• 제목/요약/키워드: Acid protease

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장수버섯 배양법에 의해 urushiol이 제거된 발효옻 추출물이 된장발효에 미치는 영향 (Effect of Urushiol-Free Extracts from Fermented-Rhus verniciflua Stem Bark with Fomitella fraxinea on the Fermentation Characteristics of Doenjang (Soybean Paste))

  • 최한석;정석태;최지호;강지은;김유진;노종민;김명곤
    • 한국균학회지
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    • 제40권4호
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    • pp.244-253
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    • 2012
  • 된장제조공정에 발효옻 추출물을 첨가하고 염수발효기간 동안의 미생물, 효소활성, 유리아미노산, 유기산 및 일반성분 변화를 조사하였다. 염수발효 42일 경과 후 추출물 첨가군(0.7%, 2.0%, 5.0%, 10.0%, w/v)의 염수 중 총 유리아미노산 함량은 2188.3, 4634.7, 2982.7, 5070.6 mg/100 mL로 대조군 보다 각각 1.3, 2.8, 1.8, 3.1배 높게 나타났다. 염수를 걸러낸 된장의 미생물 분포는 일반세균 $0.3-12.0{\times}10^8$, 곰팡이 $3.0-21.0{\times}10^4$, 효모 $1.0-2.0{\times}10^4$, 대장균 불검출, B. cereus $3.0-25.0{\times}10^2$ cfu/g으로 추출물 첨가에 의해서 일반세균과 곰팡이의 생균수가 1 log cycle 범위 내에서 변하였을 뿐 큰 변화는 관찰되지 않았다. 발효옻 추출물 첨가에 의해서 skim milk 분해활성은 13.8-26.0%, starch 분해활성은 16.1-35.1%, acidic protease의 활성은 1.8-2.5배, 1.9, a-amylase의 효소활성은 6.4-7.0배 증가되었다. 발효옻 추출물이 첨가된 된장의 총 유리아미노산 함량은 각각 855.97, 1899.01, 1675.03, 1733.07 mg%로 추출물 첨가에 의해서 1.4-3.0배 상승하였으며, alanine, arginine, aspartic acid, citrulline, glutamic acid, glycine, histidine, isoleucine, leucine, lysine, phenylalanine, proline, serine, threonine, tyrosine, valine 등이 주요 유리아미노산이었다. 유기산은 lactic, acetic, pyroglutamic acid가 주요 유기산이었다. 일반성분은 pH, 수분, 회분, 염도, 아미노산성 질소 함량이 증가하였다.

어분(魚粉)을 이용(利用)한 간장제조(製造)에 관(關)한 연구(硏究) (A Study on the Manufacturing of Sauce Utilizing Fish Meals)

