깨끗한 대기가 유지되는 청정지역 및 산성강하물의 영향을 받는 공단지역에서 자라는 떡갈나무(Quercus dentate Thunb.) 잎표면에서 분리한 내산성세균 배양으로부터 16S rDNA를 추출하여 모두 444개의 clone을 얻었으며, 이를 대상으로 Restriction fragment length polymorphism (RFLP)을 실시한 결과 총 17종류의 계통형 (phylotype)이 나타났다. 두 지역에서 나타난 대표적인 내산성 잎권세균 군집은 매우 단순하여 ${\gamma}$-Proteobacteria와 low-G+C gram-positive bacteria의 2개 group이었다. 식물 잎의 나이가 들수록 내산성 잎권세균 계통형의 다양성은 현저하게 증가하였다. 내산성 잎권세균 군집 구조는 $\gamma$-Proteobacteria에 속하는 Pseudomonas group과 Enterobacteriaceae, 그리고 low-G+C gram-positive bacteria 즉 Bacillus/Clostridium group에 속하는 Streptococcaceae와 Staphylococcus group이 우점하였다. 산성강하물에 따른 내산성 잎권세균 군집 구조의 변화는 상위 계통분류군(subphylum 수준)에서는 뚜렷이 볼 수 없었지만 보다 하위분류군에서 볼 때 $\gamma$-Proteobacteria의 Xanthomonadales group은 공단지역에서만, 그리고 $\alpha$-Proteobacteria의 Acetobacteraceae는 청정지역에서만 각각 검출되었으므로 이들 세균집단을 산성강서만, 그리고 $\alpha$-Proteobacteria의 Acetobacteraceae는 청정지역에서만 각각 검출되었으므로 이들 세균집단을 산성강 하물에 대한 지표세균으로서 사용할 수 있는 가능성을 남겨 놓았다.
The diversity of epiphytic bacterial communities on deciduous oak tree (Quercus dentate Thunb.) leaves was examined both in the natural forest area with a clean air and in the industrial estate to assess effects of acidic deposition to the phyllosphere using 16S rDNA sequence data. In addition, acid-tolerant epiphytic bacterial communities were compared. A total of 78 epiphytic and 444 acid-tolerant clones were obtained from clone libraries, resulting in 20 and 17 phylotypes by analysis of restriction fragment length polymorphism (RFLP) for PCR-amplified 16S rDNA products. A low bacterial diversity in both areas was found. As tree leaves grow older, bacterial diversities were slightly increased in the level of subphylum. The community structure of epiphytic bacteria in both areas in April consisted of only two subphyla, $\beta-and\;\gamma-Proteobacteria$. In August two additional subphyla in both areas were found, but the composition was a little different, Acidobacteria and Cytophaga-Flexibacter-Bacteroids (CFB) group in the industrial estate and a -Proteobacteria and CFB group in the natural area, respectively. Acidobacteria could be an indicator of epiphytic bacteria for acidic deposition on plant leaves, whereas a -Proteobacteria be one of epiphytic bacteria that naturally survive on leaves that are not affected by acidic deposition. The acid-tolerant bacterial communities in April were composed of two subphyla, $\gamma-Proteobacteria$ and Low G+C gram-positive bacteria in both areas, and in August a-Proteobacteria was added to the community just in the natural forest area. The direct influence of acidic deposition on the acid-tolerant bacterial phylogenetic composition could not be detected in higher taxonomic levels such as subphylum, but at narrower or finer levels it could be observed by a detection of Xanthomonadales group of $\gamma-Proteobacteria$ just in the industrial estate.
This study was carried out to select the lactic acid bacteria(Lactobacillus, Streptococcus and Bifidobacterium) and yeast for probiotic use in pigs. Acid-tolerant 536 strains were isolated from the feces of 30 pigs. To select useful strains, the first screened strains were treated with strong acid solution(pH 2.5 to 3.0) for 3 hours and subsequentely treated with the anaerobic diluent solution containing 0.15% Oxgall for 3 hours. Among these strains, 151 strains showed strong tolerance to both acid and bile. Lactobacillus and Streptococcus tolerant to the acid and bile were treated with heat at $80^{\circ}C$ for 15 min, and at $70^{\circ}C$ for 5 min in Bifidobacterium and yeast. As a result of heat treatment, 38 strains were obtained as heat-tolerant strains. All of heat-tolerant strains were tested for antibiotic resistance against virginiamycin, sulfathiazole, aureomycin, neomycin, linsmycin, tiamulin and ASP250 which were used as feed additives for growth promotion in pigs. Finally, one strain each from Lactobacillus, Streptococcus, Bifidobacterium and yeast that showed resistance to acid, bile, heat and antibiotics was selected for probiotic use in pigs.
