천연 자원은 지금까지도 여러 치료제의 선도물질로서 개발되어 제약 산업 뿐만 아니라 식품 및 화장품 사업에 소중한 자원으로 이용되어 왔다. 따라서 본 연구는 청도에서 생산되는 청도반시를 이용하여 반시의 과육부분과 시체를 이용하여 의약품, 식품 및 화장품 소재로서 가능성을 찾아보고자 하였다. 전자공여능을 측정한 결과 시체의 에탄올 추출물은 500 ${\mu}g/mL$에서 91% 이상의 전자공여능을 나타내어 감 에탄올 추출물 40% 보다 우수하였고, SOD 유사활성능은 시체의 추출물이 1,000 ${\mu}g/mL$에서 22% 이하의 유사활성능을 나타내었다. 항염증 효과를 관찰하기 위하여 각질형성세포에 대한 감 및 시체의 세포생존율을 조사하여 생존율에 영향을 미치지 않는 5, 10, 25, 50 ${\mu}g/mL$농도에서 실험을 진행하였다. HaCaT세포에 LPS를 처리한 결과, 감의 시체 추출물이 LPS로 유도되어야 할 NO의 생성량과 iNOS, COX-2의 발현을 크게 저해하였고, 또한 염증성 사이토카인인 IL-$1{\beta}$, IL-6, TNF-${\alpha}$의 생성량도 크게 감소하였다. 이러한 결과로 보아 감의 시체 추출물은 염증성 질환의 치료에 활용될 수 있음을 시사한다.
Atrial natriuretic peptide (ANP)의 혈압조절에 대한 효과를 구명하기 위하여 2-kidney, 1-clip 흰쥐의 고혈압 발생에 미치는 ANP의 영향을 조사하였다. 실험군은 왼쪽 신동맥에 clip을 끼우고 경정맥내에 지속적으로 ANP를 주입한(atriopeptin III, 500 ng/h) 군으로 하였으며, 대조군은 clip을 끼웠으나 ANP를 주입하지 않은 군으로 하였다. Clip을 끼우기 전과 clip을 끼운 제 4,7,10일에 꼬리동맥으로부터 혈압을 측정한 후 단두하여 혈액을 채취하고 양측 신장을 떼어내어 renin 치를 구하였다. ANP 주입군은 대조군에 비하여 고혈압의 발생이 약화되었고 혈장 renin활성도가 유의하게 낮았으나 신피질 renin함량은 양군간에 유의한 차이가 없었다. 한편 clip을 끼우지 않은 흰쥐에서는 ANP 주입군과 비주입군간에 혈압, 혈장 renin 활성도와 신피질 renin 함량 등이 모두 서로 유의한 차이를 보이지 않았다. 이상의 실험결과는 지속적 ANP 주입이 2-K, 1-C 흰쥐의 고혈압 발생을 방지하지는 못하였으나 약화시켰음을 보여주었으며, ANP는 적어도 부분적으로는 renin-angiotensin계를 길항하므로써 장기적 혈압 조절에 관여하는 것이 시사되었다.
The purpose of the present study is to determine whether Schisandra chinensis (SC) has a protective effect on high fat diet (HFD)-induced fatty liver including hepatic lipid accumulation in rats. The HFD-induced obese rats were weighed after SC extracts were administered through the gastrointestinal tract at a concentration of 250 mg/kg b.w/day for 5 weeks. After 5 weeks, all of the rats on a high fat-diet were 36.5% heavier compared with normal controls. In contrast, rats on a high-fat diet supplemented with SC were 23.5% lighter than rats fed only a high-fat diet. Although there was no significant difference in food intake among the groups during the experimental diet period, the body weight gain of the SC group was significantly lower than the weights of the HFD groups. SC treatment slightly decreased the liver weight. Reduction of hepatic TBARS contents by SC was observed in rats fed a diet containing SC, and antioxidant activity was markedly increased in HFD+SC group compared to those of HFD group in liver. Moreover, total-lipid and triglyceride contents in the liver of groups fed a diet containing SC were significantly lower compared to those of the HFD group. High fat feeding elevated liver cholesterol concentration, but the addition of SC to the HFD rats resulted in the significant decrease in liver cholesterol. In histological observation of liver tissues, the hepatocytes of HFD rats showed a typical fatty liver morphology showing numerous lipid droplets in cytoplasm, whereas administration of SC reduced the size and numbers of lipid droplets. These results clearly demonstrated the attenuation of SC on nonalcoholic fatty liver induced by obese rats fed HFD.
