Background: One of the major mechanisms for drug resistance is associated with altered anticancer drug transport, mediated by the human-adenosine triphosphate binding cassette (ABC) transporter superfamily proteins. The overexpression of adenosine triphosphate binding cassette, sub-family B, member 1 (ABCB1) by multidrug-resistant cancer cells is a serious impediment to chemotherapy. In our study we have studied the possibility that structural single-nucleotide polymorphisms (SNP) are the mechanism of ABCB1 overexpression. Materials and Methods: A total of 101 gastric cancer multidrug resistant cases and 100 controls were genotyped with sequence-specific primed PCR (SSP-PCR). Gene expression was evaluated for 70 multidrug resistant cases and 54 controls by real time PCR. The correlation between the two groups was based on secondary structures of RNA predicted by bioinformatics tool. Results: The results of genotyping showed that among 3 studied SNPs, rs28381943 and rs2032586 had significant differences between patient and control groups but there were no differences in the two groups for C3435T. The results of real time PCR showed over-expression of ABCB1 when we compared our data with each of the genotypes in average mode. Prediction of secondary structures in the existence of 2 related SNPs (rs28381943 and rs2032586) showed that the amount of ${\Delta}G$ for original mRNA is higher than the amount of ${\Delta}G$ for the two mentioned SNPs. Conclusions: We have observed that 2 of our studied SNPs (rs283821943 and rs2032586) may elevate the expression of ABCB1 gene, through increase in mRNA stability, while this was not the case for C3435T.
The purpose of this study was to set new guidelines for adenosine triphosphate (ATP) bioluminescence hygiene monitoring of distribution trays at children's foodservices. Five dietitians visited 223 foodservices (95 institutional, 128 small) to examine whether they adhered to the norms of 'Keeping distribution tray sanitary by washing/sanitizing' and 'Performing food distribution in a clean and appropriate way'. In this visit, dietitians swabbed 100 ㎠ area of the distribution trays twice, once for obtaining ATP measurements and the second time for Aerobic Plate Counts (APC) using 3M Petrifilm Plates. Chi-square test and ANOVA were applied using SPSS 23.0 software. SPSS 23.0 was used to conduct graphical and statistical analysis of the raw data of ATP measurements, which were further transformed by a Box-Cox transformation. The mean of APC from all the subjects inspected was 3.8×102±2,102.0 CFU/100 ㎠. A total of 208 (93.3%) trays were observed within the acceptable limits of APC (Pass<5.0×102 CFU/100 ㎠). APCs taken at institutional foodservices showed significantly lower levels (1.4×102±600.0 CFU/100 ㎠, P<0.01) compared to the small foodservices (5.5×102±2,718.7 CFU/100 ㎠). No significant differences were observed between the two groups in ATP measurements and in the performance rate of 2 checklist items. As against the 93.3% APC adequacy from the total subjected inspection, total ATP adequacy (Pass≤300 RLU/100 ㎠) was only 71.7%. Therefore, more practical guidelines should be prepared for the assessment of the hygiene of distribution trays. In the graphical and statistical analysis, levels below 250 RLU/100 ㎠ was considered 'Pass', while equal to or greater than 350 RLU/100 ㎠ was considered 'Fail' for distribution trays.
The present study was undertaken to assess the influence of dimethyl-sulfoxide plus sucrose solution as a cryoprotectant on the adenosine triphosphate (ATP) content, the ultrastructure and the embryonic development of bovine oocytes matured in vitro. We measured the amount of ATP in cumulus cells enclosed oocytes (CO) or denuded oocytes (DO) equilibrated with or removed from the cryoprotectant (1.5 M DMSO + 0.25 M sucrose + 20% fetal bovine serum in physiological saline). As a result, the ATP contents in both CO and DO, equilibrated with the cryoprotectant, were significantly lower (p<0.05) than that of the each control group. However, ATP content of DO was recovered to the level of the control group ailer removal of the cryoprotectant, but failed to restore for CO. In the observation of the ultrastructure by a transmission electron microscope, all of the mitochondria in the ooplasm of CO and DO equilibrated with the cryoprotectant were swollen with peripherally located cristae following decreased electron density. However, a large proportion of these swollen mitochondria were restored to the normal shape which can be observed usually in the control group after removal from the cryoprotectant. To the contrary, the morphology of many mitochondria of the cumulus cells in CO were not recovered to that of the control group after removal of the cryoprotectant. CO with removed cryoprotectant had significantly lower embryonic development up to the blastocysts stage (p<0.05) after in vitro fertilization compared with that in the control group. These results suggest that the addition and removal of a cryoprotectant has a negative effect for the ATP content of cumulus enclosed oocytes. One of the factor(s) causing the lower embryonic development after removal of cryoprotectant, may be associated with ATP metabolism.