  • 이정숙;김재욱
    • Applied Biological Chemistry
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    • 제29권2호
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    • pp.130-137
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    • 1986
  • 대두(大豆)대신에 어분(魚粉)을 이용(利用)하여 간장을 만들기 위하여 어분(魚粉)과 보리의 배합비(配合比)를 달리하여 코오지를 만들고 이것으로 간장을 담그어 효소역가(酵素力價) 및 화학성분(化學成分) 변화(變化)등을 분석(分析)하고 관능검사(官能檢査)를 하였다. 제국중(製麴中) 시간(時間)이 지남에 따라 수분함량(水分含量)은 전반적(全般的)으로 김서(減少)하였고, 환원당함량(還元糖含量)은 12시간(時間)까지 증가(增加) 하다가 그 후(後) 약간 감소(減少)하고 36시간(時間) 이후(以後)에는 별다른 변화가 없었다. 그리고 전질소(全窒素)의 함량(含量)은 모든 구(區)에서 계속 증가(增加)하였데 어분(魚粉)의 배합량(配合量)이 많을수록 함량(含量)이 높았다. 제국중(製麴中) 효소역가(酵素力價)의 변화(變化)는 amylase와 protease가 다같이 $36{\sim}48$시간(時間)까지 급격히 증가(增加)하였으나 그 이후(以後)에는 큰 변화(變化)가 없었는데 여러가지 시험구중(試驗區中) 어분(魚粉)과 보리의 배합비(配合比)가 10 : 16인 구(區)에서 후기(後期)의 효소역가(酵素力價)가 가장 높았다. 숙성중(熟成中) 환원당(還元糖)은 50일(日)경까지 증가(增加)하다가 그 이후(以後)에는 별 변화(變化)가 없었는데 amylase의 활성(活性)이 높은 구(區)에서 환원당(還元糖)의 함량(含量)도 높았다. 그리고 전질소(全窒素)와 아미노태(態) 질소(窒素)도 숙성중(熟成中) 계속 증가(增加)하였는데 protease의 활성(活性)이 큰 구(區)에서 이들의 함량(含量)이 다같이 높았고 총산(總酸)은 70일(日)경까지 증가(增加)하다가 이후(以後) 별 변화(變化)가 없었다. 숙성(熟成)된 간장을 가열(加熱)처리 했을 때 흡광도(吸光度)는 시간(時間)이 지남에 따라 직선적(直線的)으로 증가(增加)하였는데 그 증가율(增加率)은 보리의 배합비(配合比)가 큰 구(區) 일수록 비교적 높았다. 관능검사(官能檢査)에서 색(色)은 어분(魚粉)과 보리의 배합비(配合比)가 10 : 5인 구(區)가 가장 진하고 10 : 13, 10 : 16인 구(區) 순(順)으로 비교적 엷었으며 향기(香氣)는 10 : 10인 구(區)가 가장 우수하였고, 맛은 10 : 5인 구(區)가 가장 좋았으나 10 : 13, 10 : 16, 10 : 18 구(區)와 유의차(有意差)를 인정할 수 없었고 희석액의 경우는 10 : 16구(區)가 우수하였다. 이러한 결과(結果)로 보아 어분(魚粉)을 이용(利用)하여 비교적 질(質)이 좋은 간장을 만들 수 있었으며 코오지 제조시(製造時) 어분(魚粉)과 보리의 배합비(配合比)는 $10\;:\;13{\sim}16$이 적당(適當)하였다.

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Meat Tenderizer 제조에 관한 연구 -제2보 Asp. oryzae 생산 protease의 연육효과- (Study on Meat Tenderizer -Part II. Tenderizing ability of Enzyme from Asp. oryzae-)

  • 이정희;김건화;유주현;양융
    • 한국식품과학회지
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    • 제7권4호
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    • pp.229-237
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    • 1975
  • Protease생산(生産)을 위한 Asp. oryzae의 배양조건(培養條件), 생산효소(生産酵素)의 정제(精製) 및 정제효소(精製酵素)의 육연화(肉軟化)에 관한 효과(效果)에 대(對)하여 연구 하였다. Asp. oryzae가 생산(生産)하는 proteolytic enzyme이 육연화(肉軟化)에 미치는 영향(影響)을 조사한 결과(結果)는 다음과 같다. 1. Asp. oryzae를 밀기울에 고체배양(固體培養)한 결과(結果) 최적조건(最適條件)은 배양일수(培養日數) 3일, 산수량(散水量) 130%, pH 6.5와 탄소원(炭素原)으로는 glucose 2%, 질소원으로는 urea 0.03%, mineral salts로 $MgSO_4$ 0.1%가 가장 좋았다. 2. Asp. oryzae 고정(固定)배양액으로부터 효소(酵素)를 추출(抽出)하고 그 추출액으로부터 유안염석(硫安鹽析) 및 Sephadex G-75 columm chromatography에 의하여 정제(精製)하였다. 3. 정제(精製)된 enzyme은 산성(酸性)에서는 hemoglobin, 중성(中性), alkali성(性)에서는 casein를 기질(基質)로 사용한 결과 작용최적(作用最適) pH가 3.0, 6.6, $8.4{\sim}8.5$, $10{\sim}10.5$이었으며 pH의 안정성(安定性)범위는 $pH\;6{\sim}10$이었다. 4. 최적온도(最適溫度)는 $50^{\circ}C$ 이었으나 안정성(安定性)은 $40^{\circ}C$ 까지였다. 5. Metal ion 및 EDTA에 미치는 영향은 protease는 Ag ion에 저해 되었다. 또 ion 농도가 낮아짐에 따라 금속 ion에 의한 조해(阻害)는 감소되었다. EDTA에 의하여서도 조해(阻害)되었다. 6. Chicken과 bovine으로부터 myofibril과 actomyosin을 추출(抽出) 정제(精製)하여 attack시킨 결과(結果) 근원섬유단백질(筋原纖維蛋白質)의 MgATPase활성(活性) 및 Ca-ATPase활성(活性)은 현저하게 변화(變化)하였다. 따라서 본(本) 효소(酵素)는 연육소(軟肉素)로서 이용(利用)할 수 있음을 알았다.