산성강하물의 영향을 받는 대전공단지역과 영향을 받지 않는 청정지역인 대전 계족산 자연휴양림에서 자라는 밤나무(Castanea crenata)의 잎표면에서 서식하는 총세균수, 생존세균수, 종속영양세균수, 내산성세균수를 1996년 8월부터 1997년 8월까지 5회에 걸쳐 조사하였다. 공단지역 잎표면 평균 총세균수, 생존세균수 및 종속영양세균수는 각각 $9.9{\times}10^5cell/cm^2$, $1.6{\times}10^6cell/cm^2$, $7.1{\times}10^3cfu/cm^2$로서 청정지역에 비하여 각각 1.5배, 2배, 2.6배 정도로 관찰되었다. MPN법으로 측정한 pH 5.6에서의 잎표면 내산성세균수는 공단지역 $3.3{\times}10^4$, 청정지역 $3.4{\times}10^4MPN/cm^2$로 거의 같았고, pH 4.0에서의 내산성세균수는 공단지역에서 $1.9{\times}10^{-1}MPN/cm^2$인 반면 청정지역세서는 전혀 검출되지 않았다. pH 3.0에서의 내산성 잎표면세균수는 공단지역과 청정지역의 잎권 어느 곳에서도 검출되지 않았다. 한편 계절별 잎포면세균수의 분포는 대체로 잎이 나기 시작하여 크기가 가장 작은 5월에 최대를, 그리고 낙엽이 지는 11월에 최소를 나타내었다. 이런 결과는 공단지역의 대기오염물질의 침적이 주변의 식물 잎표면 세균수를 감소시키지는 않으며, 특히 산성강하물의 영향으로 내산성세균수가 증가함을 보여주고 있다.
Ryu Hye Myung;Kim Sang Gyo;Kim Su Won;Choi Ju Yun;Nam Jin Sik;Yoo Min
대한의생명과학회지
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제11권4호
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pp.539-543
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2005
Elevated level of serum cholesterol in humans is a risk factor correlated with the development of coronary heart disease. We have screened lactic acid bacteria from pig and human feces for the development of probiotics which have an anti-cholesterol effect. We have used special media to isolate only lactic acid bacteria and they were subjected to the experiments such as oxgal test, carbohydrate fermentation test. Results from the acid tolerance test and growth test in the presence of oxgal demonstrated that some strains would likely survive in thuman stomach, where acidity is high, and in small intestine, where bile fluid is present. In conclusion, we were able to screen lactic acid bacteria which were tolerant against bile acid and supposed to be prominent to lower the cholesterol level in human serum.
Nguyen, Hai Thi;Nguyen, Huong Lan;Nguyen, Minh Hong;Nguyen, Thao Kim Nu;Dinh, Hang Thuy
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제30권7호
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pp.1005-1012
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2020
Acid mine drainage (AMD) has been a serious environmental issue that threatens soil and aquatic ecosystems. In this study, an acid-tolerant sulfate-reducing bacterium, strain S4, was isolated from the mud of an AMD storage pond in Vietnam via enrichment in anoxic mineral medium at pH 5. Comparative analyses of sequences of the 16S rRNA gene and dsrB gene involved in sulfate reduction revealed that the isolate belonged to the genus Desulfovibrio, and is most closely related to Desulfovibrio oxamicus (with 99% homology in 16S rDNA sequence and 98% homology in dsrB gene sequence). Denaturing gradient gel electrophoresis (DGGE) analyses of dsrB gene showed that strain S4 represented one of the two most abundant groups developed in the enrichment culture. Notably, strain S4 was capable of reducing sulfate in low pH environments (from 2 and above), and resistance to extremely high concentration of heavy metals (Fe 3,000 mg/l, Zn 100 mg/l, Cu 100 mg/l). In a batch incubation experiment in synthetic AMD with pH 3.5, strain S4 showed strong effects in facilitating growth of a neutrophilic, metal sensitive Desulfovibrio sp. strain SR4H, which was not capable of growing alone in such an environment. Thus, it is postulated that under extreme conditions such as an AMD environment, acid- and metal-tolerant sulfate-reducing bacteria (SRB)-like strain S4 would facilitate the growth of other widely distributed SRB by starting to reduce sulfate at low pH, thus increasing pH and lowering the metal concentration in the environment. Owing to such unique physiological characteristics, strain S4 shows great potential for application in sustainable remediation of AMD.
