본 연구는 화장품 소재로서 우슬(Achyranthes japonica Nakai)의 가능성을 확인하기 위한 것이다. 우슬 추출물이 가지고 있는 항산화, 항염증, 항주름 효과를 측정하였다. 각각의 식물 재료는 70% 에탄올을 이용하여 우슬 뿌리(Achyranthes japonica Nakai roots, AJNR)와 우슬 줄기(Achyranthes japonica Nakai stalks, AJNS)로부터 추출하였다. RAW 264.7 세포를 배양하여 추출물의 Nitric oxide assay를 진행하였고, 섬유아세포 CCD-986sk를 배양하여 추출물의 MMP-1 assay, Type I procollagen synthesis assay를 실시하였다. 이 연구의 결과, 항산화 활성은 우슬 뿌리와 우슬 줄기 모두 우수하였고, 뿌리는 함염증 효과가 월등하게 우수하였으며 줄기는 뿌리에 비해 MMP-1 저해 활성과 Type I procollagen 합성 효과가 조금 더 높았다. 이 연구의 결과, 우슬 뿌리와 우슬 줄기의 항산화 활성은 유사한 수준으로 우수하였고, 뿌리의 항염 활성은 줄기보다 월등하게 높았다. MMP-1 저해 활성과 Type I procollagen 합성 효과는 대체적으로 우수하였는데 줄기가 뿌리에 비해 가 조금 더 뛰어났다. 그러므로 우슬은 항산화, 항염증, 항주름의 활성을 갖는 기능성 화장품 소재로서 활용이 가능할 것으로 판단된다.
Scrophularia ningpoensis hemsl has been traditionally used in China and Vietnam for treatment of bacteria, atopy, pimple, tonsillitis, angina and encephalitis for a long time. The main objectives of this study were to evaluate the antibacterial activity of the Scrophularia ningpoensis hemsl extract on biofilm formation of Klebsiella pneumoniae. Antibacterial activity was conducted using disc diffusion assay and minimum inhibitory concentration (MIC), and minimum bactericidal concentration (MBC) were determined using the broth micro dilution method in accordance to Clinical and Laboratory Standards Institute guidelines(CLSI). Furthermore, cytotoxicity on L929 were assessed using animal cell culture for the proliferation test(MTT cell assay) and the biofilm forming capacity of the K. pneumoniae were determined using the colony forming unit (CFU) assay. The extract exhibited considerable antibacterial activity. K. pneumoniae was susceptible to the extract with the MIC and MBC of 0.1875 and $1.5mg/m{\ell}$ respectively. Cytoxicity test in L929 showed no sign of toxicity at the concentration of $0.75mg/m{\ell}$ and at the same concentration the extract caused inhibition of bacterial biofilm formation. The extract of Scrophularia ningpoensis hemsl possesses an in vitro antibacterial antibiofilm activities against K. pneumoniae, with no sign of cytoxicity on L929.
1. L. acidophilus 성장(成長)을 본 결과 접종후 12시간에 가장 높은 생균수(生菌數)를 측정(測定)하였다. 2. 우유배지(牛乳培地)에서 성장(成長)한 L. acidophilus와 Tomato Juice의 것과 비교할 때 Tomato Juice에서 성장(成長)한 균(菌)이 굵게 보였다. 3. 항생효과(抗生效果)의 분석(分析)은 (1) Well 방법(方法)에서 Acidophilus Tomato Juice의 Acidophilus milk 보다 더 강(强)한 항생대(抗生帶)를 보였다. (2) 디스크 방법(方法)에서 Shigella dysenteriae 병원균(病原菌)에 대하여 가장 강한 항생대(抗生帶)를 보였으며 그외 다른 병원성(病源性)에 대하여서도 모두 항생작용(抗生作用)을 보였다. 4. Sephadex G-50 Gel여과 크로마토그라피의 제 5번째 분류(分溜)가 항생효과(抗生效果)를 가장 크게 나타냈다. 5. UV 흡광 스펙트라에서 약 270nm에서 최고 피크를 보였다.
