant responses to various stresses. Because NO induces root differentiation, we examined whether or not it is involved in increased ROS generation. Treatments with sodium nitroprusside (SNP), an NO donor, 2-phenyl-4,4,5,5-tetramethylimidazoline-1-oxyl-3-oxide (PTIO), a specific NO scavenger, and $N{\omega}-nitro-{\text\tiny{L}}-arginine$ methyl ester hydrochloride (${\text\tiny{L}}-NAME$), an NO synthase (NOS) inhibitor, revealed that NO is involved in the adventitious root growth of mountain ginseng. Supply of an NO donor, SNP, activates NADPH oxidase activity, resulting in increased generation of $O_2{^{{\cdot}-}}$, which subsequently induces growth of adventitious roots. Moreover, treatment with diphenyliodonium chloride (DPI), an NADPH oxidase inhibitor, individually or with SNP, inhibited root growth, NADPH oxidase activity, and $O_2{^{{\cdot}-}}$ anion generation. Supply of the NO donor, SNP, did not induce any notable isoforms of enzymes; it did, however, increase the activity of pre-existing bands of NADPH oxidase, superoxide dismutase, catalase, peroxidase, ascorbate peroxidase, and glutathione reductase. Enhanced activity of antioxidant enzymes induced by SNP supply seems to be responsible for a low level of $H_2O_2$ in the adventitious roots of mountain ginseng. It was therefore concluded that NO-induced generation of $O_2{^{{\cdot}-}}$ by NADPH oxidase seems to have a role in adventitious root growth of mountain ginseng. The possible mechanism of NO involvement in $O_2{^{{\cdot}-}}$ generation through NADPH oxidase and subsequent root growth is discussed.
Park, Dong-Jin;Min, Ji-Yun;Kim, Yong-Duck;Kang, Seung-Mi;Jung, Ha-Na;Kang, Hoon-Serg;Choi, Myung-Suk
Korean Journal of Medicinal Crop Science
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v.13
no.5
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pp.237-241
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2005
Scopolamine and hyoscyamine are important anticholinergic compounds obtained from Hyoscyamus niger. Adventitious roots induced from rhizome of H. niger and roots were cultured in SH medium supplemented with 3% (w/v) sucrose and 0.5 mg/L IBA. Roots were grown rapidly after 10 days of cultures. Scopolamine production was increased 7 times and hyoscyamine production was increased 12 times after 10 day of cultures. SH medium was best in root growth. But, highest scopolamine productivity was observed in WPM medium, followed White medium and best hyoscyamine productivity was resulted in MS medium. Sucrose was increased scopolamine and hyoscyamine production were increased the medium supplemented by sucrose comparing to than those by other carbon sources.
Rhodiola sachalinensis is one of the most popular oriental medicines in East Asia. It is a perennial herb, belonging to the family Crassulaceae, which is mainly distributed in mountains at the altitudes of 1700-2500 m in Baek-Du mountain. Cultivation of this species for the production of medicine materials is not easy in nature, because of restrict habitats. In vitro production of roots can be applicable for the production of medicinal materials. Here, we investigated the optimal conditions for induction and proliferation of adventitious roots in in vitro culture system. Leaf, stem and root segments from R. sachalinensis were cultured on Murashige and Skoog(MS) medium supplemented with the various concentrations of IBA(Indole-3-butyric acid)(0.5, 1.0, 3.0, and 5.0 mg/L) and sucrose(10, 30, 50, and 100 g/L). The optimal explant for adventitious root induction was leaf segment. Induction of adventitious roots was highest on MS medium supplemented with 5.0 mg/L IBA and sucrose 30 g/L. In liquid culture, fresh weight of adventitious roots was highest(15.65 g) on 1/3 strength MS liquid medium supplemented with 5.0 mg/L IBA with 30 g/L sucrose. These results revealed the first attempt for the production of adventitious roots in R. sachalinensis.
