We examined the effect of PQQ, as a scavenger of superoxide, on osteoclast-like cell formation and on mature osteoclast function. To determine whether PQQ scavenges the superoxide, nitroblue tetrazolium (NBT) staining, which is a method to detect superoxide, was performed on HD-11 cells which are a chick myelomonocytic cell line having tartrate-resistant acid phosphatase (TRAP) activity in response to 1,25-dihydroxyvitamin $D_3\;[1,25(OH)_2D_3]$. Histochemical study of TRAP was also performed on HD-11 cells. PQQ inhibited the TRAP-positive multinucleated cell formation of chicken bone marrow cells was also examined. The addition of 20 ${\mu}M$ PQQ inhibited the formation of TRAP-positive multinucleated cell. When chicken osteoclasts were cultured on dentin slices, treatment of 20 ${\mu}M$ PQQ resulted in a significant decrease in dentin resorption by osteoclasts in terms of total resorption area and number of resorption pits. The present data suggest that PQQ, possibly as a scavenger of superoxide ion, inhibits the osteoclastic differentiation and bone resorption.
This study was conducted to characterize mulberry varieties by the analysis of morphological characters as well as biochemical and molecular biological markers. As for the budding stage Geumsang, Chosang i and Yeongbyeonchuwoo were early, but Dangsang 6, Hwangchuwoo were late. The lowest varietiy in rate of death atop was Dangsang 8(0.0%). Suncheonppong was the highest leaf yields in spring and autumn rearing season. In biochemical isozyme analysis, peroxidase gave good zymogram patterns in isoelectric focusing electrophoresis. There were high variations in RAPD analysis among the mulberry trees. From the obtained peroxidase and RAPD variations, cluster phylogenetic analysis was carried out using NT-SYS PC program. There were no clear grouping patterns between native varieties and leading varieties. The highest similarity was observed between Suwonsang 1 and Suwonsang 2 at about 90% similarity level.
The purpose of the experiment was to clarify morphologically normal growth pattern of the ductus deference in accordance with the sex maturity of meat-type cockerels. 1. Diameter of lumens in u, pp.r, mid and lower parts of ductus deferens, the most conspicuous enlargement of lumen was observed in the lower part. Heights of epithelial layers of ductus deferens showed abrupt growth at 12 weeks of age with subsequent gradual growth in all the part of u, pp.r, mid and lower, and heights of those at 30 weeks were a, pp.oximately 4 times as large in the u, pp.r and mid parts and 5 times as large in the lower part in contrast to those at 4 weeks of age. Thickness of muscular layer of ductus showed gradual growth in contrast with the diameter of lumen and height of epithelial layer, showing 1.3 times as large in the u, pp.r part, 1.6 times in the mid part and 1.9 times in the lower part at 30 weeks of age in contrast to the thickness at 4 weeks of age. 2. Within 10 weeks after hatching, lining cells of ductus deferens were mainly composed of round cells and columnar cells in simple columnar epithelium. During 10th to 20th week, the lining cells were mainly composed of high columnar cells and round cells in pseudostratified epithelium. From 22nd week, the lining cells were composed of pseudostratified columnar cells. Whereas round cells disa, pp.ared gradually. Enlargement of lumen and pooling of sperms in ductus deferens coincided with the maturation of seminiferous tubules. 3. In simple correlation between the values of testis weight and the values from various measurements in the ductus deferens, there was significant correlation coefficient with each other. 4. In the India ink absorption test, India ink granules were not absorbed on the epithelium of the ductus deferens, but the granules reactive to acid phosphatase a, pp.ared in a line on the free border of each parts of the ductus deferens. The granules reactive to alkaline phosphatase were noted on the luminal border of ductus deferens mainly, but weak reaction showed than acid phophatase were a, pp.ared. The granules reactive to PAS were a, pp.ared mostly near on the free border of hte epithelial cells of ductus deferens. 5. Number of sperm, Indes of sperm vitality and MRT in the different parts of ductus deferens were tended to be somewhat dominant in the mid and lower parts than in u, pp.r part, even though not significant in the statistical analysis. Ratio of sperm abnormality was tended to be relatively high in the u, pp.r part too, and in the sperm of abnormality blunted head was less in number significantly in the mid and lower part than in the u, pp.r part.