그람 양성세균에서 PyrR단백질에 의하여 피리미딘의 생합성이 조절된다는 발견을 바탕으로 하여, Synechocystis sp.PCC6803과 Haemophilus influenzae의 PyrR orthologue 유전자를 Bacillus subtilis에서 형질전환 시켜 피리미딘 생합성의 조절 유무를 조사하였다. Synechocystis sp.PCC6803과 H. influenzae의 PyrR orthologue유전자를 pUC19과 T-vector에 클로닝 한후 pKH1, pKH2, pHPSK1, pHPSK2으로 각각 명명하였다. 이것을 다시 Escherichia. coli와 B. subtiius용 shuttle vector인 pHPS9에 클로닝 하여 pKH3, pKH4, pHPSK3, pHPSK4로 각각 명명하였다. B. subtilis DB104Δ PyrR에 pKH3, pKH4, pHPSK3, pHPSK4을 형질전환후 ATCase 활성을 측정결과 pHPSK3을 가진 균주만 피리미딘에 의한 조절작용이 일어난다는 사실을 통하여, H. influenzae의 PyrR orthologue 유전자의 선도 부분에 조절에 관여하는 미지의 부분이 있음을 예측할 수 있었다. 서로 다른 유래의 PyrR orthologue단백질을 정제하기 위하여 pET14b에 클로닝후 pKH5, pHPSK5으로 각각 명명하였다. SDS-PAGE로 분석한 결과 각각 약 18 kDa과 21 kDa의 분자량을 나타내었다. 정제된 PyrR orthologue 단백질의 UPRTase 활성을 측정한 결과 H. infuenzae의 PyrR orthologue 단백질은 UPRTase 활성을 나타내었으며 다양한 pH에서 측정한 결과 pH 5에서 가장 높은 활성을 나타내었다. 반면에, Synechocystis sp. PCC6803의 PyrR orhologue 단백질은 UPRTase 활성을 나타내지 않았다. 여러 가지 균주의 PyrR 아미노산 서열을 비교한 계통수 분석은 PyrR 단백질의 조절기작과 어느 정도 연관됨을 시사해 주었다.
Jung, Yoon Yang;Nam, Yunsung;Park, Yong Seol;Lee, Ho Sung;Hong, Soon Auck;Kim, Beom Keun;Park, Eon Sub;Chung, Yoon Hee;Jeong, Ji Hoon
The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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제17권3호
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pp.209-216
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2013
Soybean polyunsaturated phosphatidylcholine (PC) is thought to exert anti-inflammatory activities and has potent effects in attenuating acute renal failure and liver dysfunction. The aim of this study was to investigate the effects of PC in protecting multiple organ injury (MOI) from lipopolysaccharide (LPS). Six groups of rats (N=8) were used in this study. Three groups acted as controls and received only saline, hydrocortisone (HC, 6 mg/kg, i.v.) or PC (600 mg/kg, i.p.) without LPS (15 mg/kg, i.p.) injections. Other 3 groups, as the test groups, were administered saline, HC or PC in the presence of LPS. Six hours after the LPS injection, blood and organs (lung, liver and kidney) were collected from each group to measure inflammatory cytokines and perform histopathology and myeloperoxidase (MPO) assessment. Serum cytokines (TNF-${\alpha}$, IL-6 and IL-10) and MPO activities were significantly increased, and significant histopathological changes in the organs were observed by LPS challenge. These findings were significantly attenuated by PC or HC. The treatment with PC or HC resulted in a significant attenuation on the increase in serum levels of TNF-${\alpha}$ and IL-6, pro-inflammatory cytokines, while neither PC nor HC significantly attenuated serum levels of IL-10, anti-inflammatory cytokine. In the organs, the enhanced infiltration of neutrophils and expression of ED2 positive macrophage were attenuated by PC or HC. Inductions of MPO activity were also significantly attenuated by PC or HC. From the findings, we suggest that PC may be a functional material for its use as an anti-inflammatory agent.
