Objectve : Okadaic acid is a specific inhibitor of serine/threonine protein phosphatase 1 and 2A. In order to know the mechanism of apoptosis induced by okadaic acid, we treated FRTL-5 thyroid cells with okadaic acid and measured the changes of important proteins that are involved in apoptosis. Materials and Methods: We measured caspase 3 activity, $PLC-{\gamma}1$ degradation, the expression of XIAP, cIAP1, cIAP2, and cytochrome c release in okadaic acid-treated FRTL-5 thyroid cells. Results: Okadaic acid-induced caspase 3 activation and $PLC-{\gamma}1$ degradation and apoptosis were dose-dependent with a maximal effect at a concentration of 80 nmol and time-dependent with a maximal effect at 24 hours after treatment. The elevated caspase 3 activity in okadaic acid treated FRTL-5 thyroid cells are correlated with down-regulation of XIAP and cIAP1, but not cIAP2. General and potent inhibitor of caspases, z-VAD-fmk. abolished okadaic acid-induced caspase 3 activity and $PLC-{\gamma}1$ degradation. The release of cytochrome c in okadaic acid-induced FRTL-5 thyroid cells was dose-dependent with a maximal effect at a concentration of 80 nmol. Conclusions: These findings suggest that mechanism of okadaic acid-induced apoptosis is associated with cytochrome c release and increase of caspase 3 activation in FRTL-5 thyroid cells.
This study was performed to evaluate the effect of dietary protein source and sulfur amino acid content on bone metabolism in ra. Thirty male rats (body weight 145$\pm$2g) were divided into three groups. The rats in the first group were fed on casein 20% diet as animal protein source and those in the second group were fed on soy 20% diet as plant protein source. Sulfur amino acid ratio of these group was 1.07:1. The rats in the third group were fed on soy 20% diet and the sulfur amino acid were supplemented with the amount contained as much in the soy 20% diet. All rats were fed on experimental diet and deionized water ad libitum for 9 weeks, The total body, spine, femur bone mineral density and bone mineral content were measured using Dual Energy X-ray Absorptiometry Calcium, phosphate, pyridinoline, creatinine in urine and calcium, phosphate, alkaline phosphatase, osteocalcin in serum were measured. During the experimental period, plant protein (soy protein) group had a lower urinary Ca excretion, urine pyridinoline & crosslinks value and had a higher Ca efficiency in total bone and femur bone mineral density than animal protein (casein) group. There were no significant differences in serum calcium, phosphate, alkaline phosphatase and osteocalcin among the three groups of the rats. The findings from this study demonstrated that plant protein (soy protein) is beneficial of bone mineral density because it had a higher Ca efficiency in total bone and femur bone mineral density than animal protein (casein). However, the supplementation of sulfur amino acid on soy results were consistent with prior studies that dietary sulfur amino acid load had a negative effect on calcium balance. The rats fed sulfur amino acid supplementation diet increased urinary calcium excretion and decreased calcium efficiency for total and femur mineral density. Therefore, dietary protein source and sulfur amino acid content influence bone metabolism. (Korean J Nutrition 37(2): 100-107, 2004)
Paik, Tai Hong;Han, Hae Wook;Lee, Kyu Sik;Chung, Ho Sam
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.12
no.2
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pp.84-92
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1983
In order to investigate the effect of autoxidized oil on the enzyme activity in the mouse liver, we administered the fixed dosage of autoxidized methyl linoleate (AOML) to mice once per day for 20 days by using stomach tube and investigated the enzyme activity with the histochemical staining method and biochemical analysis. The following results were obtained: The POV, COV and TBA value in the liver of AOML group were significantly increased than those of normal group. The phospholipid, triglyceride and total cholesterol in the liver of AOML group were slightly increased than those of normal group. The activities of acid phosphatase and alkaline phosphatase in the liver of AOML group were increased than those of normal group but ATPase activity was decreased in the AOML group. The decrease of RNA, accumulation of fat and damage of liver cells were observed as the morphological changes in the liver of AOML group. From the results obtained we conclude that the autoxidized methyl linoleate influenced upon the various enzyme activity and the morphological changes in the mouse liver.
