Adaptive development of early stage embryo is well established and recently it is explored that the mammalian embryos also have adaptive ability to the stressful environment. However, the mechanisms are largely unknown. In this study, to evaluate the possible role of aquaporin in early embryo developmental adaptation, the expression of aquaporin (AQP) 5 gene which is detected during early development were examined by the environmental condition. To compare expression patterns between in vivo and in vitro, we conducted quantitative RT-PCR and analyzed localization of the AQP5 by whole mount immunofluorescence. At in vivo condition, Aqp5 expressed in oocyte and in all the stages of preimplantation embryo. It showed peak at 2-cell stage and decreased continuously until morula stage. At in vitro condition, Aqp5 expression pattern was similar with in vivo embryos. It expressed both at embryonic genome activation phase and second mid-preimplantation gene activation phase, but the fold changes were modified between in vivo embryos and in vitro embryos. During in vivo development, AQP5 was mainly localized in apical membrane of blastomeres of 4-cell and 8-cell stage embryos, and then it was localized in cytoplasm. However, the main localization area of AQP5 was dramatically shifted after 8-cell stage from cytoplasm to nucleus by in vitro development. Those results explore the modification of Aqp5 expression levels and location of its final products by in vitro culture. It suggests that expression of Aqp5 and the roles of AQP5 in homeostasis can be modulated by in vitro culture, and that early stage embryos can develop successfully by themselves adapting to their condition through modulation of the specific gene expression and localization.
Park, Bo Kyung;Gonzales, Edson Luck T.;Yang, Sung Min;Bang, Minji;Choi, Chang Soon;Shin, Chan Young
Biomolecules & Therapeutics
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제24권1호
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pp.99-107
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2016
Triclosan is an antimicrobial or sanitizing agent used in personal care and household products such as toothpaste, soaps, mouthwashes and kitchen utensils. There are increasing evidence of the potentially harmful effects of triclosan in many systemic and cellular processes of the body. In this study, we investigated the effects of triclosan in the survivability of cultured rat neural stem cells (NSCs). Cortical cells from embryonic day 14 rat embryos were isolated and cultured in vitro. After stabilizing the culture, triclosan was introduced to the cells with concentrations ranging from $1{\mu}M$ to $50{\mu}M$ and in varied time periods. Thereafter, cell viability parameters were measured using MTT assay and PI staining. TCS decreased the cell viability of treated NSC in a concentration-dependent manner along with increased expressions of apoptotic markers, cleaved caspase-3 and Bax, while reduced expression of Bcl2. To explore the mechanisms underlying the effects of TCS in NSC, we measured the activation of MAPKs and intracellular ROS. TCS at $50{\mu}M$ induced the activations of both p38 and JNK, which may adversely affect cell survival. In contrast, the activities of ERK, Akt and PI3K, which are positively correlated with cell survival, were inhibited. Moreover, TCS at this concentration augmented the ROS generation in treated NSC and depleted the glutathione activity. Taken together, these results suggest that TCS can induce neurodegenerative effects in developing rat brains through mechanisms involving ROS activation and apoptosis initiation.
본 연구는 스마트워크 산업 경쟁력 분석과 육성방안을 알아보기 위해, 스마트워크 산업 전문가 117명 대상으로 설문조사 하였으며, 스마트워크 시장성 전망과 국제경쟁력 분석을 하였다. 조사결과 첫째, 클라우드 컴퓨팅 산업에 대한 성장성 인식이 매우 높게 나타났다. 둘째, 스마트워크 산업의 수익성 높은 산업군으로 보안산업, 클라우드 컴퓨팅 산업, 모바일 오피스산업 등이다. 셋째, 스마트워크 산업군중 국제 기술경쟁력 수준이 높은 산업군은 스마트러닝 산업, 모바일 오피스 산업 및 보안산업이다. 끝으로, 정부차원에서 집중 육성해야할 산업은 보안산업, 클라우드 컴퓨팅산업, 스마트워크용 SW 산업, 스마트라닝 산업 등이다. 이러한 결과를 통해 향후 스마트워크 산업들 중 정부 차원의 집중 육성분야를 선정하고 활성화 정책을 마련하는데 이용하고자 한다.
The roles that accessory gene products play in activating the Helicobacter pylori urease apoprotein were examined. The activity of the urease apoprotein increased in the following order when it was expressed with the accessory genes: ureG < ureGH < ureFGH < ureEFGH < ureIEFGH. Moreover, stepwise additions of ureE and ureI to ureFGH significantly increased urease activity. Urease apoproteins coexpressed with ureFGH, ureEFGH, and ureIEFGH had similar low chymotrypsin susceptibilities. In vivo and in vitro activation studies showed that the cooperative effect of the accessory proteins involved processes in which the UreFGH complex, UreE, and UreI were implicated. Thus, the UreFGH complex may serve to alter the conformation of the apoprotein into one that is more competent to assemble a stable metallocenter, and that facilitates cooperative effects.