Background: Panax ginseng Meyer is a traditional medicinal plant famous for its strong therapeutic effects and serves as an important herbal medicine. To understand and manipulate genes involved in secondary metabolic pathways including ginsenosides, transcriptome profiling of P. ginseng is essential. Methods: RNA-seq analysis of adventitious roots of two P. ginseng cultivars, Chunpoong (CP) and Cheongsun (CS), was performed using the Illumina HiSeq platform. After transcripts were assembled, expression profiling was performed. Results: Assemblies were generated from ~85 million and ~77 million high-quality reads from CP and CS cultivars, respectively. A total of 35,527 and 27,716 transcripts were obtained from the CP and CS assemblies, respectively. Annotation of the transcriptomes showed that approximately 90% of the transcripts had significant matches in public databases.We identified several candidate genes involved in ginsenoside biosynthesis. In addition, a large number of transcripts (17%) with different gene ontology designations were uniquely detected in adventitious roots compared to normal ginseng roots. Conclusion: This study will provide a comprehensive insight into the transcriptome of ginseng adventitious roots, and a way for successful transcriptome analysis and profiling of resource plants with less genomic information. The transcriptome profiling data generated in this study are available in our newly created adventitious root transcriptome database (http://im-crop.snu.ac.kr/transdb/index.php) for public use.
This study was carried out to detennine the optimal submerged culture conditions for the growth increase of ginseng adventitious roots containing germanium by means of a fractional factorial design with four factors and three levels, using the response surface methodology (RSM). The ginseng (Panax ginseng CA. Meyer) adventitious roots were induced by plant growth regulators and cultured in a liquid SH medium. The effects of various $GeO_2$ and phosphoric acid ($H_3P0_4$) concentrations in the medium, $GeO_2$ addition time and the pH of the medium on the fresh weight of the ginseng adventitious roots were investigated. The optimum pH of the medium and the phosphoric acid concentration detennined by the partial differentiation of the model equation were 4.7 and 6.0 roM, respectively. The predicted optimal $GeO_2$ concentration was 10 ppm and the $GeO_2$ addition time did not affect the growth of ginseng adventitious roots. Under these conditions, the growth of the ginseng adventitious root containing germanium was predicted to be 2.47 g.
With the purpose of improving ginsenoside content in adventitious root cultures of Korean wild ginseng (Panax ginseng Meyer), the roots were treated with different dosages of ${\gamma}$-ray (5, 10, 25, 50, 75, 100, and 200 Gy). The growth of adventitious roots was inhibited at over 100 Gy. The irradiated adventitious roots showed significant variation in the morphological parameters and crude saponin content at 50 to100 Gy. Therefore, four mutant cell lines out of the propagation of 35 cell lines treated with 50 Gy and 100 Gy were selected on the basis of phenotypic morphology and crude saponin contents relative to the wild type control. The contents of 7 major ginsenosides ($Rg_1$, Re, $Rb_1$, $Rb_2$, Rc, Rf, and Rd) were determined for cell lines 1 and 3 from 100 Gy and lines 2 and 4 from 50 Gy treatments. Cell line 2 showed more secondary roots, longer length and superior growth rate than the root controls in flasks and bioreactors. Cell line 1 showed larger average diameter and the growth rate in the bioreactor was comparable with that of the control but greater in the flask cultured roots. Cell lines 1 and 2, especially the former, showed much more ginsenoside contents than the control in flasks and bioreactors. Therefore, we chose cell line 1 for further study of ginsenoside contents. The crude saponin content of line 1 in flask and bioreactor cultures increased by 1.4 and 1.8-fold, respectively, compared to the control. Total contents of 7 ginsenoside types ($Rg_1$, Re, $Rb_1$, $Rb_2$, Rc, Rf, and Rd) increased by 1.8 and 2.3-fold, respectively compared to the control. Crude saponin and ginsenoside contents in the bioreactor culture increased by about 1.4-fold compared to that the flask culture.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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