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폴리오바이러스의 분자생물학 (Molecular Miology of the Poliovirus)

  • 최원상
    • 생명과학회지
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    • 제7권4호
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    • pp.392-401
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    • 1997
  • 폴리오바이러스는 바이러스들 중에서도 특히 커기가 작은 바이러스로서 피막(coat)을 둘러싸는 막(envelop) 이 없다. 폴리오바이러스는 (+) 가닥의 단일 RNA 게놈을 갖는데 이는 한 개의 해독판 (open reading frame)을 이용하여 다단백전구체를 만든 후 바이러스 자체의 단백질분해효소에 의해 스스로 잘라져서 궁극적으로느 특이한 기능을 갖는 여러개의 단백질이 된다. P1 다단백질전구체로부터 만들어지는 단백질들은 바이러스의 피막을 구성하는 성분이다. 단백질분해효소인 2A에 의한 최초의 절단은 구조단백질 P1 전구체와 구조단백질이 아닌 P2-P3간을 분리시켜준다. 단백질분해효소 2A는 진핵세포 판독개시인자(translation initiation factor) 4F의 한 subunit인 숙주단백질 p220의 절단에 간접으로 참여한다. 이 단백질의 절단은 캡(cap)에 의존하는 숙주세포의 대부분의 판독을 차단하게 되며 이는 판독에 사용되는 숙주세포의 모든 기구들을 캡에 의존하지 않는 폴리오바이러스 NA 특유의 판독을 위해 전적으로 사용할 수 있게 해준다. 2B, 2C, 2BC 단백질의 기능에 대해서는 많이 알려져 있지 않다. 2B, 2C, 2BC와 3CD 단백질들은 바이러스로 인해 만들어지는 소낭(vesicle)의 복제복합체에 함유되어 있으므로 바이러스의 RNA 복제시 중요한 역할을 함을 암시해준다. 새로이 만들어진 모든 바이러스 RNA는 VPg와 공유결합으로 연결되어 있다. VPg는 3AB로부터 만들어진 아미노산 22개 짜리의 폴리펩타이드이다. 3C와 3CD는 단백질분해소로 다단백질 전구체의 대부분의 절단부위를 잘라준다. 3C단백질은 숙주의 전사인자를 불활성화 시킴으로써 RNA polymer II와 III에 의한 전사를 저해한다. 3D는 RNA의존선RNA 중합효소이다. 폴리오바이러스는 (+)가닥 RNA 바이러스의 일반적인 복제양식을 따른다. 즉 (+) 가닥 RNA는 이와 상보적인 (-)가닥 RNA로 전사되고 이는 다시 (+)가닥 RNA의 합성을 위한 주형으로 사용된다. 폴리오바이러스의 RNA 합성은 세포내막에서 일어나는 데 RNA 복제에 요구되는 주형 RNA와 이때 필요한 단백질들이 어떤 방법으로 세포내막에서 모일 수 있는지는 아직 밝혀진 것이 적다. 바이러스입자의 형성은 세포막의 RNA 복제가 들어가는 데 피막단백질이 (+)가닥 RNA을 인식하는 표지 즉 packaging singal에 대해서는 거의 알려져 있지 않다. 폴리오바이러스 감염 후 첫 바이러스입자가 만들어지기 까는 약 6시간이 소요된다.