The present study was designed to assess the roles of $PLA_2$ activation and arachidonic acid (AA) metabolites in hypoxia-induced renal cell injury. Hypoxia increased LDH release in a dose-dependent manner in rabbit renal cortical slices, and this increase was significant after 20-min hypoxia. The hypoxia-induced LDH release was prevented by amino acids, glycine and alanine, and extracellular acidosis (pH 6.0). Buffering intracellular $Ca^{2+}$ by a chelator, but not omission of $Ca^{2+}$ in the medium produced a significant reduction in hypoxia-induced LDH release. The effect of hypoxia was blocked by $PLA_2$ inhibitors, mepacrine, butacaine, and dibucaine. A similar effect was observed by a 85-kD $cPLA_2$ inhibitor $AACOCF_3.$ AA increased hypoxia-induced LDH release, and albumin, a fatty acid absorbent, prevented the LDH release, suggesting that free fatty acids are involved in hypoxia-induced cell injury. These results suggest that $PLA_2$ activation and its metabolic products play important roles in pathogenesis of hypoxia-induced cell injury in rabbit renal cortical slices.
Seo, Jeong Yeon;Choi, Ji Won;Lee, Jae Yeon;Park, Young Shik;Park, Yong Il
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제28권6호
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pp.860-873
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2018
Although ginseng marc is a by-product obtained during manufacturing of various commercial ginseng products and has been routinely discarded as a waste, it still contains considerable amounts of potential bioactive compounds, including saponins and polysaccharides. Previously, we reported that ginseng oligosaccharides derived from ginseng marc polysaccharides by enzymatic hydrolysis exert immunostimulatory activities in macrophages and these activated macrophages are in turn able to inhibit the growth of skin melanoma cells by inducing apoptosis. In the present study, a more detailed investigation of the immunostimulatory activity and underlying action mechanisms of an enzymatic hydrolysate (GEH) containing these oligosaccharides derived from ginseng marc polysaccharides was performed. The levels of proinflammatory cytokines and anti-inflammatory cytokines were measured in GEH-stimulated RAW264.7 macrophages using RT-PCR analysis and ELISA. The expression levels of Toll-like receptor 2 (TLR2) and TLR4, Dectin-1, and MerTK were measured by RT-PCR analysis or western blot analysis, and the phagocytic activities of GEH-challenged bone marrow-derived macrophages toward apoptotic Jurkat cells were assayed using fluorescence microscopy. GEH induced the production of both proinflammatory cytokines $TNF-{\alpha}$ and IL-6, and anti-inflammatory cytokine IL-10 in RAW 264.7 cells. The expression of the TLR2 and MerTK mRNAs was increased upon GEH treatment. Phagocytosis of apoptotic Jurkat cells was enhanced in GEH-treated macrophages. Based on the results, this enzymatic hydrolysate (GEH) containing oligosaccharides exerts immunostimulatory effects by maintaining the balance between M1 and M2 cytokines, facilitating macrophage activation and contributing to the efficient phagocytosis of apoptotic cells. Therefore, the GEH could be developed as value-added, health-beneficial food materials with immunostimulatory effects.
Titanium and titanium alloys are widely used for orthopedic and dental implants for their superior mechanical properties, low modulus, excellent corrosion resistance and good biocompatibility. In this study, corrosion behaviors of nanotube formed on the bone plate of Ti-6Al-4V alloy for dental use have been investigated. $TiO_2$ nanotubes were formed on the dental bone plates by anodization in $H_3PO_4$ containing 0.6 wt % NaF solution at $25^{\circ}C$. Electrochemical experiments were performed using a conventional three-electrode configuration with a platinum counter electrode and a saturated calomel reference electrode. Anodization was carried out using a scanning potentiostat (EG&G Co, Model 263A USA), and all experiments were conducted at room temperature. The surface morphology was observed using field emission scanning electron microscopy (FE-SEM) and energy dispersive x-ray spectroscopy(EDS). The corrosion behavior of the dental bone plates was examined using potentiodynamic test(potential range of -1500~2000 mV) in a 0.9% NaCl solution by potentiostat (EG&G Co, PARSTAT 2273. USA). The inner diameter of nanotube was about 150~180 nm with wall thickness of about 20 nm. The interspace of nanotube to nanotube was 50 nm. The passive region of the nanotube formed bone plates showed the broad range compared to non-nanotube formed bone plates. The corrosion surface of sample was covered with corrosion products.
