Kim, Yu-mi;Kwak, Mi-hyang;Kim, Hee-sook;Lee, Jin-ho
한국미생물·생명공학회지
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제47권2호
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pp.242-249
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2019
Biosynthesis of indole-3-acetate (IAA) from L-tryptophan via indole-3-pyruvate pathway requires three enzymes including aminotransferase, indole-3-pyruvate decarboxylase, and indole-3-acetate dehydrogenase. To establish a bio-based production of IAA, the aspC, ipdC, and iad1 from Escherichia coli, Enterobacter cloacae, and Ustilago maydis, respectively, were expressed under control of the tac, ilvC, and sod promoters in C. glutamicum. Cells harboring ipdC produced tryptophol, indicating that the ipdC product is functional in this host. Analyses of SDS-PAGE and enzyme activity revealed that genes encoding AspC and Iad1 were efficiently expressed from the sod promoter, and their enzyme activities were 5.8 and 168.5 nmol/min/mg-protein, respectively. The final resulting strain expressing aspC, ipdC, and iad1 produced 2.3 g/l and 7.3 g/l of IAA from 10 g/l L-tryptophan, respectively, in flask cultures and a 5-L bioreactor.
공공도서관은 주민들의 문화수준을 향상시키기 위하여 주민들이 접근 할 수 있도록 도서관과 관외 봉사 거점을 많이 설립하고 이들을 거점으로 주민들이 독서활동을 할 수 있는 독서회를 조직하고 그 독서회를 중심으로 활동하는 것이 독서활동을 활성화하는 효율적인 방법으로 판단되어 공공도서관은 주민을 대상으로 계층별 및 주제별에 따라 또는 주민들이 자신의 취미나 특기에 따라 활동할 수 있는 독서회를 조직하도록 한다. 그리고 공공도서관은 관내 모든 독서회를 대상으로 하는 종합적인 총괄프로그램을 구성하여 운영한다. 또한 공공도서관은 독서회원들이 활동하는데 필요한 정보를 서로 주고받을 수 있도록 홈페이지를 개설해 운영하고,‘뉴스레터’의 발행으로 독서회 활동을 정리하면서 관리한다면 훌륭한 효과를 얻을 수 있을 것으로 판단하였다.
This study relates to low and medium molecular weight isoflavone-${\beta}$-D-glucan produced by submerged liquid culture of Agaricus blazei, a method of producing the isoflavone-B-D-glucan using autolysis enzyme of Agaricus blazei mycelia, and use of the isoflavone-B-D-glucan for anti-cancer and immunoenhancing effect. In acordance with one aspect of the present study, it deals with a method of producing isoflavone-${\beta}$-D-glucan, which comprises the followings; 1) culturing and separating mushroom mycelia, 2) producing low-medium molecular weight isoflavone-${\beta}$-D-glucan from high molecular weight one. The cytotoxicity on human cnacer cell line (Caco-2, MCF-7), the expression of Cyclin D, Bcl-2, Bax protein, p21 protein, p53 protein in MCF-7 cells assessed by SDS-PAGE and immunoblotting, and other immuno related factor such as TNF-a and IL-1B activities were examined. Structural identification of isoflavone-${\beta}$-D-glucan which shoed cytotoxicity against cancer cell and immunoenhancing effects was carried by separation with DEAE-cellulose column chromatography, TLC, HPLC, IR, NMR, Clinical test for the cancer patients (n=119) for 6 month was carried out, and immunoenhancing factors(NK cell number, ratio of T4/T8) were checked. We concluded the identified isoflavone-${\beta}$-D-glucan has immuno enhancing effects and could be useful for cancer chemoprevention.
CO2 emissions are the primary reason for global warming; hence, biological and chemical technologies for converting CO2 into useful compounds are being actively studied. Biological methods using enzymes can convert CO2 under mild conditions. Formate dehydrogenase (FDH) is a representative CO2 conversion enzyme. Its function was revealed after isolation from bacteria, yeast, and plants. In this study, we evaluated the CO2 conversion potential of FDH isolated from wood-rotting fungi. After isolating the FDH gene (TvFDH) from Trametes versicolor, we cloned the full-length FDH from T. versicolor and expressed it in a cell-free expression system. The gene encoding TvFDH was identified as 1,200 bp open reading frame (ORF) and the expected molecular weight of the protein was approximately 42 kDa. Overexpression of the recombinant crude protein including TvFDH was confirmed by sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE). Enzyme activities and metabolite analyses confirmed the efficiency of TvFDH for CO2 reduction.