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난분해성 우모분해 Pseudomonas geniculata에 의한 케라틴 분해효소 생산 및 식물성장 촉진 활성 (Keratinase Production by Recalcitrant Feather Degrading Pseudomonas Geniculata and Its Plant Growth Promoting Activity)

  • 고태훈;이상미;이나리;정성윤;홍창오;손홍주
    • 한국환경과학회지
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    • 제22권11호
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    • pp.1457-1464
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    • 2013
  • We investigated the optimal conditions for keratinase production by feather-degrading Pseudomonas geniculata H10 using one variable at a time (OVT) method. The optimal medium composition and cultural condition for keratinase production were determined to be glucose 0.15% (w/v), beef extract 0.08% (w/v), $KH_2PO_4$ 0.12% (w/v), $K_2HPO_4$ 0.02% (w/v), NaCl 0.07% (w/v), $MgSO_4{\cdot}7H_2O$ 0.03%, $MgCl_2{\cdot}6H_2O$ 0.04% along with initial pH 10 at 200 rpm and $25^{\circ}C$, respectively. The production yield of keratinase was 31.6 U/ml in an optimal condition, showing 4.6-fold higher than that in basal medium. The strain H10 also showed plant growth promoting activities. This strain had ammonification activity and produced indoleacetic acid (IAA), siderophore and a variety of hydrolytic enzymes such as protease, lipase and chitinase. Therefore, this study showed that P. geniculata H10 could be not only used to upgrade the nutritional value of feather wastes but also useful in situ biodegradation of feather wastes. Moreover, it is also a potential candidate for the development of biofertilizing agent applicable to crop plant soil.

Effect of Feeding Ficus infectoria Leaves on Rumen Microbial Profile and Nutrient Utilization in Goats

  • Singh, B.;Chaudhary, L.C.;Agarwal, N.;Kamra, D.N.
    • Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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    • 제24권6호
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    • pp.810-817
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    • 2011
  • A feeding trial was conducted to study the effect of tannin rich Pakar (Ficus infectoria) leaves on microbial profile, rumen fermentation and nutrient utilization in goats. Eight goats divided in two groups were fed pakar leaves (experimental group) and green oats (control group) as sole roughage source along with a fixed quantity of concentrate mixture for a period of 3 months. Two metabolic trials of six days duration were conducted after 30 and 90 days of experimental feeding. The dry matter intake was significantly higher (p<0.05) and digestibility's of DM, OM, CP, EE, NDF and ADF were reduced in experimental as compared with the control group. The TDN intake was similar (236.52 vs. 240.39 g/d) in both the groups. All the animals were in positive nitrogen balance. The concentration of ammonia nitrogen, TVFA, lactic acid and activities of xylanase and protease were reduced in pakar leaves fed goats. The rumen microbial profile as obtained by MPN technique showed no change in total bacterial population but total fungi and cellulolytic bacteria were reduced (p<0.05), whereas, tannin degrading/tolerant bacteria increased with the feeding of pakar leaves. Real time PCR data revealed a decrease in Ruminococcus flavefaciens, an increase in methanogens and no change in the Fibrobacter succinogenes population by feeding of pakar leaves.