Forty-nine plant species as additives to silkworm artificial diet and 5 species as cellulose sources for artificial diet were screened for their economic values as feed-resources for the silkworm. Feeding response to artificial diet was tested on 82 silkworm strains. The effect of rearing conditions on feeding response and enzyme activities in the silkworm was investigated. The results were summarized as follows. 1. Seven species out of 49, Vigna sinensis ENDL, Ipomoea vatatas Lamarck, Cyperus anuricus Var. Laxus, Alnus japonica Stendel, Trifolium repens L, Prunus serrulata Lindley. Var, Glycine max L increased feeding response, compared with the basic formula of artificial diet. 2. The economic values of Vigna sinensis ENDL, Ipomoea vatatas Lamarck, Cyperus anuricus Var. Laxus, Ainus japonica Stendel, Cassia tera L, Erigeron canedensis L as feed-resources for artificiale diet were recognized, through feeding experiment during the entire larval stage. 3. Mulberry cellulose showed the best results in rearing and cocoon characteristics. 4. The extent of feeding response varied according to strains and varieties. Varieties in japanese strains showed higher feeding response than those in chinese and european varieties, with considerable variations among a varieties in strains. 5. The begining of 4th instar seems to be a proper time to convert from mulberry to artificial diet, or artificial diet to mulberry, however the middle of 3rd instar seems acceptable. 6. The optimum temperature for artificial diet rearing is 30$^{\circ}C$ during the period of 1st-3rd instar and 28$^{\circ}C$ for 4th-5th instar. 7. Electrophoretic isozyme patterns of esterase and acid phosphatase on agarose gel, as affected by strain. rearing temperature and feed-resources, were observed as follow. (1) Isozyme patterns of mid-gut esterase varied, depending on instar. One or two more isozyme bands were observed in the larvae than feed on the mulberry fed for the artificial diet. (2) A strain, chinese-15 with a higher feeding response, had 1∼2 more bands than chinese-60 with a lower feeding response. (3) Five bands of mid-gut esterase in 3rd and 4th instar larvae reared at 28$^{\circ}C$. and 4 for 3rd instar and 6∼7 for 4th instar larvae at 35$^{\circ}C$ were observed. (4) No similar esterase bands could be found among mid-gut, blood and silkgland. There are five esterase bands in the midgut, one in blood and three in silkgland. (5) There was rather small digerence in acid phosphatase types of mid-gut and blood according to varieties and rearing temperature. No active band was shown in silkgland. In midgut, there was one acid phosphatase band at 3rd instar, two at 4th instar and three at 5th instar. In blood, one active band at 3rd or 4th instar and three bands at 5th inster wire detected.
Oh, Ka-Yoon;Kim, Ji-Youn;Lee, Song Min;Kim, Hee Sook;Lee, Kwang Hui;Lee, Sang-Hyeon;Jang, Jeong Su
Microbiology and Biotechnology Letters
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v.49
no.3
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pp.403-412
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2021
This study aimed to identify plant growth-promoting activity, phytopathogenic fungi growth inhibitory activity, mineral solubilization ability, and extracellular enzyme activity of the genus Bacillus in soil and the rhizosphere. With regards to antifungal activity against phytopathogenic fungi, DDP257 showed antifungal activity against all 10 pathogenic fungi tested. ANG20 showed the highest ability to produce indole-3-acetic acid, a plant growth-promoting factor (70.97 ㎍/ml). In addition, 10 species were identified to have 1-aminocyclopropane-1-carboxylate deaminase production ability, and most isolates showed nitrogen fixation and siderophore production abilities. Thereafter, the isolated strains' ability to solubilize minerals such as phosphate, calcite, and zinc was identified. With extracellular enzyme activity, the activity appeared in most enzymes. In particular, all the strains showed similar abilities for alkaline phosphatase, esterase (C4), acid phosphatase, and naphtol-AS-BI-phosphohydrolase production. This result was observed because the genus Bacillus secreted various organic substances, antibiotics, and extracellular enzymes. Therefore, through the results of this study, we suggest the possibility of using strains contributing to the improvement of the soil environment as microbial agents.
