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A Cellulolytic and Xylanolytic Enzyme Complex from an Alkalothermoanaerobacterium, Tepidimicrobium xylanilyticum BT14

  • Phitsuwan, Paripok;Tachaapaikoon, Chakrit;Kosugi, Akihiko;Mori, Yutaka;Kyu, Khin Lay;Ratanakhanokchai, Khanok
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제20권5호
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    • pp.893-903
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    • 2010
  • A cellulolytic and xylanolytic enzyme complex-producing alkalothermoanaerobacterium strain, Tepidimicrobium xylanilyticum BT14, is described. The cell was Grampositive, rod-shaped, and endospore-forming. Based on 16S rRNA gene analysis and various lines of biochemical and physiological properties, the strain BT14 is a new member of the genus Tepidimicrobium. The strain BT14 cells had the ability to bind to Avicel, xylan, and corn hull. The pH and temperature optima for growth were 9.0 and $60^{\circ}C$, respectively. The strain BT14 was able to use a variety of carbon sources. When the bacterium was grown on corn hulls under an anaerobic condition, a cellulolytic and xylanolytic enzyme complex was produced. Crude enzyme containing cellulase and xylanase of the strain BT14 was active in broad ranges of pH and temperature. The optimum conditions for cellulase and xylanase activities were pH 8.0 and 9.0 at $60^{\circ}C$, respectively. The crude enzyme had the ability to bind to Avicel and xylan. The analysis of native-PAGE and native-zymograms indicated the cellulosebinding protein showing both cellulase and xylanase activities, whereas SDS-PAGE zymograms showed 4 bands of cellulases and 5 bands of xylanases. Evidence of a cohesinlike amino acid sequence seemed to indicate that the protein complex shared a direct relationship with the cellulosome of Clostridium thermocellum. The crude enzyme from the strain BT14 showed effective degradation of plant biomass. When grown on corn hulls at pH 9.0 and $60^{\circ}C$ under anaerobic conditions, the strain BT14 produced ethanol and acetate as the main fermentation products.

Endochitinase와 Chitobiosidase 유전자의 동시발현에 의한 키틴분해 활성의 증가 (Enhancement of chitinolytic activity of by co-expression of endochitinase and chitobiosidase genes)

  • 김정태;최신건
    • 산업기술연구
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    • 제30권B호
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    • pp.69-74
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    • 2010
  • Chitinolytic activity was enhanced by coexpression of endo-chitinase gene (chiA) and chitobiosidase gene (chiB) from Serratia marcescens KFRI314 using constitutive expression vector, pHCEIA, in E. coli. Coexpression vector was constructed by inserting ribosome binding site (RBS) into junction between two chitinase genes. SDS-PAGE analyses showed that two chitinase were constitutively expressed while E. coli clones expressing two chitinases simultaneously increased halo size on colloidal chitin plate. Furthermore, the chitinolytic activities were much enhanced in coexpressed clones when degradation patterns of substrate analogues such as 4-MU-(NAG), $4-MU-(NAG)_2$,$4-MU-(NAG)_3$ were used. Consequently, the combined use of endochitinase and chitobiosidase greatly increased overall chitinolytic activities on recombinant E. coli clones.

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스파르가눔 분비배설항원의 단백질 봉성 및 단백질분해효소 활성 (Component Proteins and Protease Activities in Excretory-Secretory Product of Sparganum)