Pancreatin is a enzyme mixture breaking down carbohydrates, proteins and lipids. Most pancreatin used in Korea is imported from foreign countries. However, guideline of each country for pancreatin produced from each country is different. Therefore, guideline for pancreatin imported from several countries, such as Europe, Japan and America, it is standardized to control its quality. Assay of enzyme activity for pancreatin in KP is similar to tat in JP, but it is significantly different from those in FP ad in USP. We measured pancreatin digestive activities of 17 commercial products. Activity assay of digestive enzymes, starch- and lipid-digestive enzymes, for pancreatin by KP method (including JP) was difficult compared to those by FIP ad USP methods. Particularly, activity assays of starch- and lipid-digestive enzymes by KP method were mistakable, ad varied in diluted samples than those by FIP. However, activity assay of protein-digestive enzyme by KP method was similar to that by FIP. Starch-digestive enzyme activities of 17 commercial pancreatins by KP method were lower 0.079-fold compared to those by FIP method. Their protein-digestive enzyme activities by KP method were higher 75.7-fold than those by FIP method. Their lipid-digestive enzyme activities by KP method were lower 0.234-fold compared to those by FIP method.
Staphylococcus aureus causes a broad variety of diseases. The spread of multidrug-resistant S. aureus highlights the need to develop new ways to combat S. aureus infections. Sortase A (SrtA) can anchor proteins containing LPXTG binding motifs to the bacteria surface and plays a key role in S. aureus infections, making it a promising antivirulence target. In the present study, we used a SrtA activity inhibition assay to discover that isovitexin, a Chinese herbal product, can inhibit SrtA activity with an $IC_{50}$ of $28.98{\mu}g/ml$. Using a fibrinogen-binding assay and a biofilm formation assay, we indirectly proved the SrtA inhibitory activity of isovitexin. Additionally, isovitexin treatment decreased the amount of staphylococcal protein A (SpA) on the surface of the cells. These data suggest that isovitexin has the potential to be an anti-infective drug against S. aureus via the inhibition of sortase activity.
Background: To investigate the influence of telomerase activity, apoptosis, radiosensitivity of cervical cancer after siRNA-mediated knockdown of telomerase RNA and evaluate in vivo growth with gene interference. Methods: We studied siRNA-targeting-telomerase RNA transfection into the Hela cell line. Expression of hTERC mRNA was detected by RT-PCR and telomerase activity was measured by the TRAP assay. Growth inhibition was determined by MTT assay and radiosensitivity of the cervical cancer cells was examined by colony formation assay. In addtion, effects of hTERC inhibition in vivo were studied by injection of siRNA-transfected Hela cells into nude mice. Results: The hTERC siRNA effectively downregulated the expression of hTERC mRNA and also reduced the telomerase activity to 30% of the untreated control vlaue. The viability of hTERC siRNA transfected Hela cells was reduced by 44.7% after transfection. After radiation treatment, the radiosensitivity of Hela cells with hTERC knockdown was increased. In vivo, the tumors developing from the hTERC siRNA-transfected cells were of reduced size, indicating that the hTERT siRNA also depressed the tumorigenic potential of the Hela cells. Conclusions: Our results supported the concept of siRNA-mediated inhibition of telomerase mRNA which could inhibit the expression of hTERC and telomerase activity. Furthermore, radiosensitivity was upregulated after knockdown the hTERC in vivo and in vitro.
NADPH-cytochrome P450 reductase (CPR) transfers electrons from NADPH to cytochrome P450, and catalyzes the one-electron reduction of many drugs and foreign compounds. Various forms of spectrophotometric titration have been performed to investigate the electron-accepting properties of CPR, particularly, to examine its ability to reduce cytochrome c and ferricyanide. In this study, the reduction of 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) by CPR was assessed as a means of monitoring CPR activity. The principle advantage of DPPH is that its reduction can be assayed directly in the reaction medium by a continuous spectrophotometry. Thus, electrons released from NADPH by CPR were transferred to DPPH, and DPPH reduction was then followed spectrophotometrically by measuring $A_{520}$ reduction. Optimal assay concentrations of DPPH, CPR, potassium phosphate buffer, and NADPH were first established. DPPH reduction activity was found to depend upon the strength of the buffer used, which was optimal at 100 mM potassium phosphate and pH 7.6. The extinction coefficient of DPPH was $4.09\;mM^{-1}\;cm^{-1}$. DPPH reduction followed classical Michaelis-Menten kinetics ($K_m\;=\;28\;{\mu}M$, $K_{cat}\;=\;1690\;min^{-1}$). This method uses readily available materials, and has the additional advantages of being rapid and inexpensive.