사독(蛇毒)에 대한 문헌적(文獻的) 고찰(考察) (The Study on The Snake Venom)

  • 이진선;권기록
    • 대한약침학회지
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    • 제2권1호
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    • pp.73-91
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    • 1999
  • This study was carried out to invastigate the researches of Snake Venom and snakes which used in treatment 1. The fist literature that used the snake for treatment is Shin Nong Ben Cao Jing 2. Composition of Snake Venom is consist of Enzymatic proteins ; Phospholipase A(A1-2), Protease, L-amino acid oxidase etc, and Non-enzymatic proteins ; Crotamine(Cytolysin), Proteolytic factor(Hematoxin), Crotoxin(Neurotoxin) etc. 3. Main toxins in Snake Venom are Hematoxin, Cytolysin, Neurotoxin and Cardiotoxin. Lethal dose 50 value of Agkistrodon brevicaudus is $45.87{\mu}g$/18g, Agkistrodon saxatilis is $10.28{\mu}g$/18g, Agkistrodon ussuriensis is $8.68{\mu}g$/18g, therefore Agkistrodon ussuriensis has strongist Snake Venom of all in Korea. 4. Pharmacological actions of Snake Venom are anticoagulation, thrombolytic function, hypotensor etc. 5. Systemic syndromes and signs after snakebite are Dizziness(25.7%), Vomitting(23.1%), Fever(22%), Visual disturbance(18%), Headache(17.7%) and Dyspnea(17.6%), etc. 6. Local syndrome and sign after snakebite is Discoloration(54.2%), Bleeding(20.2%), Bullae(10.7%), Skinulcer(10.8%), etc. 7. Pathological syndromes after snakebite are WBC increase, Urine protein, Urine sugar, Haematuria and elevation of S-GDT, S-GPT etc. These syndromes are leaded by Hematoxin and Cytolysin. 8. Complication signs after snakebite are Cellulitis, Gastritis, Lympoma, Abscess etc. 9. Common function of Viperidae(Agkistrodon acutus or Zaocys dhumnades etc) is expelling the wind(祛風), removing obstruction in the channels(通絡), antipastic function(止痙). And it is used in order to cure hemiparesis, hemiplegia, facial palsy and CVA disease, etc. 10. Using way of snake for medical treatment is various like Herbal alchol therapy, pill, powder and injection etc. The Study on the Snake Venom should be carried out continuously for using of medical treatment.

Characterization and Enhanced Production of Enterocin HJ35 by Enterococcus faecium HJ35 Isolated from Human Skin

  • Yoon Yoh Chang;Park Hye Jung;Lee Na-Kyoung;Paik Hyun-Dong
    • Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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    • 제10권4호
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    • pp.296-303
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    • 2005
  • A strain named as HJ35 was isolated from the skin of sixty-five men and fourteen women for acne therapy, in order to find an effective antimicrobial agent against Propionibacterium acnes. Isolate HJ35 was identified as Enterococcus faecium based on 16 rDNA sequence and produced enterocin HJ35 having antimicrobial activities against most lactic acid bacteria, En­terococcus spp., Staphylococcus aureus, S. epidermidis, Clostridium perfringens, some bacilli, Mi­crococcus flavus, Listeria monocytogenes, L. ivanovii, Escherichia coli, Pseudomonas fluorescens and Propionibacterium acnes, in the modified well diffusion method. Especially, enterocin HJ35 showed a bactericidal activity against Propionibacterium acnes P1. The antimicrobial activity of enterocin HJ35 was disappeared completely with the use of protease XIV. But enterocin HJ35 activity is very stable at high temperature (up to $100^{\circ}C$ for 30 min), in wide range of pH (3.0${\~}$9.0), and by treatment with organic solvents. The apparent molecular mass of enterocin HJ35 was estimated to be approximately 4${\~}$4.5 kDa on detection of its bactericidal activity after SDS-PAGE. In batch fermentation of E. faecium HJ35, enterocin HJ35 was produced at the mid­log growth phase, and its maximum production was obtained up to 2,300 AU/mL at the late stationary phase. By employing fed-batch fermentation, the enhanced production of enterocin HJ35 was achieved up to 12,800 AU/mL by feeding with 10 g/L glucose or 6 g/L lactate.