  • 조승열;정영배;공윤
    • Parasites, Hosts and Diseases
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    • 제30권3호
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    • pp.227-230
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    • 1992
  • 스파르가눔증의 항체검사에서 항원으로 사용하는 스파르가눔 충체추출액의 구성 단백질 중, 환자혈청과 반응 시켜 관찰한 바, 분자량 36 및 31 kDa인 단백질이 항원성이 높았다. 또한 이 두가지 단백질은 스파르가눔 충체의 표피와 표피세포에 분포하여 충체 외부로 분비되는 항원일 것으로 추정하였다. 이 연구단보에서는 이들 두가지 단백질이 분비배설항원에 나타남을 증명하고자 스파르가눔을 $4^{\circ}C{\;}및{\;}37^{\circ}C$ 생리식염수에 30분~100시간 동안 배양하여 분비배설항원을 만들고, 분비배설항원내 단백질 분비량, 단백질의 조성 미치 단백질분해효소의 활성을 각각 관찰하였다. 충체 g당 분비배설항원의 단백질량은 관찰 범위안에서 배양온도에 관계없이 평균 7.7 mg이었다. SDS-폴리아크릴아미드 젤 전기영동상 분비배설항원의 단백질 구성은 분자량 66 kDa 이상인 단백질에서 차이가 있을 뿐 충체추출액의 것과 거의 유사하였다. 물론 분자량 36 및 31 kDa인 단백질도 분비배설항원의 주 구성성분이었다. 분비배설항원의 단백질분해효소 비활성도(比活性度)는 2.9~5.3 units/mg으로 충체추출액의 것과 차이가 없었다. 이미 보고된 스파르가눔의 cysteine protease가 체외로 분비되는 효소라는 것이 사실이라고 추정하게 하는 결과로 생각하였다.

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Effect of 1-[(2-Hydroxyethoxy)methyl]-6-(phenylthio)thymine (HEPT) Derivatives on Bacterial Growth

  • Gang, Jin-Gu;Yun, Hong-Chul;Son, Jong-Chan;Hwang, Se-Young
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제8권3호
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    • pp.229-236
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    • 1998
  • 6-Substituted derivatives of 1-[(2-hydroxyethoxy)methyl]-6-(phenylthio)thymine (HEPT) were synthesized by introducing alkyl groups with the aid of chlorotrimethylsilane, and then purified ranging 40 to 81 % of yield. Because of their peculiar structures, we presumed that HEPT derivatives would contain extra biological activities other than their already known anti-human immunodeficiency viral (HIV -1) activities. In this study, we investigated the possible effects of the HEPT derivatives on bacterial growth and found their selective antibiotic activities against gram-positive strains. We could not observe the corresponding activity from a disc-zone test, but confirmed the activity by liquid cultivation. Since the growth rate of cells was easily recovered, the antibiotic function was suggested to be bacteriostatic. We also suggested that the intracellular fate of HEPT derivatives would be fast. A HEPT derivative f-3 was shown to synergize unidirectionally toward chloramphenicol (Chr). With 0.1 mM f-3, the Chr-directed growth-inhibitory curve appeared 4 hours earlier than found without the additive. Interestingly, from the data of SDS-polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE), we found that a membrane-bound protein having a molecular weight of 70-kDa was overexpressed by f-3 in S. aureus.

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고객 간 관계 네트워크가 조직성과에 미치는 영향: 페이스북 기업 팬페이지를 중심으로 (Effects of Customers' Relationship Networks on Organizational Performance: Focusing on Facebook Fan Page)