Korean red ginseng (KRG) is a valuable and important traditional medicine in East Asian countries and is currently used extensively for botanical products in the world. KRG has both stimulatory and inhibitory effects on the central nervous system (CNS) suggesting its complicated action mechanisms. The substantia gelatinosa (SG) neurons of the trigeminal subnucleus caudalis (Vc) are involved in orofacial nociceptive processing. Some studies reported that KRG has antinociceptive effects, but there are few reports of the functional studies of KRG on the SG neurons of the Vc. In this study, a whole cell patch clamp study was performed to examine the action mechanism of a KRG extract on the SG neurons of the Vc from juvenile mice. KRG induced short-lived and repeatable inward currents on all the SG neurons tested in the high chloride pipette solution. The KRG-induced inward currents were concentration dependent and were maintained in the presence of tetrodotoxin, a voltage gated $Na^+$ channel blocker. The KRG-induced inward currents were suppressed by 6-cyano-7-nitroquinoxaline-2,3-dione, a non-N-methyl-D-aspartate (NMDA) glutamate receptor antagonist and/or picrotoxin, a gamma-aminobutyric acid $(GABA)_A$ receptor antagonist. However, the inward currents were not suppressed by d,l-2-amino-5-phosphonopentanoic acid, an NMDA receptor antagonist. These results show that KRG has excitatory effects on the SG neurons of the Vc via the activation of non-NMDA glutamate receptor as well as an inhibitory effect by activation of the $GABA_A$ receptor, indicating the KRG has both stimulatory and inhibitory effects on the CNS. In addition, KRG may be a potential target for modulating orofacial pain processing.
The covalent interactions of toluenediisocyanate (TDI) with macromolecules were investigated both in vitro and in vivo. In vitro incubations of 2,4- and 2,6-TDI with DNA or proteins resulted in dose-dependent formation of TDI-protein and TDI-DNA adducts. TDI-treated DNA was highly resistant to enzymatic digestion and thermal hydrolysis, but was readily hydrolyzed under acidic conditions by releasing its corresponding toluenediamine (TDA), suggesting that TDI caused the crosslinking of DNA. Reaction of TDI with albumin and globin resulted in the formation of several adducts, and some adducts were formed in blood of TDI-treated rats in a dose-dependent fashion. Administration of TDI to rats resulted also in a dose-dependent binding of TDI to hepatic tissue. Levels of TDI-albumin adducts were 10 times higher than those of TDI-globin adducts; the biological half lives of TDI-albumin and TDI-globin adducts were 1.2 and 12.5 days, respectively. Globin adducts were detected up to 28 days after the treatment. Hepatic TDI protein adducts were persistent for a substantial period whereas the levels of hepatic TDI-DNA adduct were decreased rapidly. These results indicate that the isocyanato group of TDI is not readily hydrolyzed under physiological conditions, is transported to other organs, and is bound to DNA and/or proteins without further metabolic activation. As the adducted products degrade in the body, TDA is released and introduced to the liver. TDA may additionally bind to hepatic tissue after metabolic activation. Thus, the toxic effect of TDI exposure is considered to persist during the lifetime of the adducted biological macromolecules.
지역축제란 지역기반창업기업들에게 매우 소중한 홍보 및 판매의 장이 될 수 있다. 그렇다면 지역축제의 서비스품질은 이들의 제품 판매 활성화에 직접적으로 기여할 수 있는가? 기존의 축제서비스품질과 관련된 연구에서는 축제서비스 품질의 관광산업적 성과에 주로 초점을 맞추었던 것과는 달리, 우리는 축제서비스 품질이 제품판매에 미치는 영향에 초점을 맞추어 연구를 진행하였다. 선행연구 분석을 토대로 하여 우리는 "지역축제의 서비스품질은 지역이미지를 매개로 지역기반창업기업의 제품에 대한 소비자의 구매의도에 영향을 줄 것이다"라는 가설을 세우고 연구를 진행하였다. 그 결과 첫째, 축제서비스 품질은 구매의도에 직접적으로 영향을 주지 않았다. 공감성 차원을 제외할 땐 다른 차원은 모두 직접적 영향을 주지 않았다. 반면 축제서비스 품질의 각 차원은 확신성을 제외하고 지역 이미지를 매개로 구매의도에 유의미한 영향을 주었다. 그리고 구매의도는 구매행동에도 실질적으로 큰 영향을 미치고 있었다. 이를 통해 우리는 지역축제서비스품질은 지역이미지를 매개로 할 때, 지역기반창업기업의 제품판매에 영향을 미친다는 점을 확인할 수 있었다. 다만 영향은 직접적인 영향이 아니라 간접적인 영향이었다. 또한 지역이미지가 중요한 영향을 미치므로 지역이미지를 개선하기 위한 노력이 선행되어야 한다는 점을 제언할 수 있다. 더하여 지역축제서비스 품질의 향상은 지역기반창업기업제품 판매에 긍정적 영향을 준다는 점을 확인할 수 있었으며, 특히 공감성 차원이 영향을 많이 준다는 점을 또한 확인할 수 있었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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