It is well-known that electrical field stimulation (EFS)-induced contraction is mediated by a cholinergic mechanism and other neurotransmitters. NO, ATP, calcitonin gene-related peptide (CGRP), and substance P are released by EFS. To investigate the purinergic mechanism involved in the EFS-induced contraction, purinegic receptors antagonists were used. Suramine, a non-selective P2 receptor antagonist, reduced the contraction induced by EFS. NF023 ($10^{-7}{\sim}10^{-4}M$), a selective P2X antagonist, inhibited the contraction evoked by EFS. Reactive blue ($10^{-6}{\sim}10^{-4}M$), selective P2Y antagonist, also blocked the contraction in a dose-dependent manner. In addition, P2X agonist ${\alpha}$,${\beta}$-methylene 5'-adenosine triphosphate (${\alpha}{\beta}MeATP$, $10^{-7}{\sim}10^{-5}M$) potentiated EFS-induced contraction in a dose-dependent manner. P2Y agonist adenosine 5'-[${\beta}$-thio]diphosphate trilithium salt ($ADP{\beta}S$, $10^{-7}{\sim}10^{-5}M$) also potentiated EFS-induced contractions in a dose-dependent manner. Ecto-ATPase activator apyrase (5 and 10 U/ml) reduced EFS-induced contractions. Inversely, 6-N,$N$-diethyl-D-${\beta}$,${\gamma}$- dibromomethylene 5'-triphosphate triammonium (ARL 67156, $10^{-4}M$) increased EFS-induced contraction. These data suggest that endogenous ATP plays a role in EFS-induced contractions which are mediated through both P2X-receptors and P2Y-receptors stimulation in cat esophageal smooth muscle.
ATP 분비 경로는 담관세포종 세포주를 포함한 일부 세포의 RVD 조절에 있어서 주요한 조절 역할을 수행할 것으로 생각되나, 정상 담관세포의 RVD에 있어서의 역할은 잘 알려져 있지 않다. 정상 담관세포의 RVD에 있어서 세포 외 ATP와 ATP 경로의 역할을 알아보기 위하여, 정상마우스에서 담관세포를 분리하여 연구에 이용하였다. BDCCs의 크기 변화는 정량측정 비디오현미경을 이용하여 횡단면을 간접 측정하였다. 정상마우스의 BDCCs의 횡단면은 저장액에서 노출한 후 10분에 $1.20{\pm}0.02$ (n=20)이었으나, 40분에는 $1.06{\pm}0.03$로 감소하였다. ATP와 ATP 가수분해 효소인 아피라아제 또는 P2 수용체 차단제인 슈라민 RVD 과정 중에 처리 하였으나 처리하지 않은 대조군과 중요한 차이를 보이지 않았다. 더 나아가, PKC 저해제인 비신돌아마이드 I 과 Ro 31-8220을 처리하여 RVD에 미치는 영향을 알아 보았으나 대조군과 중요한 차이를 보이지 않았다. 이러한 결과들에서 정상 마우스 담관세포는 담관세포종 세포주와 다른 결과를 보였으며, 정상 마우스의 RVD에 있어서 ATP는 중요한 역할을 하지 않음을 알 수 있었다.
Park, Seul-Kee;Woo, Yang-Hee;Kim, Ho-Geun;Lee, Yong-Chan;Choi, Sung-Ho;Hyung, Woo-Jin;Noh, Sung-Hoon
Journal of Gastric Cancer
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제10권4호
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pp.155-161
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2010
Purpose: The purpose of this study was to investigate the reliability and the clinical applicability of the adenosine-triphosphate-based chemotherapy response assay (ATP-CRA) as a method of determining in vitro chemosensitivity in patients with gastric cancer. Materials and Methods: A total of 243 gastric cancer tissue samples were obtained from gastrectomies performed between February 2007 and January 2010. We evaluated the effectiveness of the ATP-CRA assay in determining the chemosensitivity of gastric cancer specimens using eleven chemotherapeutic agents - etoposide, doxorubicin, epirubicin, mytomicin, 5-fluorouracil, oxaliplatin, irinotecan, docetaxel, paclitaxel, methotraxate, and cisplatin - for chemosensitivity studies using ATP-CRA. We assessed the failure rate, the cell death rate, and the chemosensitivity index. Results: The failure rate of ATP-CRA was 1.6% (4/243). The mean coefficient of variation for triplicate ATP measurements was 6.5%. Etoposide showed the highest cell death rate (35.9%) while methotrexate showed the lowest (16.6%). The most active chemotherapeutic agent was etoposide, which most frequently ranked highest in the chemosensitivity test: 31.9% (51/160). Oxaliplatin was more active against early gastric cancers than advanced gastric cancers, whereas docetaxel was more active against advanced cancers. The lymph node negative group showed a significantly higher cell death rate than the lymph node positive group when treated with doxorubicin, epirubicin, and mitomycin. Conclusions: ATP-CRA is a stable and clinically applicable in vitro chemosensitivity test with a low failure rate. The clinical usefulness of ATP-CRA should be evaluated by prospective studies comparing the regimen guided by ATP-CRA with an empirical regimen.