Expression Analysis of Cathepsin F during Embryogenesis and Early Developmental Stage in Olive Flounder (Paralichthys olivaceus)

  • Lee, Jang-Wook;Lee, Young Mee;Yang, Hyun;Noh, Jae Koo;Kim, Hyun Chul;Park, Choul-Ji;Park, Jong-Won;Hwang, In Joon;Kim, Sung Yeon;Lee, Jeong-Ho
    • 한국발생생물학회지:발생과생식
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    • 제17권3호
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    • pp.221-229
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    • 2013
  • Cathepsins are members of the multigene family of lysosomal cysteine proteinases and have regulated function in several life processes. The potential role of cathepsin F cysteine gene was expected as protease in the yolk processing mechanism during early developmental stage, but expression analysis was unknown after fertilization. The alignment analysis showed that amino acid sequence of cathepsin F from olive flounder liver expressed sequence tag (EST) homologous to cathepsin F of other known cathepsin F sequences with 87-98% identity. In this study, we examined the gene expression analysis of cathepsin F in various tissues at variety age flounder. Tissue distribution of the cathepsin F mRNA has been shown to be ubiquitous and constitutive pattern regardless of age in each group, although derived from cDNA library using liver sample. The mRNA level of cathepsin F more increased as developmental proceed during embryogenesis and early developmental stage, especially increased in the blastula, hatching stage and 3 days post hatching (dph). As a result, it may suggest that the proteolysis of yolk proteins (YPs) has been implicated as a mechanism for nutrient supply during early larval stages in olive flounder.

Anti-Complementary Properties of Polysaccharides Isolated from Fruit Bodies of Mushroom Pleurotus ostreatus

  • Kweon, Mee-Hyang;Jang, Hyo;Lim, Wang-Jin;Chang, Hyo-Ihl;Kim, Chan-Wha;Yang, Han-Chul;Hwang, Han-Joon;Sung, Ha-Chin
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제9권4호
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    • pp.450-456
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    • 1999
  • A high molecular-weight water-soluble fraction(PO) obtained by the ethanol precipitation of 0.1 N NaOH extracts of the mushroom Pleurotus ostreatus showed 82% anti-complementary activity for complement consumption hemolysis. The PO consisted of 42% carbohydrate (w/w), 50% protein (w/w), and 3% uronic acid (w/w). Fifty-eight percent of the anti-complementary activity decreased by periodate oxidation and 22% by protease digestion, suggesting that the sugar and protein moieties are essential for this activity. Two polysaccharide fractions, PO-IIIa-1 and PO-IIIa-2, with anti-complementary activity were isolated from the PO using DEAE-Sepharose FF followed by Sephadex G-75 and Sepharose CL-6B gel permeation chromatographies. The PO-IIIa-2 was found by HPLC to be nearly homogeneous, with the molecular mass of 531 kDa, and showed 96% $ITCH_{50}$ (inhibition against the total complement hemolysis of deionized water as the control) at a concentration of 1 mg/ml. This fraction contained galactose, mannose, fucose, and glucose with molar ratios of 1.75:1:0.65 and 0.59, respectively. The majority of galactose and mannose units in the PO-IIIa-2 were composed of TGalp1 ->, ->6Galp1->, ->2,6Galp1->, and ->Manp1->. The PO-IIIa-1 (molecular mass of 2000 kDa), exhibiting higher activity than the PO-IIIa-2, was further purified into two fractions, unbound proteoglycan (PO-IIIa-1A) and bound glucomannan (PO-IIIa-lB), by affinity chromatography using ConA-Sepharose CL-4B. The anti-complementary activity of each affinity purified fraction decreased as compared to that of the native PO-IIIa-1 fraction, indicating that the formation of complex between both polysaccharide fractions was necessary for full anti-complementary activity.

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