본 연구에서, 비발효(ARE) 및 발효(ARE-F) 배초향 잎 열수 추출물의 피부 항산화 및 항염증 효능을 비교함으로써 프로바이오틱 발효의 효과를 검토하였다. ARE-F는 Lactobacillus rhamnosus HK-9 발효에 의하여 ARE로부터 제조되었다. In vitro 항염증 효능은 지질다당류(LPS)에 의하여 자극된 HaCaT 각질세포에서 일산화질소(NO), 활성산소종(ROS) 및 유도형 일산화질소합성효소(iNOS) 분석에 의하여 평가되었다. In vitro antiradical 활성은 2,2-diphenyl-2-picrylhydrazyl radical (DPPH) 소거 측정법에 의하여 평가되었다. LPS 자극에 의하여 증가된 NO, ROS 및 iNOS 수준에 미치는 ARE-F의 감소효과가 ARE에 의한 효과보다 현저히 강하였다. 그러나, ARE와 ARE-F의 DPPH 소거 효능에는 차이가 발견되지 않았다. ARE-F가 증강된 피부 항산화 및 항염증 효능을 갖고 있는데, 이 결과는 프로바이틱세균 발효가 배초향 잎의 일부 약리학적 효능을 증가시키는 효과적인 방법일 수 있음을 암시해 주고 있다. 요약하면, 배초향 잎 추출물의 피부항산화 및 항염증 활성이 프로바이오틱 세균인 L. rhamnosus HK-9에 의한 발효에 의하여 증강한다.
Loganin은 Corni fructus의 주요 iridoid glycoside이며 항염증, 항당뇨 그리고 뇌신경보호 효과 등이 보고되었다. 본 연구에서는 ${\alpha}-MSH$와 IBMX처리된 B16F10세포에서 loganin의 melanogenesis억제효과의 신호전달 경로를 조사하였다. Loganin의 미백 활성을 확인하기 위해 B16F10세포에서 $1{\mu}m$에서 $20{\mu}m$사이의 농도를 처리하여 세포독성 실험을 수행한 결과 최대 $20{\mu}m$농도에서 독성을 나타내지 않았다. 또한 loganin은 ${\alpha}-MSH$와 IBMX처리된 B16F10세포에서 농도-의존적으로 멜라닌 생성을 감소시키는 것을 확인하였다. 또한 loganin의 멜라닌 생성을 억제하는 신호전달 경로를 Western blotting을 실시하여 조사하였다. Western blot결과에 따르면 loganin은 ${\alpha}-MSH$와 IBMX 처리된 B16F10세포에서 증가된 CREB인산화(Ser133)와 MITF 발현 및 tyrosinase의 유전자 발현을 감소시켰고 ERK의 인산화를 증가시켜 melanin 생성을 억제하였다. 결론적으로 loganin은 ${\alpha}-MSH$와 IBMX에 의해 유도된 과도한 멜라닌 합성을 CREB인산화와 MITF 및 tyrosinase의 유전자 발현을 억제하고 ERK의 활성화를 통해 멜라닌 합성을 감소됨을 확인하였다. 따라서 loganin은 과색소 침착과 관련된 피부질환의 보호제로서 활용될 가능성을 가지는 것으로 사료된다.
Objectives : Smilacis glabrae rhizoma (SG) has been traditionally used as a herbal medication of musculoskeletal disorders like arthritis, pain, convulsions, and syphilis in traditional Korean medicine. This study was investigated anti-oxidative and anti-inflammatory effect of fractionated extracts of Smilacis Glabrae Rhizoma in Human Umbilical Vein Endothelial Cell (HUVEC). Methods : SG extract prepared with methanol, and then fractionated with hexane, dichloromethane, ethylacetate, n-butanol and water. Inhibitory effect of SG onto free radical generation was determined by measuring DPPH, superoxide anions and nitric oxide scavenging activities in vitro. Cytotoxic activity of extracts on RAW 264.7 cells was measured using 5-(3-caroboxymethoxyphenyl)-2H-tetra-zolium inner salt (MTS) assay. Intracelluar oxidation was analysed by DCF-DA assay. The nitric oxide (NO) production was measured by Griess reagent system. The levels of ICAM-1 and VCAM-1 expression were confirmed by western blot. And proinflammatory cytokines were measured by ELISA kit. Results : Our results indicated that fractionated extracts, especially ethyl acetate (EA) extract, significantly inhibited free radical generation, the TNF-$\alpha$-induced intracellular oxidation. Furthermore, the EA extract protected TNF-$\alpha$-induced adhesion to THP-1, expression of adhesion molecules accompanied by an attenuation of IL-6 and IL-8 formation in HUVEC. Conclusions : These results indicate that EA extract of SG have potential as an agent of atherosclerosis and other chronic inflammatory diseases including diabetes, hypertension, and arthritis.