오늘날 eCRM은 인터넷 홈페이지를 방문하는 고객 정보를 체계적으로 관리하고 활용하기 위한 기업용 정보 시스템으로 주목받고 있다. 본 논문은 국내 유수의 유가공 업체 N사가 eCRM을 도입하여 활용한 사례에 대한 연구이다. N사가 eCRM을 도입하여 웹 로그 분석을 실시하고 고객별 최적화 서비스 도구를 이용할 수 있게 되면서, 이를 통해 정보를 분석하고 마케팅 활동에 활용한 사례를 연구하였다. 특히 본 연구에서는 유가공 업체와 같은 제조업체에서 인터넷 홈페이지를 통한 프로모션 활동과 연계한 eCRM 솔루션 도입 과정에 대하여 분석하였다. 또한 eCRM을 기업에 도입한 후 활용 범위와 효과에 대하여 논하였다.
The callus from the hypocotyl region of immature embryo of Citrus junos Sieb. was efficiently induced in the $\frac{1}{2}$ MS medium containing 45uM BA after 8 weeks culture. The callus was developed into the two callus type, embryogenic callus and nonembryogenic callus, which can be distinguished by visual examination depending on color and appearence. In vitro regeneration of callus established efficiently in the hormone-free MS medium from the embryogenic callus. In order to investigate the physiological changes depending on the developmental stage of embryo, the embryo was formed in the MS medium. The embryogenic and nonembryogenic callus, and the various stages of the somatic embryo were examimed the changes of esterase activity, and their isozyme patterns as well. The protein content and esterase activities was gradually increased on the developmental stages of embryo. Total protein pattern were different by the SDS-PAGE and were appeared strong band of 23 KD in the torpedo stage. The pattern of the esterase isozyme was exhibited a difference between embryogenic callus and nonembryogenic callus. It was appered pI 6.0, 8.0, 8.2 in the embryogenic callus. Also the new band of pI 4.75 was appeared in the cotyledon. These results suggest that the changes of esterase activities and isozyme patterns are importent factor in the differentiation and development of citrus.
미생물 발효에 의한 누에분말의 생리활성 작용 및 물질을 개발하기 위한 기초 자료를 얻을 목적으로 Mucor racemosus forma racemosus KCCM 12352, Rhizopus oryzae KCCM 11273, A. oryzae KCCM 11372, A. kawachii KCCM 32819 및 Monascus purpureus KCCM 12002 5종의 곰팡이 균주를 본 실험에 사용하였으며, 이들에 의한 발효 누에분말의 미네랄 함량, 지방산 조성, 단백질 함량, 단백질 패턴, 항산화 활성 및 혈전용해 활성을 비교 검토하였다. 발효 동결 및 열풍건조 누에분말의 주요 미네랄 함량은 각각 칼륨 72.0~76.3 및 77.1~78.9 ppm, 마그네슘 29.6~49.7 및 44.3~58.7 ppm, 칼슘 1.9~14.9 및 9.8~21.6 ppm 및 아연 0.64~0.70 및 4.17~4.52 ppm이였으며, 주요지방산 조성은 linolenic acid, oleic acid 및 palmitic acid 이였다. 발효 동결 및 열풍건조 누에 분말의 단백질을 Native-PAGE로 비교분석 한 결과 발효 동결누에 분말에서 많은 종류의 밴드가 관찰되었으며, SDS-PAGE상의 단백질 패턴 분석에서는 97~66 kDa 중간 정도 크기의 단백질 밴드가 발효에 의해 분해되어 거의 관찰되지 않았다. 발효 동결 및 열풍건조 발효누에 분말의 항산화 활성은 발효전보다 증가하였으나 균주 종류별로는 큰 차이가 없었고, 시판 항산화제 BHT 처리구의 90% 이상의 높은 항산화 활성보다는 낮았다. 혈전용해 활성은 동결 및 열풍건조 누에분말 모두 없었으나, 열풍건조 누에분말의 A. kawachii 및 Monascus purpureus에 의한 발효누에에서 혈전용해 활성이 나타났다. 이상의 실험결과에서 곰팡이 균주에 의한 누에분말의 생리활성 효과 및 이화학적 특성이 발효전 누에 분말보다 강화됨으로써 건강기능식품의 소재로서의 이용 가능성이 높다고 할 수 있다.