To examine the effect of TBMS1on breast cancer metastasis, and investigate the potential mechanism by which Tubeimoside-1 (TBMS1) inhibits the CXCR4 expression in breast cancer cells. The expression of CXCR4 in breast cancer cell lines was determined by immunoblotting and real-time PCR. The effect of TBMS1 on NF-κB binding activity was evaluated by EMSA assay and ChIP analysis. Cell proliferation and invasion were analyzed by MTT assay and transwell invasion assay, respectively. The effect of TBMS1 on breast cancer metastasis was further evaluated in a metastasis model of nude mice. TBMS1 suppressed the expression of CXCR4 through inhibition of NF-κB binding activity. TBMS1 inhibited CXCL12-induced invasion in breast cancer cells, while ectopic expression of CXCR4 abolished the inhibitive activity of TBMS1. TBMS1 suppressed breast cancer metastasis in the metastatic model of nude mice. TBMS1 suppressed the CXCR4-mediated metastasis of breast cancer by inhibiting NF-κB binding activity.
Kim, Young-So;Eo, Seong-Kug;Oh, Ki-Wan;Lee, Chong-Kil;Lee, Young-Nam;Han, Seong-Sun
Mycobiology
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제29권1호
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pp.11-14
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2001
A preparation of water soluble components(EA) was made from carpophores of Elfvingia applanata(Pers.) Karst and its in vitro antibacterial activity on a number of bacterial species was examined by macrobroth dilution assay. Among 16 species of bacteria tested, the most potent antibacterial activity was observed against Staphylococcus epiderrnidis and Proteus vulgaris, of which MICs were 1.25 mg/ml. To investigate the antibacterial effects in combinations of EA with quinolone antibiotics, such as ciprofloxacin, enoxacin, lomefloxacin, norfloxacin, and ofloxacin, the fractional inhibitory concentrations(FICs) and the fractional inhibitory concentration indices(FICIs) for four bacterial strains were determined by macrobroth dilution checkerboard assay. Combinations of EA and quinolones exhibited either additive or indifferent effects of antibacterial activity in most instances. However, both synergistic and antagonistic effects were not observed in any cases.
The present study was investigated on in vitro anti-obesity effect of 4-hydroxybenzyl alcohol from Cudrania tricuspidata. We isolated various compounds from Cudrania tricuspidata. Among these compounds, anti-obesity effects of 4-hydroxybenzyl alcohol was examined by lipase activity assay, cyclic adenosine monophosphate (cAMP)-specific phosphodiesterase type IV (PDE4) activity assay, and citrate synthase activity assay. 4-hydroxybenzyl alcohol and Cudrania tricuspidata extracts inhibited the enzymatic activities of lipase, PDE4, and citrate synthase. Lipase is known to mediate the hydrolysis of triacylglycerol in adipose tissue and cholesterol esters in other tissue or cells. Also, PDE4 hydrolyses cAMP, a crucial secondary messenger for in metabolic pathways including glucose and lipid metabolism, lipolysis, and thermogenic function. 4-hydroxybenzyl alcohol and Cudrania tricuspidata extracts induced the inhibitory effect against each enzymatic activity on several specific substrates as observed by detection at 405 or 412 nm. These findings might be attributable to the inhibition of adipogenesis, and partial prevention of obesity. In conclusion, these results show that 4-hydroxybenzyl alcohol and Cudrania tricuspidata may be a critical candidate as a natural anti-obesity source.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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