Min-Kyu Kim;Sang-Hyun Han;Tae-Geun Park;Soo-Hyun Song;Ja-Youl Lee;You-Soub Lee;Seo-Yeong Yoo;Xin-Zi Chi;Eung-Gook Kim;Ju-Won Jang;Dae Sik Lim;Andre J. van Wijnen;Jung-Won Lee;Suk-Chul Bae
Molecules and Cells
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제46권10호
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pp.592-610
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2023
The Hippo kinase cascade functions as a central hub that relays input from the "outside world" of the cell and translates it into specific cellular responses by regulating the activity of Yes-associated protein 1 (YAP1). How Hippo translates input from the extracellular signals into specific intracellular responses remains unclear. Here, we show that transforming growth factor β (TGFβ)-activated TAK1 activates LATS1/2, which then phosphorylates YAP1. Phosphorylated YAP1 (p-YAP1) associates with RUNX3, but not with TEAD4, to form a TGFβ-stimulated restriction (R)-point-associated complex which activates target chromatin loci in the nucleus. Soon after, p-YAP1 is exported to the cytoplasm. Attenuation of TGFβ signaling results in re-localization of unphosphorylated YAP1 to the nucleus, where it forms a YAP1/TEAD4/SMAD3/AP1/p300 complex. The TGFβ-stimulated spatiotemporal dynamics of YAP1 are abrogated in many cancer cells. These results identify a new pathway that integrates TGFβ signals and the Hippo pathway (TGFβ→TAK1→LATS1/2→YAP1 cascade) with a novel dynamic nuclear role for p-YAP1.
목 적 : E. coli 패혈성 폐가 유도된 신생자돈에서 Nitric oxide(NO) 가스 흡입요법이 혈역학, 가스교환 및 폐 염증 소견에 미치는 영향을 알아보고자 본 연구를 실시하였다. 방 법 : 23마리의 신생자돈에서 도관 삽입과 기도 삽관을 시행하여 기계적 가스 인공환기를 시키면서 CON군(n=6)은 생리적 식염수 5 mL, PCON(n=9) 및 PNO(n=8) 군은 Escherichia coli strain $69{\times}10^9cfu$(10 mL)를 투여한 후 time-cycled pressure-limited 인공환기기로 PIP 30 $cmH_2O$, 호흡수 분당 30회, $FiO_2$ 1.0, PEEP 4 $cmH_2O$의 설정에서 6시간 동안 유지하였다. PNO군에서는 NO 10 ppm을 E. coli 투여 후부터 실험 종료 시까지 기도 내로 투여하였다. 모든 신생자돈에서 가스교환, 혈역학, 폐기능 지수들을 1시간 간격으로 측정하였고 실험 종료후 폐 조직을 얻어 염증반응 정도 지표인 myeloperoxidase 활성을 측정하였다. 결 과 : E. coli가 기도 내로 투여된 PCON 및 PNO군 모두에서 실험 종료시 E. coli 패혈증이 발생하였다. PCON군에서는 시간에 따라 진행되는 폐동맥 고혈압, 저산소혈증, 고탄산혈증, 및 폐 내 단락과 폐 내 사강의 비율의 증가를 보였고 대조군에서는 실험 종료시까지 의미 있는 변화를 보이지 않았다. NO가 투여된 PNO군에서 폐동맥 고혈압이 감소되지 않았으나 폐 내 단락의 의미 있는 개선과 폐 내 사강 비율 증가의 일부 감소에 기인한 저산소혈증 진행의 완화가 관찰되었다. 폐 염증정도의 지표인 폐조직의 myeloperoxidase 활성도는 PCON군에서 CON군에 비해 의미 있게 증가되었으며 이는 PNO군에서 의미 있게 완화되었다. 결 론 : E. coli 패혈성 폐가 유도된 신생자돈에서 NO 가스 흡입요법은 폐 내 단락 개선을 통해 산소화를 향상시켰으며 또한 폐 염증 소견을 완화시켰다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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