Schizandrae Fructus has been used for controlling respiratory allergic or inflammatory diseases in folk medicine and their components, schizandrin, schizandrin-A and gomisin-A were reported to have diverse biological effects. In this study, we investigated whether schizandrin, schizandrin-A and gomisin-A affect adenosine triphosphate (ATP)-induced mucin secretion from cultured airway epithelial cells. Confluent primary hamster tracheal surface epithelial (HTSE) cells were metabolically radio labeled using $^{3}H-glucosamine$ for 24 h and chased for 30 min in the presence of varying concentrations of each agent to assess the effects on $^{3}H-mucin$ secretion. The results were as follows: 1) schizandrin significantly inhibited ATP-induced mucin secretion; 2) However, schizandrin-A and gomisin-A did not affect ATP-induced mucin secretion, significantly. We conclude that schizandrin can inhibit ATP-induced mucin secretion by directly acting on airway mucin-secreting cells. Therefore, schizandrin should further be investigated for the possible use as mucoregulators in the treatment of inflammatory airway diseases.
Angelicae Dahiricae Radix has been used for controlling inflammatory respiratory diseases in oriental medicine and their components, phellopterin, isoimperatorin and byakangelicol were reported to have various biological effects. In this study, we investigated whether phellopterin, isoimperatorin and byakangelicol affect adenosine triphosphate(ATP)-induced mucin secretion from cultured airway epithelial cells. Confluent primary hamster tracheal surface epithelial(HTSE) cells were metabolically radiolabeled using $^3H$-glucosamine for 24 h and chased for 30 min in the presence of varying concentrations of each agent to assess the effects on $^3H$-mucin secretion. The results were as follows: 1) phellopterin significantly inhibited ATP-induced mucin secretion; 2) However, isoimperatorin and byakangelicol did not affect ATP-induced mucin secretion, significantly. This result suggests that phellopterin can regulate 'mucin secretion induced by ATP'-a phenomenon simulating mucus overproduction from inflamed airway epithelial cells-by directly acting on airway mucin-secreting cells. Therefore, phellopterin should further be investigated for the possible use as mucoregulators in the treatment of inflammatory airway diseases.
Angelicae Koreanae Radix has been used for controlling inflammatory respiratory diseases in folk medicine and their components, imperatorin, marmesinin and oxypeucedanin were reported to have diverse biological effects. In this study, we investigated whether imperatorin, marmesinin and oxypeucedanin affect adenosine triphosphate(ATP)-induced mucin secretion from cultured airway epithelial cells. Confluent primary hamster tracheal surface epithelial(HTSE) cells were metabolically radiolabeled using $^3H$-glucosamine for 24 h and chased for 30 min in the presence of varying concentrations of each agent to assess the effects on $^3H$-mucin secretion. The results were as follows: 1) imperatorin significantly inhibited ATP-induced mucin secretion; 2) However, marmesinin and oxypeucedanin did not affect ATP-induced mucin secretion, significantly. We conclude that imperatorin might inhibit ATP-induced mucin secretion by directly acting on airway mucin-secreting cells. Therefore, imperatorin should further be investigated for the possible use as mucoregulators in the treatment of inflammatory airway diseases.
본 연구에서는 와편모조류 Alexandrium affine(LIMS-PS-2345)의 생장에 미치는 용존태 무기 및 유기 영양염의 영향을 조사하였다. 영양염 흡수 동력학 실험에서 A. affine의 최대흡수속도(ρmax)와 반포화상수(Ks)는 질산염에서 77.0 pmol/cell/hr과 17.6 μM, 인산염에서 15.5 pmol/cell/hr과 3.88 μM로 산출되어, 무기영양염에 대하여 높은 요구량 및 낮은 친화성을 가지고 있는 것으로 나타났다. 유기 영양염에 따른 A. affine의 생장속도를 확인한 결과, 유기 질소 urea, glycine와 유기 인 adenosine triphosphate(ATP), glycerol phosphate(Glycerol-P) 첨가구에서 무기 영양염 첨가구의 70 % 이상 생장속도를 보였다. 따라서 낮은 무기 영양염 환경에서 A. affine의 우점화와 종간경쟁에서 우위를 위해서는 용존태 유기 영양염의 이용이 필요할 것으로 생각된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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