Ginseng have been traditionally used for strengthening immunity, providing nutrition and recovering health from fatigue. Recently, pharmaceutical activities of ginseng roots have been proven by many researches, and ginseng has become a world-famous medicinal plant. Ginseng saponin, ginsenoside, is one of the most important secondary metabolite in ginseng which has various pharmacological activities. Many studies have aimed to convert major ginsenosides to the more active minor ginsenoside Rg3 for consumer demand ginseng product. Microbial strain GS514 strain was isolated from soil around ginseng roots for enzymatic preparation of ginsenoside Rg3, which strain shows strong ability of converting ginsenoside Rb1and Rd into Rg3 in the solution with NaCl. The gene encoding a ${\beta}$-glucosidase from this GS514 was cloned and expressed in the BL21 (DE3) strain of Escherichia coli. The recombinant enzyme was purified and characterized. The molecular mass of purified was 87.5 kDa, as determined by SDS-PAGE. The gene sequence revealed significant homology to the family 3 glycoside hydrolases. The purified single enzyme also catalyzed the conversion of ginsenoside Rb1 into Rg3. This target enzyme will be able to produce as much saponin for consumer demand ginseng product. Anti-apoptotic proteins bind with pro-apoptotic proteins to induce apoptosis mechanism. Over expression of these anti-apoptotic proteins lead to several cancers by preventing apoptosis. Docking simulations were performed for anti-apoptotic proteins with several ginsenosides from Panax ginseng. Our finding shows ginsenosides particularly Rg3, Rh2 and Rf have more binding affinity with apoptotic proteins. Further, these docking system of each ginsenosides can be extended to experimental screen system for further brief confirmations of several diseases.
최근 IT 환경의 변화에 따라 웹 서비스를 기반으로 대규모 사용자 대상의 상호 참여적인 MOOC(Massive Open Online Courses)과 같은 온라인 교육 환경이 부상하고 있다. 그러나 온라인 교육 시스템은 원거리로 학습이 이루어짐에 따라 학습자의 자발적 동기를 꾸준히 유지하기 어려우며, 또한 학습자 간에 지식을 공유하고 공유한 지식을 활용하는 기능이 부족하다. 이러한 문제를 극복하기 위해 구성주의적 학습이론과 집단지성에 기반하여 학습자가 보유한 학습자료를 공유하고 개인화된 학습자료 추천을 받을 수 있는 학습자료 북마킹 서비스인 WeStudy를 구현하였다. 위키피디아(Wikipedia), 슬라이드쉐어 (SlideShare), 비디오렉쳐스 (VideoLectures) 등 현존하는 집단지성 기반 서비스들의 주요 기능으로부터 필요한 집단지성 기능들을 검토하였으며, 본 서비스의 주요 기능으로 1) 리스트 및 그래프 형태의 학습자료 리스트 시각화, 2) 개인화된 학습자료 추천, 3) 보다 상세한 학습자료 추천을 위한 관심 학습자 지정 등을 도출하여 시스템을 설계하였다. 이후, 웹 기반으로 구현된 세 가지 주요기능 별로 개량된 휴리스틱 사용성 평가 방법을 통해 개발된 시스템의 사용성 평가를 실시하였다. 10명의 HCI 분야 전공자 및 현업 종사자를 대상으로 정량적 및 정성적인 평가 결과, 세 가지의 주요 기능에서 전반적으로 사용성이 우수한 것으로 판정되었다. 주요 기능 별 정성적인 평가에서 도출된 여러 마이너 이슈들을 반영할 필요가 있으며, 향후 대규모 사용자를 대상으로 본 서비스를 보급하고 이용할 수 있도록 제공하여 자발적인 지식 공유 환경을 조성할 수 있을 것으로 전망된다.
This study relates to low and medium molecular weight isoflavone-${\beta}$-D-glucan produced by submerged liquid culture of Agaricus blazei, a method of producing the isoflavone-B-D-glucan using autolysis enzyme of Agaricus blazei mycelia, and use of the isoflavone-B-D-glucan for anti-cancer and immunoenhancing effect. In acordance with one aspect of the present study, it deals with a method of producing isoflavone-${\beta}$-D-glucan, which comprises the followings; 1) culturing and separating mushroom mycelia, 2) producing low-medium molecular weight isoflavone-${\beta}$-D-glucan from high molecular weight one. The cytotoxicity on human cnacer cell line (Caco-2, MCF-7), the expression of Cyclin D, Bcl-2, Bax protein, p21 protein, p53 protein in MCF-7 cells assessed by SDS-PAGE and immunoblotting, and other immuno related factors such as TNF-${\alpha}$ and IL-1B activities were examined. Structural identification of isoflavone-${\beta}$-D-glucan which showed cytotoxicity against cancer cell and immunoenhancing effects was carried by separation with DEAE-cellulose column chromatography, TLC, HPLC, IR, NMR. Clinical test for the cancer patients (n=119) for 6 month was carried out, and immunoenhancing factors (NK. cell number, ratio of T4/T8) were checked. We concluded the identified isoflavone-${\beta}$-D-glucan has immuno enhancing effects and could be useful for cancer chemoprevention.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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