Prevalence of microfilariae, Dirofilaria immitis, Dirofilaria repens, Acanthocheilonema dracunculoides from 506 German Shepherd dogs reared in Korea was investigated by modified Knott's test to detect circulating microfilaria and by acid-phosphatase staining for differentiation of each microfilaria species. In the modified Knott's test, 74 of 506 dogs (14.6%) were microfilaria positive, and the prevelance of each species of microfilaria was 90.5% (67 of 74 samples) for D. immitis, 5.4% (4 of 74 samples) for duplicate infection with D. immitis and D. repens and 4.1% (3 of 74 samples) for mixed infection with D. immitis, D. repens and A. dracunculoides. It was considered that the paying attention to the existence not only D. immitis but also other microfilariae were needed in canine filariasis.
Changes in haemolymph proteins, hydrolases such as esterase(EST), acid phosphatase(ACP) and alkaline phosphatase(ALP) , and inorganic ion(Na+, K+ and Cl- ) contents were induced by the injection of Bacillus thuringiengis into haemocoel of the last instar larva of Heliothis assulta. Protein concentration of haemolymph was increased until 24 hrs after injection, and decreased thereafter. Among the 8 basic protein bands identified through acid - polyacrylamide gel electrophoresis(PAGE), 2 bands(bands a and b) became stronger by the bacterial infection. Activities of EST and ALP increased until 12 hrs after injection and then fell down, whereas ACP activity was decreased continuously with time after injection. Contents of inorganic ions were all increased by the bacterial injection, showing slow rate of increase in the chloride ion, but rapid in the sodium and potassium ions.
A Saccharomyces cerevisiae Protein Tyrosine Phosphatase, PTP1, was expressed from an Escherichia coli expression system and milligram quantities of active PTP1 were purified chromatographically. The substrate specificity of the recombinant PTP1 was probed using synthetic phosphotyrosine-containing peptides corresponding to the regulatory phosphorylation sites of the yeast MAP kinase homologues $Fus3_{176-186}$, $Kss1_{179-189}$, and $Hog1_{170-180}$. Peptide sequences derived from the MAP kinase homologues were chosen arbitrarily as starting points for sequence variation studies even though they are not likely to be candidates for physiological substrates of PTP1. Phosphotyrosyl-$Hog1_{170-180}$ peptide showed a $K_M$ value of 877 ${\mu}M$ and phosphorylated $Kss1_{179-189}$ and $Fus3_{176-186}$ peptides showed lower $K_M$ values of 74 ${\mu}M$ and 51 ${\mu}M$ each. To study the effect of sequence variations of the peptide, amino acids of the undecapeptide $Hog1_{170-180}$ (DPQMTGpYVSTR) were sequentially substituted by an alanine residue. More extensive variations of each amino acid revealed positional importance of each amino acid residue. Based on these results, we derived a peptide sequence (DADEpYDA) that is recognized by PTP1 with an affinity ($K_M$ is 4 ${\mu}M$) significantly higher than that of the peptides derived from the phosphorylation sites of Fus3, Kss1, and Hog1.
Choi, Bohm;Kim, Tae-Gun;Han, Seung-Hee;Park, Yoon-Hee;Lee, Won
Journal of Korean Dental Science
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v.5
no.1
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pp.37-44
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2012
Purpose: Among the facilitation of tooth movement in adult orthodontic treatment methods, surgical approaches are gaining popularity but complications following mechanical bone reduction are a problem. In this study, tooth movement was observed after alveolar bone was chemically demineralized to verify whether tooth movement had been facilitated. Materials and Methods: Twelve rabbits were used. In the experimental group, the alveolar bone of the left first molar area was exposed and demineralized. Thirty seven percents phosphoric acid was applied for 5 minutes for demineralization. The opposite first molar area was used as control. Two teeth were pulled with 200 g force and 4 rabbits each were sacrificed at 3, 7, and 14 days after the force was applied. Histologic examination was done with hematoxylin and eosin and tartrate-resistant acid phosphatase staining. Result: The histologic examination results revealed more bone resorption in the demineralized area. As time passed, the number of osteoclasts increased in the compressed area. The amount of tooth movement was larger in the experimental group compared to the control group but the difference was not statistically significant. Conclusion: The demineralization with etchant resulted in limited bone resorption, more tooth movement and less damage of the cementum after applied orthodontic force.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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