In this study, a method of heat adaptation was implemented in an attempt to increase the upper thermal threshold of two Streptococcus thermophilus found in South Korea and identified the alterations in membrane fatty acid composition to adaptive response to heat. In order to develop heat tolerant lactic acid bacteria, heat treatment was continuously applied to bacteria by increasing temperature from 60℃ until the point that no surviving cell was detected. Our results indicated significant increase in heat tolerance of heat-adapted strains compared to the wild type (WT) strains. In particular, the survival ratio of basically low heat-tolerant strain increased even more. In addition, the strains with improved heat tolerance acquired cross protection, which improved their survival ratio in acid, bile salts and osmotic conditions. A relation between heat tolerance and membrane fatty acid composition was identified. As a result of heat adaptation, the ratio of unsaturated to saturated fatty acids (UFA/SFA) and C18:1 relative concentration were decreased. C6:0 in only heat-adapted strains and C22:0 in only the naturally high heat tolerant strain were detected. These results support the hypothesis, that the consequent increase of SFA ratio is a cellular response to environmental stresses such as high temperatures, and it is able to protect the cells from acid, bile salts and osmotic conditions via cross protection. This study demonstrated that the increase in heat tolerance can be utilized as a mean to improve bacterial tolerance against various environmental stresses.
Surono, Ingrid S.;Pato, Usman;Koesnandar, Koesnandar;Hosono, A.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제22권1호
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pp.119-123
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2009
In vitro acid- and bile-tolerant lactic acid bacteria isolated and identified from Indonesian traditional fermented milk dadih might be considered as potential probiotic strains after further characterization with animal models, especially for their therapeutic properties. Five dadih lactic bacteria isolates each had moderate survival rate for 2 h at pH 2.0, as well as bile tolerance. The aim of this research was to identify candidate probiotic lactic bacteria among indigenous dadih lactic isolates originated from Bukit Tinggi, West Sumatra, especially their in vivo antimutagenic property. Milk cultured with Enterococcus faecium IS-27526 significantly lowered fecal mutagenicity of rats as compared to the control group, skim milk, and milk cultured with L. plantarum IS-20506. These results suggest that Enterococcus faecium IS-27526 may serve as a potential probiotic strain with its antimutagenicity.
건조수산가공품의 새로운 살균, 저장법의 개발을 목적으로 건새우 및 건멸치 분말의 현행 살균방법인 ethylene oxide에 의한 훈증처리와 방사선 조사와의 미생물 살균효과 및 이화학적 특성에 미치는 검토한 결과는 다음과 같다. 시료의 미생물 오염은 중온성 전세균이 $10^{3}-10^{7}/g$, 내열성 세균이 $10^{2}~10^{4}/g$, 내산성 세균이 $10^{2}-10^{6}/g$ 정도였고, 내삼투압성 곰팡이를 포함한 곰팡이류와 대장균군도 건새우에서 $10^{2}/g$ 이상 오염되었다. 살균효과 실험에서 중온성 전세균, 내열성 세균 및 내산성 세균은 5~7 kGy 조사로 2-4 log cycles 정도 격감되었고, 7-10 kGy 조사로서 허용한계 이하로 살균되었으며, 이들의 D10값은 1.53~2.73 kGy였다. 곰팡이와 대장균군은 5~7 kGy 조사로 완전 사멸되었다. 한편 ethylene oxide 처리는 전 미생물의 살균이 불충분하였다. 이화학적 특성 즉 TBA가, TMA-N 함량, 아미노산, 무기질, 색도는 적정선량의 조사로는 무처리군과 거의 차이가 없었으나 ethylene oxide 처리군은 심한 품질의 변화를 보였다. 실온에서 3개월 저장 후 관능적 품질평가에서도 감마선 조사군이 ethylene oxide 처리 및 무처리군 보다 우수하게 나타났다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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