Inflammatory cytokines play a major role in osteoclastogenesis, leading to the bone resorption that is frequently associated with osteoporosis. Sulforaphane, isolated from the Broccoli(Brassica oleracea var. italia) florets, inhibits the production of inflamatory cytokine. In the present study, we determined inhibitory effect of sulforaphane on Receptor activator of nuclear factor κB ligand(RANKL)-induced osteoclast formation. Sulforaphane inhibited the expression of osteoclast marker genes, such as tartrate-resistant acid phosphatase(TRAP), cathepsin K, matrix metalloproteinase 9(MMP-9), and calcitonin receptor in RANKL-induced RAW 264.7 macrophage. Also, sluforaphane inhibited the expression of osteoclast protein, such as TRAP, MMP-9, tumor necrosis factor receptor-associated factor 6(TRAF6) and transcription factor nuclease factor of activated T cells(NFAT)c1. Sulforaphane inhibited RANKL-induced activiation of nuclear factor kappaB(NF-kappaB) by suppression RANKL-mediated NF-kappaB transcriptional acitivation. We are confirmed that sulforaphane inhibits not only transcriptional activity of NF-kappaB but also expressions of the osteoclastogenesis factors(TRAP, cathepsin K, MMP-9, calcitonin, TRAF6) and trranscription factor NFATc1.
Leaf tissue of Glycine max Merr. was fixed in para-formaldehyde-glutarldehyde and postfixed in osmium tetroxide or postassium permanganate for electron microscopy. The origin of cytolysome-like organelles of mesophyll cell was studied and changes of fine structure of the organelles according to treating solutions such as gibberellin (GA), kinethin (KI), 2,4-dichlorophenoxy acetic acid(2, 4-D) or 2, 4-D+GA(1mg/l, respectively) were observed. The cylolysome-like organelles differentiate in endoplasmic reticulum and plasmalemma, and they drop into vacuoles being isolated from the formers. They seem to change into myelin-like structure and to be degenerated by autodigestion. Cytolysome-like organelles involved in cell walls and vacuoles showed activity of acid phosphatase. In the group of GA and KI treatment, cytolysome-like organelles were similar to that of the control group. But in the treatmental groups of 2,4-D and 2,4-D+GA, myelin-like structures increased in size and autodigestion of this organelles were similar to that of the control group. But in the treatmental groups of 2,4-D and 2,4-D+GA, myelin-like structures increased in size and autodigestion of this organelle seemed to be accelerated. In the treatmental group of 2,4-D+GA, myelin-like structures shown high electron density were observed in cytoplasm and vacuoles together.
Environmental microorganisms are emerging as an important source of new enzymes for wide-scale industrial application. In this study, novel phytase genes were identified from a soil microbial community. For this, a function-based screening approach was utilized for the identification of phytase activity in a metagenomic library derived from an agricultural soil. Two novel phytases were identified. Interestingly, one of these phytases is an unusual histidine acid phosphatase family phytase, as the conserved motif of the active site of PhyX possesses an additional amino acid residue. The second phytase belongs to a new type, which is encoded by multiple open reading frames (ORFs) and is different to all phytases known to date, which are encoded by a single ORF.
From $70\%$ ethanol extract of the roots of Smilax bockii warb., seven flavonoids, kaempferol (1), $kaempferol-7-O-\beta-D-glucopyranoside$ (2), quercetin (3), isorhamnetin (4), (+)-dihydrokaempferol (5), engeletin (6), isoengeletin (7), and $n-butyl-\beta-D-fructopyranoside$ (8), caffeic acid n-butyl ester (9) were isolated and identified by means of chemical and spectroscopic. Compounds 2, 4, and 6-9 were isolated for the first time from the roots of S. bockii and compounds 2, 8, and 9 were firstly isolated from the genus Smilax. In addition, using the SEAP (Secreted alkaline phosphatase) assay system, we investigated the in vitro anti-inflammatory activity of the $70\%$ ethanol extract of the roots of S. bockii, which showed moderate activity in inhibiting $TNF-\alpha-induced NF-{\kappa}B$ activation with an $IC_{50}$ value of $166.6 {\mu}g/mL$.