  • 전수현;곽기영
    • 지능정보연구
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    • 제22권2호
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    • pp.57-79
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    • 2016
  • 최근 소셜 네트워크 서비스는 소비자와의 관계 마케팅 확산 및 확장을 위한 중요한 채널로 인식되며 많은 관심을 받고 있다. 기업이 온라인 환경에서 성공하기 위해서는 기업과 고객 사이의 관계 구축뿐만 아니라 고객들 간의 관계에 초점을 맞출 필요가 있다. 본 연구에서는 페이스북 팬 페이지에 참여하는 사용자들 사이의 네트워크를 분석하여 기업의 비즈니스 성과에 고객 간 네트워크의 구조적 특성이 미치는 영향을 실증적으로 분석하였다. 이를 위해 네트워크 데이터는 코스피 상장 기업 가운데 페이스북 팬 페이지에 100개 이상의 게시글을 올린 54개 기업으로부터 수집하였으며, 수집된 네트워크 데이터는 각 사용자를 노드로 하고 동일한 마케팅 활동에 대해 참여한 사용자간의 관계를 링크로 한 원모드 비방향 이진 네트워크(one-mode undirected binary network)이다. 본 연구에서는 이러한 네트워크 데이터를 핸들링하여 사용자들 간의 활동 관계를 분석할 수 있는 네트워크 지표(밀도, 글로벌 클러스터링 계수, 최단거리평균, 직경)를 도출하였으며, 이러한 고객 간 네트워크의 구조적 특징을 파악할 수 있는 지표와 기업의 과거실적(순이익), 그리고 미래 예측성과(토빈의 Q) 간의 관계를 분석하였다. 본 연구는 학문적 관점에서 소셜 미디어 채널을 비즈니스 관점에서 연구하려는 연구자들에게 소셜네트워크분석 방법을 통한 새로운 접근법을 제시한다. 실무적인 관점에서 본 연구는 소셜미디어를 통해 마케팅 활동을 수행하려는 기업의 관리자들에게 네트워크의 지표를 이용한 지능형 마케팅 서비스를 수행할 수 있는 토대를 제공할 것으로 기대한다.

설명가능한 인공지능을 활용한 수학교육 연구의 영향력 분석 (Analysis of the impact of mathematics education research using explainable AI)

  • 오세준
    • 한국수학교육학회지시리즈A:수학교육
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    • 제62권3호
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    • pp.435-455
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    • 2023
  • 본 연구는 수학 교육 분야에서 중요한 영향을 미치는 논문을 판별하고 분석하기 위한 설명가능한 인공지능(XAI) 모델을 개발하였다. 29개 국내외 수학교육 학술지의 논문 메타정보를 활용하여 수학교육 학술연구 네트워크를 구축하였다. 구축된 네트워크는 '논문과 다른 논문의 인용 네트워크', '논문과 저자 네트워크', '논문과 학술지 네트워크', '공동 저자 네트워크', '저자와 소속기관 네트워크' 등 총 5개의 세부 네트워크로 구성되었다. 랜덤포레스트 기계학습 모델을 사용하여 네트워크 내의 개별 논문의 영향력을 평가하였으며, SHAP을 이용해 영향력 있는 논문의 판별 기준을 분석하였다. '논문 네트워크 PageRank', '논문당 인용횟수의 변화량', '총 인용횟수', '저자의 h-index 변화량', '학술지의 논문당 인용횟수' 등이 중요한 판별 요인으로 나타났다. 국내와 국외 수학교육 연구의 판별 패턴을 비교 분석한 결과, 국내 연구에서는 '공동 저자 네트워크 PageRank'의 중요성이 도드라졌다. 본 연구의 XAI 모델은 논문의 영향력 판별 도구로써 연구자에게 논문 작성 시 전략적인 방향성을 제공할 수 있게 해준다. 논문 네트워크 확장, 학술대회 발표, 공동 저술 활동을 통한 저자 네트워크 활성화 등이 논문의 영향력 증진에 크게 기여한다는 결과를 얻었다. 이를 통해 연구자는 학계에서 자신의 연구가 어떠한 평가 기준에 따라 어떻게 인식되고 있는지, 그리고 그 평가에 기여하는 주요 요인이 무엇인지를 명확히 파악할 수 있을 것이다. 본 연구는 설명가능한 인공지능을 활용하여 전통적으로 많은 시간과 비용이 필요하던 수학교육 논문의 영향력 평가 방식을 혁신하였다. 이 방법은 수학교육 연구 뿐만 아니라 다른 학문 분야에서도 활용될 수 있으며, 연구활동의 효율성과 효과성을 향상시킬 것으로 기대된다.