Song, Yong-Seok;Kim, Man Sub;Lee, Dong Hun;Oh, Doek-Kun;Yoon, Do-Young
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.25
no.5
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pp.589-597
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2015
It has been reported that overexpression of MUC5AC induced by excessive inflammation leads to airway obstruction in respiratory diseases such as chronic obstructive pulmonary disease and asthma. 15-Hydroxyeicosatetraenoic acid (15-HETE) has been reported to have anti-inflammatory effects, but the role of 15-HETE in respiratory inflammation has not been determined. Therefore, the aim of this study was to investigate the effects of 15-HETE on MUC5AC expression and related pathways. In this study, phorbol-12-myristate-13-acetate (PMA) was used to stimulate NCI-H292 bronchial epithelial cells in order to examine the effects of 15-HETE. 15-HETE inhibited PMA-induced expression of MUC5AC mRNA and secretion of MUC5AC protein. Moreover, 15-HETE regulated matrix metallopeptidase 9 (MMP-9), mitogen-activated protein kinase kinase (MEK), and extracellular signal-regulated kinase (ERK). In addition, 15-HETE decreased the nuclear translocation of specificity protein-1 (Sp-1) transcription factor and nuclear factor κB (NF-κB). Furthermore, 15-HETE enhanced the transcriptional activity of peroxisome proliferator-activated receptor gamma (PPARγ) as a PPARγ agonist. This activity reduced the phosphorylation of protein kinase B (PΚB/Akt) by increasing the expression of phosphatase and tensin homolog (PTEN). In conclusion, 15-HETE regulated MUC5AC expression via modulating MMP-9, MEK/ERK/Sp-1, and PPARγ/PTEN/Akt signaling pathways in PMA-treated respiratory epithelial cells.
This study was performed to evaluate the effects of platelet-derived growth factor (PDGF) and epidermal growth factor (EGF) on the characteristics of beagle dog's periodontal ligament (BPD) cells and bone marrow (BBM) cells which have the important role on the early stage of periodontal tissue regeneration in vitro. In control group, the cells ($1.5{\times}10^5$cells/ml) were cultured alone with Dulbecco's Modified Eagle's Medium contained with 10% fetal bovine serum, $50{\mu]g/ml$ ascorbic acid, and 10mM/ml ${\beta}-glycerophosphate$. In experimental groups, growth factors, PDGF or EGF(10ng/ml), were added into the above culture condition. And then each group was characterized by examining the cell proliferation rate, amount of total protein synthesis, alkaline phosphatase activity at 1, 5, 9, 13, 17th day after seeding of cells into the culture wells. The results were as follows: 1. Both BPD and BBM cells in PDGF-treated group proliferated more rapidly than non-treated cells. This finding also was observed in EGF-treated group but it was not as prominent as that of PDGF-treated group. The proliferation rates of both cells showed the time-dependent pattern during experimental periods in all three groups. 2. Amount of total protein synthesis was more increased in PDGF-treated group than in control group. But no significant difference between EGF-treated group and control group was observed throughout experimental periods even though the tendency of amount of protein synthesis was time-dependent pattern. 3. Alkaline phosphatase activity also more increased in PDGF-treated group than control group. But slight decrease tendency was seen in both cells of EGF-treated group. From the above results, PDGF appeared to enhance the proliferation and cellular activities including amount of total protein synthesis and alkaline phosphatase activity of BPD and BBM cell, but EGF did not show notable effects. The optimal application of these growth factors was thought to be useful as the adjunctive means in periodontal regeneration procedures.
Objectives: This study aimed to investigate the effects of rhubarb extract on osteoclast differentiation in bone marrow-derived macrophages (BMMs). Osteoclasts are vital for bone resorption and remodeling. Osteoclast dysregulation can contribute to various bone-related disorders that directly affect oral health. Rhubarb, a medicinal plant with anti-inflammatory properties, has been shown to modulate bone metabolism. Methods: BMMs were isolated from the femurs and tibias of 5-week-old C57BL/6 mice and cultured in the presence of mouse macrophage colony-stimulating factor (M-CSF) for 3 days. Subsequently, BMMs were treated with M-CSF and receptor activator of nuclear factor-κB ligand (RANKL) to induce osteoclast differentiation. Results: Rhubarb extract effectively suppressed osteoclast differentiation in BMMs. Furthermore, rhubarb extract inhibited the mRNA expression of tartrate-resistant acid phosphatase (TRAP) and cathepsin K (CTSK), which are essential for osteoclastogenesis. Moreover, it inhibited the RANKL-induced expression of nuclear factor of activated T cell c1 (NFATc1), a crucial transcription factor in osteoclast differentiation. Conclusions: These results suggest that rhubarb extract promotes oral health by inhibiting osteoclastogenesis in BMMs. Thus, rhubarb extract shows promise as a therapeutic agent for bone-related disorders that directly affect oral health, particularly those associated with abnormal osteoclast activity. Further research and exploration of the underlying mechanisms are warranted to fully understand their potential clinical applications.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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