Chemical Composition and Antimicrobial Activity of Essential Oil Extracted from Eucalyptus citriodora Leaf

  • Insuan, Wimonrut;Chahomchuen, Thippayarat
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제48권2호
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    • pp.148-157
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    • 2020
  • Eucalyptus oil is a rich source of bioactive compounds with a variety of biological activities and is widely used in traditional medicine. Eucalyptus citriodora is cultivated for the production of essential oils. However, the mode of antibacterial action of essential oils from E. citriodora is not well-known. This study aimed to determine the chemical components, microbial inhibitory effect, and mechanism of action of the essential oil from E. citriodora. The oil was extracted from E. citriodora leaves by hydro-distillation and the chemical components were analyzed using gas chromatography-mass spectrometry. The antibacterial activities of eucalyptus oil against gram-positive bacteria (Bacillus subtilis, Staphylococcus aureus, and Staphylococcus intermedius) and gram-negative bacteria (Escherichia coli and Pseudomonas aeruginosa) were screened by disc diffusion method and quantitative analysis was conducted by the microdilution method. The mechanism of action of the extracted essential oil was observed using SEM and analyzed by SDS-PAGE. The major components of E. citriodora oil were citronellal (60.55 ± 0.07%), followed by dl-isopulegol (10.57 ± 0.02%) and citronellol (9.04 ± 0.03%). The antibacterial screening indicated that E. citriodora oil exhibited prominent activity against all tested strains. The minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum bactericidal concentration (MBC) against B. subtilis were 0.5% and 1.0%, respectively. The MIC and MBC concentrations against S. aureus, S. intermedius, E. coli, and P. aeruginosa were 1% and 2%, respectively. As observed by SEM, the antibacterial mechanism of E. citriodora oil involved cell wall damage; SDS-PAGE revealed decrease in protein bands compared to untreated bacteria. Thus, E. citriodora oil showed significant antimicrobial properties and caused cellular damage.

Characterization of extracellular proteases from alkalophilic vibrio sp. strain RH 530

  • Kwon, Yong-Tae;Moon, Sun-Young;Kim, Jin-Oh;Kho, Yung-Hee;Rho, Hyune-Mo
    • 미생물학회지
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    • 제30권6호
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    • pp.501-506
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    • 1992
  • An alkalophilic Vibrio sp. RH530 showing high proteolytic activity was isolated form soil samples by enrichment culture. The activity staining using gelatin SDS- polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE ) revealed that the strain produced an alkaline major protease (Apr B) with a size of 27 kDa, and at least six minor proteases. The apparent sizes of four of the minor proteases were approximately 45, 28, 22 and 19 kDa. Apr B and five of the minor proteases were inhibited by serine protease inhibitors including PMSF and DFP, suggesting that they are serine proteases. One of the minor proteases was inhibited by metalloprotease inhibitors, not by serine protease inhibitors, indicating it to be a metalloprotease. Furthermore, the activities of Apr B and Prt 3 were not inhibited by SDS in the reaction mixture. The production of Apr B and some of the minor proteases was specifically affected by culture temperature (30 to 37.deg.C) and pH (7 to 10). The production of Apr B. Prt 2, Prt 5 and Prt 6 was mainly affected by culture temperature, while Prt 4 by culture pH. Prt 1 and Prt 3 were not affected by neither of these factors.

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폐흡충 성충이 분비배설하는 anti-oxidant ensymes의 특성 관찰 및 peroxidase의 정제 (Characterization of a peroxidase in excretory-secretory product of adult Parasonimus westermani)

  • 정영배;공윤;조승열;강신영;최병찬;이희성
    • Parasites, Hosts and Diseases
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    • 제31권3호
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    • pp.259-268
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    • 1993
  • 폐흡충의 분비배설물은 항원성이 높아 폐흡충증의 진단용 항원으로 가치가 있다고 보고되었다. 이 까닭은. 분비배설물에는 숙주내에서 여러 생물학적 반응을 일으키는 물질뿐 아니라 충체의 일부구성 성분 및 여러 효소 등이 포함되어 있기 때문이라 가정할 수 있다. 이 연구는 폐흡충 성충의 분비배설물에서 숙주의 산소라디칼을 분해시키는 효소인 catalase, superoxide dismutasr (SOD), peroxidase 등이 존재하는지를 확인하고 그 활성도를 측정하였으며 그 중 peroxidase를 정제하여 생화학적 특성의 일부 및 항원성을 관찰하였다. 폐흡충 성충 50마리를 $37^{\circ}C$ 부란기에 12시간 배양한 뒤 배양액을 원심분리하고 이를 분비배설 조효소로 사용하였다. 분비배설물에서 catalase, SOD와 peroxidase의 활성도를 측정할 수 있었고 그 비활성도(specific activity)는 각각 11.1, 3.4 및 48.5 이었다. 분비배설물의 peroxidase 비활성도는 충체추출액의 비활성도보다 1.5배 높았다 이 효소를 Sephacryl 5-300 Superfine gel filtration. DEAE-Tnsacryl M anion exchange chromatography로 정제하였다. 정제한 peroxidase의 분자량은 HPLC에서는 19 kDa이었고 SDS-전기영동에서는 16 kDa이었다. 정제한 효소를 전기영동한 후 diaminobenzidine으로 specific staining한 결과 이 효소는 충체추출액의 효소와 같은 영동이동거리를 나타내었다 즉 이 효소는 충체로부터 분비되는 것임을 알 수 있었다. 한편 폐흡충 감염 환자의 혈청과 반응시킨 immunoblot에서 분비배설물의 구성 단백질중 84, 64, 42, 32, 30, 28, 26, 24, 22, 11 및 8 kDa가 항원성을 보인 반면 정제한 peroxidase는 미약한 반응을 보였다 이상의 결과로 폐흡충 peroxidase는 분비배설되어 SOD, catalase와 함께 산소 독성을 제거하는데 작용하고 있으나 패흡충 감염 환자에서 특이 항체 반응을 일으키는데 에는 미약한 작용을 한다는 것을 알 수 있었다.

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트레이스 백 정보에 기반한 매크로 공격 탐지 모델 (A Macro Attacks Detection Model Based on Trace Back Information)

  • 백용진;홍석원;박재흥;강경원;김상복
    • 융합보안논문지
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    • 제18권5_1호
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    • pp.113-120
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    • 2018
  • 오늘날 정보 통신 기술의 발전은 네트워크 기반의 서비스 사용자 수를 빠르게 증가시키고 있으며, 인터넷 상에서 사용자 상호간 실시간 정보 공유를 가능하도록 한다. 정보의 공유 과정에는 다양한 방법들이 존재하지만 일반적으로 포털서비스 기반의 정보 공유가 대중화 되어있다. 그렇지만 이러한 정보 공유 과정은 특정 이해 당사자 상호간 해당 정보의 사회적 관심도 증폭을 위한 불법 행위를 유발시키는 원인이 되고 있다. 그 중 매크로 기능을 이용한 여론 조작 공격은 정상적인 여론의 방향을 왜곡시키기 때문에 이에 대한 보안 대책이 시급한 실정이다. 일반적으로 매크로 공격이란 불법적인 사용자들이 다수의 IP나 아이디를 확보한 후 특정 웹 페이지의 내용에 대하여 여론을 조작하는 공격으로 정의한다. 본 논문은 특정 사용자의 매크로 공격에 대하여 트레이스 백 기반의 네트워크 경로 정보를 분석한 후 해당 사용자의 다중 접속을 탐지할 수 있도록 하였다. 즉, 특정 웹 페이지에 대한 전체적인 접근 경로 정보와 사용자 정보가 일치하는 접근이 2회 이상 발생하면 이를 매크로 공격으로 판정하였다. 또한 동일한 지역에서 특정 웹 페이지에 대하여 다수의 아이디를 이용한 접근이 발생하는 경우, 이에 대한 임계 카운트 값 분석을 통하여 특정 웹 페이지에 대한 전체적인 여론 결과를 왜곡 할 수 없도록 하였다.

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